本研究采用表面等离子体共振技术,以血管紧张素转换酶(angiotensin I converting enzyme,ACE)为蛋白配体,分析马氏珠母贝肉蛋白酶解产物(protein hydrolysate of Pinctada martensii,PHPM)超滤组分与配体的结合情况,利用质谱鉴定结合肽...本研究采用表面等离子体共振技术,以血管紧张素转换酶(angiotensin I converting enzyme,ACE)为蛋白配体,分析马氏珠母贝肉蛋白酶解产物(protein hydrolysate of Pinctada martensii,PHPM)超滤组分与配体的结合情况,利用质谱鉴定结合肽段的氨基酸序列后,筛选潜在抑制ACE活性强的肽段进行合成,研究其体外ACE抑制活性、抑制类型及多肽与ACE蛋白的相互作用。结果显示,PHPM分子质量在3 000~5 000 Da的超滤组分与ACE蛋白具有较强的结合信号,在结合物质的肽序列中优选出4种具有潜在活性的ACE抑制肽进行合成,其中多肽SLPWPMKPMNLIE的半数抑制浓度最低,并且通过氢键与ACE蛋白C端结构域的疏水口袋结合。展开更多
以远东拟沙丁鱼肌肉为原料,采用动物蛋白水解酶和风味蛋白酶联合水解制备其酶解产物(简称为SMMH),SMMH通过截留分子量分别为10 k Da和3 k Da超滤膜进行分离,获得3个组分,分别称为A(MW>10k Da)、B(3 k Da<MW<10 k Da)和C(MW<...以远东拟沙丁鱼肌肉为原料,采用动物蛋白水解酶和风味蛋白酶联合水解制备其酶解产物(简称为SMMH),SMMH通过截留分子量分别为10 k Da和3 k Da超滤膜进行分离,获得3个组分,分别称为A(MW>10k Da)、B(3 k Da<MW<10 k Da)和C(MW<3 k Da)。以体外血管紧张素转移酶(angiotensin-converting enzyme,ACE)抑制率为指标,评价其活性。结果显示:C的ACE抑制率最大,为71.4%,A的ACE抑制率最低,为34.6%。为了进一步评价组分C降血压效果,以原发性高血压大鼠为模型,采用灌胃方式,研究其短期(10 h)与长期(28 d)降血压功效,结果显示:灌胃3种剂量组分C对SHRs大鼠的收缩压有显著降低作用,并且随着剂量的增加,降血压作用越显著。为了确定C组分降血压肽的结构,采用凝胶色谱、离子色谱、反向高效液相色谱相结合对其进行了分离纯化,获得了2个较纯的组分,经电喷雾质谱鉴定,一种为Lys-Val-Glu-Pro-Leu-Pro,另一种为Pro-Ala-Leu,它们的IC50分别为22.9μmol/L和12.2μmol/L。展开更多
文摘以远东拟沙丁鱼肌肉为原料,采用动物蛋白水解酶和风味蛋白酶联合水解制备其酶解产物(简称为SMMH),SMMH通过截留分子量分别为10 k Da和3 k Da超滤膜进行分离,获得3个组分,分别称为A(MW>10k Da)、B(3 k Da<MW<10 k Da)和C(MW<3 k Da)。以体外血管紧张素转移酶(angiotensin-converting enzyme,ACE)抑制率为指标,评价其活性。结果显示:C的ACE抑制率最大,为71.4%,A的ACE抑制率最低,为34.6%。为了进一步评价组分C降血压效果,以原发性高血压大鼠为模型,采用灌胃方式,研究其短期(10 h)与长期(28 d)降血压功效,结果显示:灌胃3种剂量组分C对SHRs大鼠的收缩压有显著降低作用,并且随着剂量的增加,降血压作用越显著。为了确定C组分降血压肽的结构,采用凝胶色谱、离子色谱、反向高效液相色谱相结合对其进行了分离纯化,获得了2个较纯的组分,经电喷雾质谱鉴定,一种为Lys-Val-Glu-Pro-Leu-Pro,另一种为Pro-Ala-Leu,它们的IC50分别为22.9μmol/L和12.2μmol/L。
