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靶向阻断Sphk1促进奥沙利铂的抗结肠癌作用
1
作者
李政
曹洁玮
刘彬
《西安交通大学学报(医学版)》
北大核心
2025年第3期435-441,共7页
目的检测鞘氨醇激酶1(sphingosine kinase 1,Sphk1)在结肠癌患者及结肠癌细胞中的表达,明确靶向阻断Sphk1对奥沙利铂抗结肠癌作用的影响。方法从癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)下载结肠癌RNA高通量测序数据,分析Sphk1在...
目的检测鞘氨醇激酶1(sphingosine kinase 1,Sphk1)在结肠癌患者及结肠癌细胞中的表达,明确靶向阻断Sphk1对奥沙利铂抗结肠癌作用的影响。方法从癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)下载结肠癌RNA高通量测序数据,分析Sphk1在结肠癌组织与正常组织中的表达差异。培养人结肠癌SW48、HCT116、HT29和LoVo细胞,将细胞分为空白对照组、奥沙利铂组、转染阴性对照siRNA组、转染Sphk1 siRNA组、Sphk1抑制剂二甲基鞘胺醇(DMS)组以及奥沙利铂与DMS联合应用组。Western blotting检测结肠癌细胞中Sphk1及磷酸化Sphk1(p-Sphk1)的蛋白表达;ELISA试剂盒检测Sphk1的活性及1-磷酸鞘氨醇(sphingosine-1-phosphate,S1P)的含量;MTT检测奥沙利铂对细胞活力的影响。制备结肠癌细胞裸鼠种植瘤模型并进行相关干预,绘制肿瘤生长曲线,并通过Western blotting检测肿瘤组织中p-Sphk1的蛋白表达。结果对TCGA数据库中的结肠癌测序数据的生物信息学分析表明,Sphk1在结肠癌组织中的表达显著高于正常组织。Western blotting、ELISA检测结果显示,HT29和LoVo细胞中Sphk1及p-Sphk1的蛋白表达高于SW48和HCT116细胞,Sphk1的活性显著增高;MTT结果表明HT29和LoVo细胞对奥沙利铂呈现耐药性,采用Sphk1 siRNA阻断Sphk1的表达能够恢复细胞对奥沙利铂的敏感性。DMS和奥沙利铂联合应用与单独应用相比,可协同抑制肿瘤细胞的活力、Sphk1活性以及S1P的表达。在结肠癌细胞裸鼠种植瘤模型中,奥沙利铂与DMS联合给药对种植瘤生长的抑制作用明显强于单一给药组,并且能够协同降低种植瘤中p-Sphk1蛋白表达以及动物血清中S1P的浓度。结论Sphk1的表达和活化与结肠癌对奥沙利铂的敏感性紧密相关。通过靶向阻断Sphk1能够逆转结肠癌细胞对奥沙利铂的耐药性,显著增强奥沙利铂在体内外的抗肿瘤作用。
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关键词
Sphk1
结肠癌
奥沙利铂
耐药
敏感性
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职称材料
Gremlin基因转染对高糖环境中系膜细胞增殖的影响
2
作者
黄海霞
黄海英
《重庆医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第1期51-56,共6页
目的 :观察体外转染Gremlin质粒或Gremlin siRNA质粒对小鼠肾小球系膜细胞(mouse glomerular mesangial cells,MMCs)溴脱氧尿苷(bromodeoxyuridine,BrdU)及Ⅳ型胶原表达的影响。方法:将MMCs分为7组:正常对照组(NG,5.5 mmol/L)、正常糖+...
目的 :观察体外转染Gremlin质粒或Gremlin siRNA质粒对小鼠肾小球系膜细胞(mouse glomerular mesangial cells,MMCs)溴脱氧尿苷(bromodeoxyuridine,BrdU)及Ⅳ型胶原表达的影响。方法:将MMCs分为7组:正常对照组(NG,5.5 mmol/L)、正常糖+甘露醇组(NG+M,24.5 mmol/L甘露醇)、正常糖+空质粒组(NG+V)、正常糖+Gremlin质粒组(NG+P)/正常糖+Gremlin siRNA质粒组(NG+gremlin si)、高糖组(HG,30 mmol/L)、高糖+空质粒组(HG+V)以及高糖+Gremlin质粒组(HG+P)/高糖+Gremlin siRNA质粒组(HG+gremlin si)。在高糖刺激24 h后,应用ELISA法测定BrdU表达,放免法测定Ⅳ型胶原浓度。结果:与NG组相比,NG+P组和HG组BrdU表达增强及Ⅳ型胶原浓度增加(均P=0.000);与HG组相比,HG+P组BrdU表达进一步增强及Ⅳ型胶原浓度进一步上调(均P=0.000);然而,Gremlin siRNA质粒转染可抑制高糖诱导的BrdU表达增强及Ⅳ型胶原浓度增加(均P=0.000)。结论:Gremlin基因促进MMCs增殖和Ⅳ型胶原聚集;Gremlin基因可能在糖尿病肾病发病中起到重要作用。
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关键词
GREMLIN
转染
细胞增殖
葡萄糖
肾小球系膜细胞
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职称材料
题名
靶向阻断Sphk1促进奥沙利铂的抗结肠癌作用
1
作者
李政
曹洁玮
刘彬
机构
河北
医
科
大学第四
医院
外
二
科
武警河北总队医院内二科
河北
医
科
大学第
二
医院
中心实验室
出处
《西安交通大学学报(医学版)》
北大核心
2025年第3期435-441,共7页
基金
国家自然科学基金资助项目(No.81402510)
河北省自然科学基金资助项目(No.H2022206492)。
文摘
目的检测鞘氨醇激酶1(sphingosine kinase 1,Sphk1)在结肠癌患者及结肠癌细胞中的表达,明确靶向阻断Sphk1对奥沙利铂抗结肠癌作用的影响。方法从癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)下载结肠癌RNA高通量测序数据,分析Sphk1在结肠癌组织与正常组织中的表达差异。培养人结肠癌SW48、HCT116、HT29和LoVo细胞,将细胞分为空白对照组、奥沙利铂组、转染阴性对照siRNA组、转染Sphk1 siRNA组、Sphk1抑制剂二甲基鞘胺醇(DMS)组以及奥沙利铂与DMS联合应用组。Western blotting检测结肠癌细胞中Sphk1及磷酸化Sphk1(p-Sphk1)的蛋白表达;ELISA试剂盒检测Sphk1的活性及1-磷酸鞘氨醇(sphingosine-1-phosphate,S1P)的含量;MTT检测奥沙利铂对细胞活力的影响。制备结肠癌细胞裸鼠种植瘤模型并进行相关干预,绘制肿瘤生长曲线,并通过Western blotting检测肿瘤组织中p-Sphk1的蛋白表达。结果对TCGA数据库中的结肠癌测序数据的生物信息学分析表明,Sphk1在结肠癌组织中的表达显著高于正常组织。Western blotting、ELISA检测结果显示,HT29和LoVo细胞中Sphk1及p-Sphk1的蛋白表达高于SW48和HCT116细胞,Sphk1的活性显著增高;MTT结果表明HT29和LoVo细胞对奥沙利铂呈现耐药性,采用Sphk1 siRNA阻断Sphk1的表达能够恢复细胞对奥沙利铂的敏感性。DMS和奥沙利铂联合应用与单独应用相比,可协同抑制肿瘤细胞的活力、Sphk1活性以及S1P的表达。在结肠癌细胞裸鼠种植瘤模型中,奥沙利铂与DMS联合给药对种植瘤生长的抑制作用明显强于单一给药组,并且能够协同降低种植瘤中p-Sphk1蛋白表达以及动物血清中S1P的浓度。结论Sphk1的表达和活化与结肠癌对奥沙利铂的敏感性紧密相关。通过靶向阻断Sphk1能够逆转结肠癌细胞对奥沙利铂的耐药性,显著增强奥沙利铂在体内外的抗肿瘤作用。
关键词
Sphk1
结肠癌
奥沙利铂
耐药
敏感性
Keywords
Sphk1
colon cancer
oxaliplatin
drug resistance
sensitivity
分类号
R735.3 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
Gremlin基因转染对高糖环境中系膜细胞增殖的影响
2
作者
黄海霞
黄海英
机构
武警河北总队医院内二科
石家庄市白求恩军医学院药学教研室
出处
《重庆医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第1期51-56,共6页
文摘
目的 :观察体外转染Gremlin质粒或Gremlin siRNA质粒对小鼠肾小球系膜细胞(mouse glomerular mesangial cells,MMCs)溴脱氧尿苷(bromodeoxyuridine,BrdU)及Ⅳ型胶原表达的影响。方法:将MMCs分为7组:正常对照组(NG,5.5 mmol/L)、正常糖+甘露醇组(NG+M,24.5 mmol/L甘露醇)、正常糖+空质粒组(NG+V)、正常糖+Gremlin质粒组(NG+P)/正常糖+Gremlin siRNA质粒组(NG+gremlin si)、高糖组(HG,30 mmol/L)、高糖+空质粒组(HG+V)以及高糖+Gremlin质粒组(HG+P)/高糖+Gremlin siRNA质粒组(HG+gremlin si)。在高糖刺激24 h后,应用ELISA法测定BrdU表达,放免法测定Ⅳ型胶原浓度。结果:与NG组相比,NG+P组和HG组BrdU表达增强及Ⅳ型胶原浓度增加(均P=0.000);与HG组相比,HG+P组BrdU表达进一步增强及Ⅳ型胶原浓度进一步上调(均P=0.000);然而,Gremlin siRNA质粒转染可抑制高糖诱导的BrdU表达增强及Ⅳ型胶原浓度增加(均P=0.000)。结论:Gremlin基因促进MMCs增殖和Ⅳ型胶原聚集;Gremlin基因可能在糖尿病肾病发病中起到重要作用。
关键词
GREMLIN
转染
细胞增殖
葡萄糖
肾小球系膜细胞
Keywords
Gremlin
transfection
cell proliferation
glucose
glumerular mesangial cells
分类号
R587.2 [医药卫生—内分泌]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
靶向阻断Sphk1促进奥沙利铂的抗结肠癌作用
李政
曹洁玮
刘彬
《西安交通大学学报(医学版)》
北大核心
2025
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
Gremlin基因转染对高糖环境中系膜细胞增殖的影响
黄海霞
黄海英
《重庆医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2014
0
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职称材料
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