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体外扩增自体脂肪干细胞对空鼻综合征患者黏膜功能重建的临床研究 被引量:9
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作者 李梁 贾德进 +3 位作者 闫俊灵 陈冲 丁红 汤苏阳 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第10期815-818,共4页
目的分析、评估采用自体脂肪干细胞(ASCs)重建空鼻综合征(ENS)患者鼻黏膜功能的可行性和有效性。方法选取2013年8月-2014年2月武警总医院收治的ENS患者5例,每例患者抽取自体脂肪组织15~20ml,于体外进行脂肪干细胞的分离、培养,扩... 目的分析、评估采用自体脂肪干细胞(ASCs)重建空鼻综合征(ENS)患者鼻黏膜功能的可行性和有效性。方法选取2013年8月-2014年2月武警总医院收治的ENS患者5例,每例患者抽取自体脂肪组织15~20ml,于体外进行脂肪干细胞的分离、培养,扩增至第3代时进行细胞免疫表型、分化情况及遗传稳定性鉴定。对有鼻甲残留的ENS患者(n=3),在鼻黏膜受损处进行ASCs注射移植,隔10日1次,共4次;对无鼻甲残留的ENS患者(n=2),在鼻黏膜受损处进行ASCs注射移植3次后,抽取其自体单纯脂肪颗粒1~5ml,与第3~6代ASCs混合后行鼻内下鼻甲或中鼻甲成形术。治疗前和治疗后3、6、9个月行鼻内镜检查前后对比,SNOT-20问卷调查、鼻声阻力和鼻黏膜纤毛清除功能所得数据进行统计学分析。结果 2例无鼻甲残留ENS患者行第3~6代ASCs注射移植及3例有鼻甲残留的ENS患者行ASCs联合脂肪颗粒移植后3、6、9个月,鼻内镜检查显示鼻甲成形无明显吸收,鼻腔黏膜明显改善,SNOT-20评分亦明显改善,差异有统计学意义(P〈0.05)。与治疗前比较,5例患者鼻甲成形术后鼻声阻力和鼻黏膜纤毛清除功能无明显变化(P〉0.05)。结论采用脂肪干细胞联合自体脂肪移植行鼻甲成形术重建黏膜功能,可明显改善ENS患者的症状,且效果稳定,是一种新的有助于ENS黏膜修复的治疗方法。 展开更多
关键词 空鼻综合征 脂肪干细胞 鼻甲重建 鼻黏膜
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体外诱导脂肪来源干细胞向黏膜上皮细胞分化的研究 被引量:5
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作者 王程 徐潇 +3 位作者 陈冲 李梁 闫俊灵 汤苏阳 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第10期798-802,共5页
目的探讨在体外诱导脂肪来源干细胞(ADSCs)分化为黏膜上皮细胞的可能性。方法获取成年人皮下脂肪组织,进行ADSCs的分离、培养,扩增至第三代进行细胞免疫表型、分化情况及遗传稳定性鉴定。分别采用含10%胎牛血清、8μg/L表皮生长因子(EGF... 目的探讨在体外诱导脂肪来源干细胞(ADSCs)分化为黏膜上皮细胞的可能性。方法获取成年人皮下脂肪组织,进行ADSCs的分离、培养,扩增至第三代进行细胞免疫表型、分化情况及遗传稳定性鉴定。分别采用含10%胎牛血清、8μg/L表皮生长因子(EGF)、10%胎牛血清+8μg/L EGF、10%胎牛血清+8μg/L EGF+30%成纤维细胞培养基、10%胎牛血清+30%成纤维细胞培养基的DMEM培养液进行培养,于培养前及培养后7、14d观察各组细胞的光镜特征,采用免疫组织化学染色检测特异性细胞表面标记物的表达以及Western blotting方法检测诱导前后ADSCs中CK-7、CK-14的蛋白表达水平。结果与未加EGF诱导剂培养组比较,经EGF诱导14d后多数ADSCs细胞形态、排列方式发生改变。CK-19免疫组化染色显示呈强阳性。Western blotting检测结果提示诱导后的黏膜上皮细胞特异性蛋白CK7、CK14呈高表达。结论 ADSCs在一定诱导条件下可向黏膜上皮样细胞分化。 展开更多
关键词 脂肪干细胞 表皮生长因子 上皮样细胞 细胞分化
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人脂肪来源间充质干细胞库的初步建立
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作者 徐潇 张旭毅 +4 位作者 闫俊灵 陈冲 赵欣 李明辉 汤苏阳 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期992-997,共6页
目的探讨建立生物学性状稳定的人脂肪来源间充质干细胞(h ADSCs)库的可行性,旨在为组织工程种子细胞提供更多来源。方法对分离得到的h ADSCs采用液氮低温冻存,并在一定时间复苏培养,以流式细胞仪检测其表面抗原,在诱导培养基中对其进行... 目的探讨建立生物学性状稳定的人脂肪来源间充质干细胞(h ADSCs)库的可行性,旨在为组织工程种子细胞提供更多来源。方法对分离得到的h ADSCs采用液氮低温冻存,并在一定时间复苏培养,以流式细胞仪检测其表面抗原,在诱导培养基中对其进行成脂和成骨诱导培养,光镜下观察细胞形态,免疫组织化学方法检测成骨诱导的特异标志物碱性磷酸酶(ALP)的表达,观察h ADSCs在复苏前后的分化能力。结果从脂肪组织中分离培养扩增获得数目稳定的h ADSCs,经冻存并复苏后的h ADSCs形态和表面抗原保持不变,可继续扩增10代以上,倍增时间为48h。复苏后第2、第6、第10代h ADSCs均保持了较强的成脂及成骨分化能力。结论初步建立h ADSCs库,可为再生医学修复重建组织工程提供较好的种子细胞。 展开更多
关键词 脂肪来源间质干细胞 干细胞库 低温保存 可行性研究
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