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具有NGF活性通过二硫键连接的 2个小分子多肽的制备及鉴定(英文) 被引量：2
1
作者 李贤慧 陈桂英 +4 位作者 窦贺荣 张庆鹏 赵国发 牛云彤 李积胜 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期129-133,共5页
神经生长因子 (NGF)作用广泛 ,β NGF是神经生长因子的活性部分 .由于 3对二硫键的影响 ,体外表达NGF很难形成正确折叠的肽链 .由于神经系统血脑屏障的存在 ,大分子肽链的给药途径是一个不可忽视的难题 .根据NGF的氨基酸序列及其晶体构... 神经生长因子 (NGF)作用广泛 ,β NGF是神经生长因子的活性部分 .由于 3对二硫键的影响 ,体外表达NGF很难形成正确折叠的肽链 .由于神经系统血脑屏障的存在 ,大分子肽链的给药途径是一个不可忽视的难题 .根据NGF的氨基酸序列及其晶体构象资料 ,选择CNBr在 9位Met处 ,胰蛋白酶在Arg或Lys处裂解 β NGF .经过SephadexG 5 0层析、DE 5 2纤维素离子交换层析和反相高压液相层析分离纯化后获得NGF活性片段 .氨基酸组成分析及氨基酸序列分析结果表明 ,此片段由 16肽GEFSVCDSVSVWVGDK与 14肽HWNSYCTTTHTFVK通过 1对二硫键连接而成 .8日龄鸡胚背根神经节生物活性分析表明 ,其最佳作用浓度为 0 0 0 1～ 0 1μg L .它的成功分离和鉴定为合成或表达高活性小分子神经营养物质奠定了关键而重要的基础 . 展开更多
关键词 二硫键连接 小分子多肽 制备 鉴定 神经生长因子 寡肽 生物活性 神经营养作用
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N-cadherin蛋白表达载体构建及功能分析 被引量：2
2
作者 李贤慧 窦贺荣 +2 位作者 马勇 朱辉 陈佳英 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期36-36,共1页
关键词 N-cadherin蛋白 表达载体 构建 功能
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脑皮质星形细胞在1,25-(OH)_2D_3限定培养中表达NGF 被引量：1
3
作者 李贤慧 程熠 +2 位作者 刘雅文 王刚 李积胜 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期398-400,共3页
目的 :研究原代中枢神经胶质细胞在 1 ,2 5 -二羟维生素 D3[1 ,2 5 - (OH) 2 D3]化学限定培养中神经生长因子 (NGF)基因转录及表达。方法 :用新生乳鼠脑皮质制备星形胶质细胞 ,采用浓度 0、 1 0 - 7、 1 0 - 8、 1 0 - 9、1 0 - 1 0 、 ... 目的 :研究原代中枢神经胶质细胞在 1 ,2 5 -二羟维生素 D3[1 ,2 5 - (OH) 2 D3]化学限定培养中神经生长因子 (NGF)基因转录及表达。方法 :用新生乳鼠脑皮质制备星形胶质细胞 ,采用浓度 0、 1 0 - 7、 1 0 - 8、 1 0 - 9、1 0 - 1 0 、 1 0 - 1 1 及 1 0 - 1 2 mol· L- 1 1 ,2 5 - (OH) 2 D3化学限定无血清培养液培养后 ,RT- PCR法检测 NGF m RNA转录 ,双向夹心 - EL ISA检测 NGF。结果 :1 ,2 5 - (OH ) 2 D3化学限定无血清原代培养的神经胶质细胞在 1 ,2 5 - (OH ) 2 D3作用下可分泌 NGF,实验中 1 ,2 5 - (OH) 2 D3有效浓度范围 1 0 - 1 1 ～ 1 0 - 7mol· L- 1 ;1 ,2 5 - (OH) 2 D3培养 6 h后开始检测到 m RNA的表达 ,1 2 h时表达最高 ,36 h后检测不到 NGF m RNA的表达 ;而 NGF蛋白的 EL ISA反应持续时间大于 4 8h。结论 :星形神经胶质细胞的 NGF基因可被甾体激素 1 ,2 5 - (OH) 2 展开更多
关键词 星形细胞 骨化三醇 神经生长因子
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