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ZNF580-EGFP融合蛋白的亚细胞定位研究 被引量:6
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作者 张文成 孙慧燕 孟祥艳 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第8期1590-1594,共5页
目的:构建增强型绿色荧光报告蛋白(EGFP)与人ZNF580融合蛋白的真核表达载体,转染MGC803细胞进行表达,研究ZNF580-EGFP融合蛋白在MGC803细胞的亚细胞定位。方法:利用PCR技术扩增ZNF580基因cDNA开放阅读框架全编码区、N端编码区、C端编码... 目的:构建增强型绿色荧光报告蛋白(EGFP)与人ZNF580融合蛋白的真核表达载体,转染MGC803细胞进行表达,研究ZNF580-EGFP融合蛋白在MGC803细胞的亚细胞定位。方法:利用PCR技术扩增ZNF580基因cDNA开放阅读框架全编码区、N端编码区、C端编码区,分别克隆到真核表达载体pEGFP-C1,BglⅡ及HindⅢ双酶切电泳筛选、鉴定并测序。荧光显微镜下观察ZNF580-EGFP在MGC803细胞中的表达及亚细胞定位。结果:酶切pEGFP-ZNF580(1-172)、pEGFP-ZNF580(1-93)、pEGFP-ZNF580(94-172),电泳分析插入片段长度分别为:526bp、289bp、247bp,经连接点两端进行测序证实连接正确。pEGFP-ZNF580(1-172)、pEGFP-ZNF580(94-172)表达的ZNF580-EGFP融合蛋白定位在MGC803细胞核。结论:成功构建真核表达载体并在MGC803细胞中得到表达,分析其核定位信号可能位于ZNF580蛋白的C端C2H2型锌指主构域94-172位氨基酸区间。 展开更多
关键词 ZNF580-EGFP融合蛋白 真核表达载体 绿色荧光蛋白 亚细胞定位
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低体温与心率变异性和血压变异性的关系 被引量:6
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作者 张引国 魏洁 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第10期1906-1908,共3页
目的:研究低体温与自主神经功能变化的关系。方法:采用体表物理降温法逐步降低直肠温度,直肠温度变化范围为19-37℃。分别记录不同直肠温度下大鼠动态心电和血压信号。应用心率变异性和血压变异性分析系统评价低体温对心率变异性和收缩... 目的:研究低体温与自主神经功能变化的关系。方法:采用体表物理降温法逐步降低直肠温度,直肠温度变化范围为19-37℃。分别记录不同直肠温度下大鼠动态心电和血压信号。应用心率变异性和血压变异性分析系统评价低体温对心率变异性和收缩压变异性的影响。结果:心率变异分析表明,直肠温度下降到29℃以下,R-R间期均延长(P<0.01),提示心率明显降低;当直肠温度下降到19-21℃时,心率变异归一化低频功率降低(P<0.05)和归一化高频功率增加(P<0.05),而且自主神经的平衡向心迷走神经张力增强的方向发生了转移(P<0.05)。血压变异性分析表明,体温下降到31℃时与呼吸有关的归一化高频功率开始增加(P<0.01);直肠温度下降到29℃以下(除27℃外),与呼吸有关的归一化高频功率增加(P<0.05或P<0.01),同时自主神经的平衡也发生了改变(P<0.05)。结论:随着体温的降低,心血管迷走神经活性增加,自主神经的平衡向迷走神经张力增强的方向转移。低体温对血压变异性的影响敏感于心率变异性。 展开更多
关键词 低温 心率变异性 血压变异性 自主神经系统
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吗啡依赖小鼠海马神经元c-fos的表达 被引量:2
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作者 魏洁 张引国 李积胜 《中国心理卫生杂志》 CSSCI CSCD 北大核心 2005年第1期5-7,共3页
目的:探讨吗啡依赖小鼠海马不同亚区神经元c-fos表达的差异。方法:以剂量递增法皮下注射吗啡建立吗啡依赖小鼠模型,腹腔注射纳洛酮诱发戒断症状。根据小鼠戒断反应中出现的跳跃次数、体重下降等指标评定戒断反应强度。采用免疫组织化学... 目的:探讨吗啡依赖小鼠海马不同亚区神经元c-fos表达的差异。方法:以剂量递增法皮下注射吗啡建立吗啡依赖小鼠模型,腹腔注射纳洛酮诱发戒断症状。根据小鼠戒断反应中出现的跳跃次数、体重下降等指标评定戒断反应强度。采用免疫组织化学法显示吗啡依赖小鼠和正常对照组小鼠海马神经元c-fos的表达。结果:吗啡依赖组海马CA1区和齿状回Fos阳性神经元数目明显增加(P<0.05),CA3区无明显改变(P>0.05)。纳洛酮催促戒断组海马CA1和CA3区Fos阳性神经元数目明显增加(P<0.05),齿状回Fos阳性神经元数目增加更为明显(P<0.01)。吗啡依赖组与纳洛酮催促戒断组CA3区阳性神经元数目有显著性差异(P<0.05)。结论:海马神经元c-fos的表达增强可能与吗啡依赖对神经元的损伤有关。 展开更多
关键词 吗啡依赖小鼠 海马神经元 C-FOS 表达
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