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转录因子ZFP580在缺氧预处理抗大鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤中的作用
被引量：
1
1
作者
孟祥艳
于海龙
+2 位作者
买霞
张文成
徐瑞成
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第9期1553-1558,共6页
目的:通过观察缺氧预处理对心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用及锌指核转录因子ZFP580表达的改变,探讨ZFP580的作用及机制。方法:培养大鼠H9c2心肌细胞,分为3组:(1)缺氧/复氧(H/R)组:H9c2心肌细胞换用模拟缺血溶液(pH=6.2)缺氧(95%N2+5%C...
目的:通过观察缺氧预处理对心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用及锌指核转录因子ZFP580表达的改变,探讨ZFP580的作用及机制。方法:培养大鼠H9c2心肌细胞,分为3组:(1)缺氧/复氧(H/R)组:H9c2心肌细胞换用模拟缺血溶液(pH=6.2)缺氧(95%N2+5%CO2)培养3 h,复氧培养2 h;(2)缺氧预适应(HPC)组:H9c2心肌细胞经3个循环的短暂缺氧(10 min)/复氧(20 min)处理后,进行同上H/R实验;(3)对照(C)组:正常培养的H9c2心肌细胞。通过MTT染色及LDH水平判定HPC的作用。Western blotting方法观察心肌细胞中转录因子ZFP580表达及ERK1/2磷酸化情况,以及ERK1/2磷酸化抑制剂PD98059对ZFP580表达的影响。分别构建高/低表达ZFP580的慢病毒载体并转染H9c2心肌细胞,经H/R实验后利用Annexin V-PE/7-AAD染色及流式细胞术检测H9c2细胞凋亡情况,Western bloting方法观察caspase-3活化情况。结果:HPC能显著改善H/R处理后H9c2心肌细胞存活率降低和LDH漏出的现象。Western blotting结果显示,HPC组心肌细胞中ZFP580表达及ERK1/2磷酸化程度较H/R处理组明显上升,且PD98059预处理明显抑制HPC诱导的ZFP580的表达上调。慢病毒介导的基因转染实验发现,ZFP580高表达的H9c2心肌细胞在H/R损伤后凋亡率降低且细胞中活化caspase-3表达下降。结论:HPC可引起心肌细胞中转录因子ZFP580表达上调,ZFP580作为ERK1/2通路的下游靶分子发挥抗心肌细胞凋亡的作用。ZFP580表达上调可能作为内源性保护机制之一介导了HPC的细胞保护作用。
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关键词
转录因子
锌指
缺氧预处理
细胞凋亡
半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3
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职称材料
题名
转录因子ZFP580在缺氧预处理抗大鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤中的作用
被引量：
1
1
作者
孟祥艳
于海龙
买霞
张文成
徐瑞成
机构
武警
后勤
学院
生理学与病理生理学教研室
武警
后勤
学院
细胞生物学与医学遗传学教研室
武警后勤学院天津市职业与环境危害防制重点实验室
出处
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第9期1553-1558,共6页
基金
国家自然科学基金资助项目(No.81170106
No.81370439)
+1 种基金
天津市应用基础与前沿技术研究计划面上项目(No.12JCYBJC15900)
武警后勤学院面上项目(No.WYM201108)
文摘
目的:通过观察缺氧预处理对心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用及锌指核转录因子ZFP580表达的改变,探讨ZFP580的作用及机制。方法:培养大鼠H9c2心肌细胞,分为3组:(1)缺氧/复氧(H/R)组:H9c2心肌细胞换用模拟缺血溶液(pH=6.2)缺氧(95%N2+5%CO2)培养3 h,复氧培养2 h;(2)缺氧预适应(HPC)组:H9c2心肌细胞经3个循环的短暂缺氧(10 min)/复氧(20 min)处理后,进行同上H/R实验;(3)对照(C)组:正常培养的H9c2心肌细胞。通过MTT染色及LDH水平判定HPC的作用。Western blotting方法观察心肌细胞中转录因子ZFP580表达及ERK1/2磷酸化情况,以及ERK1/2磷酸化抑制剂PD98059对ZFP580表达的影响。分别构建高/低表达ZFP580的慢病毒载体并转染H9c2心肌细胞,经H/R实验后利用Annexin V-PE/7-AAD染色及流式细胞术检测H9c2细胞凋亡情况,Western bloting方法观察caspase-3活化情况。结果:HPC能显著改善H/R处理后H9c2心肌细胞存活率降低和LDH漏出的现象。Western blotting结果显示,HPC组心肌细胞中ZFP580表达及ERK1/2磷酸化程度较H/R处理组明显上升,且PD98059预处理明显抑制HPC诱导的ZFP580的表达上调。慢病毒介导的基因转染实验发现,ZFP580高表达的H9c2心肌细胞在H/R损伤后凋亡率降低且细胞中活化caspase-3表达下降。结论:HPC可引起心肌细胞中转录因子ZFP580表达上调,ZFP580作为ERK1/2通路的下游靶分子发挥抗心肌细胞凋亡的作用。ZFP580表达上调可能作为内源性保护机制之一介导了HPC的细胞保护作用。
关键词
转录因子
锌指
缺氧预处理
细胞凋亡
半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3
Keywords
Transcription factor
Zinc fingers
Hypoxic preconditioning
Apoptosis
Caspase-3
分类号
R363 [医药卫生—病理学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
转录因子ZFP580在缺氧预处理抗大鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤中的作用
孟祥艳
于海龙
买霞
张文成
徐瑞成
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2014
1
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