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鸭瘟病毒微滴数字PCR方法的建立与优化
1
作者
邱艳红
廖维连
+4 位作者
蒋文明
杨得胜
宋迟
洪瑾芳
刘道泉
《中国动物检疫》
CAS
2024年第10期91-95,共5页
为快速、准确检测鸭瘟病毒(duck enteritis virus,DEV),根据GenBank中DEV UL6基因序列,设计了微滴数字PCR(ddPCR)的引物和探针,通过条件优化,建立了检测DEV的ddPCR方法,并对该方法的灵敏度、特异性和重复性进行了验证。结果显示:在57.1...
为快速、准确检测鸭瘟病毒(duck enteritis virus,DEV),根据GenBank中DEV UL6基因序列,设计了微滴数字PCR(ddPCR)的引物和探针,通过条件优化,建立了检测DEV的ddPCR方法,并对该方法的灵敏度、特异性和重复性进行了验证。结果显示:在57.1℃退火温度下,当引物浓度为1.50µmol/L,探针浓度为0.45µmol/L时,病毒拷贝数浓度达到最大,为332 copies/µL;该方法的最低检测限为0.7 copies/µL,且对非鸭瘟病原均仅扩增出阴性微滴,无交叉反应;组内和组间重复试验变异系数均小于10%。结果表明,本研究建立的DEV ddPCR方法具有灵敏度高、特异性强、重复性好和稳定性高的优点,可用于低DEV含量样品的检测及其感染的早期诊断和流行病学调查。
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关键词
鸭瘟病毒
微滴数字PCR
方法建立
优化
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职称材料
题名
鸭瘟病毒微滴数字PCR方法的建立与优化
1
作者
邱艳红
廖维连
蒋文明
杨得胜
宋迟
洪瑾芳
刘道泉
机构
福州市动物疫病预防控制中心
将乐县动物疫病预防控制中心
中国动物卫生与流行病学中心
福建省动物疫病预防控制中心
永泰县金蛋发展有限公司
永泰县
畜牧水产服务中心
出处
《中国动物检疫》
CAS
2024年第10期91-95,共5页
基金
福建省科学技术厅星火项目(2022S0005)。
文摘
为快速、准确检测鸭瘟病毒(duck enteritis virus,DEV),根据GenBank中DEV UL6基因序列,设计了微滴数字PCR(ddPCR)的引物和探针,通过条件优化,建立了检测DEV的ddPCR方法,并对该方法的灵敏度、特异性和重复性进行了验证。结果显示:在57.1℃退火温度下,当引物浓度为1.50µmol/L,探针浓度为0.45µmol/L时,病毒拷贝数浓度达到最大,为332 copies/µL;该方法的最低检测限为0.7 copies/µL,且对非鸭瘟病原均仅扩增出阴性微滴,无交叉反应;组内和组间重复试验变异系数均小于10%。结果表明,本研究建立的DEV ddPCR方法具有灵敏度高、特异性强、重复性好和稳定性高的优点,可用于低DEV含量样品的检测及其感染的早期诊断和流行病学调查。
关键词
鸭瘟病毒
微滴数字PCR
方法建立
优化
Keywords
DEV
ddPCR
method establishment
optimization
分类号
S851.34 [农业科学—预防兽医学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
鸭瘟病毒微滴数字PCR方法的建立与优化
邱艳红
廖维连
蒋文明
杨得胜
宋迟
洪瑾芳
刘道泉
《中国动物检疫》
CAS
2024
0
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参考文献
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