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实现不同层次免疫学优质教学的探讨 被引量：3
1
作者 李覃 王伟 叶路 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期174-175,共2页
关键词 免疫学教学 优质 生命科学 临床医学 基础医学 交叉学科 分支学科 医科院校
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青蒿素的免疫抑制作用及其调控机制研究 被引量：36
2
作者 李覃 陈虹 +4 位作者 梅昕 那春祺 韦娜 曹波 白淑芳 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期848-854,共7页
目的初步探讨青蒿素(artemisinin,Art)体内外发挥免疫抑制作用的调控机制。方法体外研究检测Art对小鼠淋巴细胞增殖及细胞毒性的影响。体内研究中,通过迟发型超敏反应(delayed-type hypersensitivity,DTH)小鼠模型,分析不同剂量Art对小... 目的初步探讨青蒿素(artemisinin,Art)体内外发挥免疫抑制作用的调控机制。方法体外研究检测Art对小鼠淋巴细胞增殖及细胞毒性的影响。体内研究中,通过迟发型超敏反应(delayed-type hypersensitivity,DTH)小鼠模型,分析不同剂量Art对小鼠DTH的效应;RT-PCR技术检测Th1和Th2细胞转录因子T-bet及GATA-3的基因表达;ELISA法检测转化生长因子β1(transforming growth factorβ1,TGF-β1)的含量;Western blot方法检测p38丝裂酶原激活蛋白激酶(p38 MAPK)蛋白的活性表达水平。结果 Art明显抑制刀豆蛋白A(concanavalin A,ConA)诱导的T淋巴细胞增殖;与地塞米松相比,具有更高的安全性。体内给药后,Art能够减轻DTH小鼠耳肿胀;降低小鼠的脾指数和胸腺指数;调节Th1/Th2细胞分化过程中特异性转录因子T-bet和GATA-3的mRNA表达水平;增加TGF-β1水平;抑制p38 MAPK的磷酸化活性表达。结论提取自传统中草药的Art是一种高效低毒的新型免疫调节剂,通过多种途径发挥免疫抑制作用。 展开更多
关键词 青蒿素 免疫抑制 迟发型超敏反应 TH1 TH2 P38 MAPK
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青蒿素对变应性接触性皮炎小鼠Treg/Th17免疫平衡的影响 被引量：13
3
作者 李覃 陈虹 +4 位作者 韦娜 梅昕 那春祺 刘永峰 胡杰 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第9期1240-1244,共5页
目的探讨青蒿素(Art)在变应性接触性皮炎(ACD)中对Th17和Treg的影响及机制。方法以DNFB致敏和激发制作小鼠ACD模型,局部外涂Art进行干预,采用RT-PCR和ELISA检测Treg/Th17细胞特异性核因子及相关细胞因子的表达与含量,流式细胞术检测Tre... 目的探讨青蒿素(Art)在变应性接触性皮炎(ACD)中对Th17和Treg的影响及机制。方法以DNFB致敏和激发制作小鼠ACD模型,局部外涂Art进行干预,采用RT-PCR和ELISA检测Treg/Th17细胞特异性核因子及相关细胞因子的表达与含量,流式细胞术检测Treg细胞数量,West-ern blot方法检测信号转导子和转录激活子STAT3的磷酸化活性表达。结果与正常组相比,模型组IL-6、IL-17含量、ROR-γt及STAT3的活性表达明显升高,同时Foxp3表达降低。Art明显降低ROR-γt表达、下调IL-6及IL-17水平,同时增加Foxp3表达并促进Treg产生,减弱STAT3的磷酸化活性。结论 Art可能通过调节Treg/Th17免疫平衡,对DN-FB诱导的ACD小鼠发挥免疫治疗作用。 展开更多
关键词 青蒿素 免疫调节 变应性接触性皮炎 TREG TH17 STAT3
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旋毛虫成虫抗原和肌幼虫抗原保护性免疫的比较研究 被引量：3
4
作者 毛立群 唐洁 +4 位作者 杨静 李覃 牛秀珑 叶路 孙奕 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期208-210,共3页
目的:比较旋毛虫成虫抗原和肌幼虫抗原诱导小鼠产生保护性免疫效果的异同。方法:制备旋毛虫成虫抗原和肌幼虫抗原,分组免疫小鼠,并于末次免疫后10d用旋毛虫感染性幼虫对各组小鼠实施攻击感染,检测攻击感染后各组小鼠肠道成虫和肌肉幼虫... 目的:比较旋毛虫成虫抗原和肌幼虫抗原诱导小鼠产生保护性免疫效果的异同。方法:制备旋毛虫成虫抗原和肌幼虫抗原,分组免疫小鼠,并于末次免疫后10d用旋毛虫感染性幼虫对各组小鼠实施攻击感染,检测攻击感染后各组小鼠肠道成虫和肌肉幼虫数并计算减虫率,同时采用ELISA法检测各组小鼠血清IgG抗体水平。结果:成虫抗原免疫组小鼠和肌幼虫抗原免疫组小鼠检获的肠道成虫数和肌幼虫数均显著少于对照组(P<0.05),其中以成虫抗原免疫组小鼠减虫率最高(P<0.01)。成虫抗原免疫组和肌幼虫抗原免疫组小鼠于实施旋毛虫感染性幼虫进行攻击感染的当日所检测的血清IgG抗体水平与其免疫前相比均升高(P<0.01,P<0.05),与对照组相比亦升高(P<0.01,P<0.05),其中也以成虫抗原免疫组小鼠血清IgG抗体升高最为显著(P<0.01)。结论:旋毛虫成虫抗原和肌幼虫抗原均能激发小鼠产生保护性免疫,其中成虫抗原免疫组小鼠显示出更好的抗感染保护性。 展开更多
关键词 旋毛虫 成虫抗原 肌幼虫抗原 保护性免疫
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白藜芦醇调节STAT3抗急性髓性白血病作用的研究 被引量：9
5
作者 王伟 李覃 +2 位作者 陈虹 郭小芹 牛秀珑 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期346-352,共7页
目的初步探讨白藜芦醇(resveratrol,Res)通过何种途径发挥抗急性髓性白血病作用。方法以人急性髓性白血病细胞Kasumi-1为研究对象,不同浓度Res作用不同时间,甲基噻唑基四唑(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)比色法检测细胞增殖,流式... 目的初步探讨白藜芦醇(resveratrol,Res)通过何种途径发挥抗急性髓性白血病作用。方法以人急性髓性白血病细胞Kasumi-1为研究对象,不同浓度Res作用不同时间,甲基噻唑基四唑(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)比色法检测细胞增殖,流式细胞术分析细胞周期分布的变化,计算细胞凋亡率,进而分别从基因和蛋白水平检测Bcl-2、Bax表达,应用免疫印迹及荧光素酶报告基因分析等方法检测Res干预前后信号转导子和转录激活子(signal transducersand activators of transcription,STAT)3的变化。利用白血病小鼠模型以Western blot与免疫组化等方法在整体水平研究Res对动物存活状态及STAT3活性表达的影响。结果Res明显抑制白血病细胞Kasumi-1生长增殖、阻滞细胞周期、诱导细胞凋亡、下调Bcl-2/Bax比值以及STAT3的活性水平;此外,Res还能剂量依赖的促进荷瘤小鼠存活、减弱小鼠p-STAT3表达。结论提取自传统中药材的Res是一种高效低毒的新型抗肿瘤药物,通过多种机制发挥抗白血病效应,特别是对STAT3信号途径的调控可能是其重要的作用靶点。 展开更多
关键词 白藜芦醇 细胞周期 细胞凋亡 白血病 信号转导 STAT3
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虎杖提取物白藜芦醇的抗白血病作用及其可能的分子机制 被引量：10
6
作者 李覃 范桂香 +2 位作者 王伟 李彤 袁育康 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期340-345,共6页
目的探讨白藜芦醇在体外对白血病细胞的抑制作用及其分子机制。方法MTT比色法测定细胞生长抑制率;流式细胞术、HE染色、激光共聚焦显微镜等方法观察各组白血病细胞的细胞周期与细胞凋亡情况;Western Blot-ting法测定细胞抗凋亡蛋白Bcl-... 目的探讨白藜芦醇在体外对白血病细胞的抑制作用及其分子机制。方法MTT比色法测定细胞生长抑制率;流式细胞术、HE染色、激光共聚焦显微镜等方法观察各组白血病细胞的细胞周期与细胞凋亡情况;Western Blot-ting法测定细胞抗凋亡蛋白Bcl-2的表达水平;免疫组织化学法测定白血病细胞信号转导分子p-STAT3的活性表达。结果白藜芦醇可以时间-剂量依赖的方式抑制3种白血病细胞增殖、诱导凋亡、影响细胞周期分布、减弱STAT3的酪氨酸磷酸化活性。结论白藜芦醇对不同来源的白血病细胞均具有较强的抗肿瘤活性,显著减少STAT3的酪氨酸磷酸化活性,为其进一步应用于白血病的临床治疗积累了实验依据。 展开更多
关键词 白藜芦醇 细胞凋亡 白血病
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雌激素受体亚型对乳腺癌MCF-7细胞生长及微环境中Th平衡的影响 被引量：3
7
作者 牛秀珑 叶路 +1 位作者 毛立群 王越 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期490-495,共6页
目的:研究雌激素受体(estrogen receptor,ER)亚型对人乳腺癌细胞MCF-7的生长及Th1/Th2类细胞因子分泌的影响。方法:采用RNA干扰技术沉默MCF-7细胞中ERα或ERβ的表达,获得ERα/ERβ不同表达状态的MCF-7细胞。应用MTT法、流式细胞术、RT-... 目的:研究雌激素受体(estrogen receptor,ER)亚型对人乳腺癌细胞MCF-7的生长及Th1/Th2类细胞因子分泌的影响。方法:采用RNA干扰技术沉默MCF-7细胞中ERα或ERβ的表达,获得ERα/ERβ不同表达状态的MCF-7细胞。应用MTT法、流式细胞术、RT-PCR法分别检测MCF-7细胞的增殖、细胞周期和凋亡抑制基因的表达,ELISA法检测细胞上清中IFN-γ和IL-4的分泌水平。结果:经RNA干扰后MCF-7细胞的ERα或ERβ蛋白表达水平分别下降了(77.7±3.3)%和(68.3±2.1)%。与对照组相比,ERα基因沉默后,MCF-7细胞生长减慢(P<0.05),受阻于G0～G1期,凋亡抑制基因XIAP的表达水平降低为对照组的(43.0±2.0)%,IFN-γ分泌水平增加至对照组的(1.89±0.34)倍;ERβ基因沉默促进MCF-7细胞的生长(P<0.05),S期细胞比例增加,凋亡抑制基因Bcl-2、Bcl-xl、XIAP的表达水平分别升高至对照组的(1.28±0.21)、(1.61±0.32)和(1.65±0.29)倍,IFN-γ分泌水平降低为对照组的(28.0±4.0)%。结论:ER亚型的表达状态可影响MCF-7细胞的生长,并通过调节IFN-γ的自分泌水平诱导微环境发生Th偏移。 展开更多
关键词 雌激素受体 RNA干扰 Th平衡 乳腺癌 ERΑ ERΒ
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白藜芦醇调控白血病JAK1/STAT3信号转导通路的研究 被引量：3
8
作者 李覃 王伟 李彤 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2008年第4期772-776,共5页
本研究探讨白藜芦醇抗白血病作用的具体分子机制。采用细胞体外培养和免疫组织化学、免疫沉淀法检测白血病细胞L1210 p-JAK1、p-STAT3蛋白的表达;建立了L1210白血病腹水瘤小鼠模型,用Western blot、免疫组织化学测定信号转导分子p-JAK1... 本研究探讨白藜芦醇抗白血病作用的具体分子机制。采用细胞体外培养和免疫组织化学、免疫沉淀法检测白血病细胞L1210 p-JAK1、p-STAT3蛋白的表达;建立了L1210白血病腹水瘤小鼠模型,用Western blot、免疫组织化学测定信号转导分子p-JAK1及p-STAT3的活性。结果表明:白藜芦醇能明显抑制JAK1/STAT3信号转导通路,以时间-剂量依赖的方式下调p-JAK1、p-STAT3表达,减弱JAK1和STAT3的酪氨酸磷酸化活性。结论:白藜芦醇体内外均具能明显调控白血病JAK1/STAT3信号转导通路,发挥抗白血病作用。 展开更多
关键词 白藜芦醇 细胞凋亡 白血病 JAK1/STAT3信号转导通路
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人成骨样细胞和前破骨样细胞ER亚型、OPG/RANKL/RANK系统、IL-6及其受体以及破骨细胞标志基因表达的研究 被引量：1
9
作者 王越 朱雅琴 +2 位作者 吴健 孙维甲 李灵芝 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 2010年第4期260-264,共5页
目的分析比较两种人成骨样细胞系(U2-OS、MG-63)和两种人前破骨样细胞系(U937、HL-60)ER亚型、OPG/RANKL/RANK系统、IL-6及其受体以及破骨细胞标志基因表达的差异,为今后研究雌激素与IL-6等细胞因子在骨组织中相互关系提供适宜的细胞模... 目的分析比较两种人成骨样细胞系(U2-OS、MG-63)和两种人前破骨样细胞系(U937、HL-60)ER亚型、OPG/RANKL/RANK系统、IL-6及其受体以及破骨细胞标志基因表达的差异,为今后研究雌激素与IL-6等细胞因子在骨组织中相互关系提供适宜的细胞模型。方法RT-PCR和免疫印迹法检测ERα、ERβ的表达,ELISA法测定IL-6的分泌,OPG、RANKL、RANK及IL-6受体的表达采用免疫印迹法进行检测,TRAP、MMP-9则采用RT-PCR技术进行分析。结果(1)转录水平及蛋白水平证实四种细胞均表达ERα和ERβ;(2)四种细胞不同程度地表达OPG和RANKL,而RANK则仅见于U937细胞表达;(3)四种细胞均表达IL-6受体(IL-6Rα、gp130),除U2-OS细胞外其余三种细胞均组成型分泌IL-6;(4)破骨细胞标志基因TRAP在两种人前破骨样细胞U937、HL-60中均表达,且表达水平相近;而MMP-9仅在U937细胞中弱表达;两种人成骨样细胞U2-OS、MG-63未见有这两种基因表达。结论筛选出用于研究雌激素与IL-6等细胞因子在骨组织中相互关系的细胞模型,同时也为今后深入阐明骨靶向和其他新型抗骨质疏松雌激素的分子机制研究奠定基础。 展开更多
关键词 成骨样细胞 前破骨样细胞 雌激素受体 OPG/RANKL/RANK系统 IL-6及其受体 破 骨细胞标志基因
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人IL-8正义和反义真核表达载体的构建与表达
10
作者 牛秀珑 王越 +2 位作者 屈野 郭小芹 叶路 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第9期798-801,共4页
目的:构建人IL-8正义和反义真核表达载体。方法:RT-PCR扩增正义和反义IL-8基因片段后,将其克隆入真核表达载体pcDNA3.1(+),通过菌落PCR、双酶切及测序进行鉴定后,采用脂质体法分别瞬时转染至人卵巢癌细胞系A2780和SKOV3细胞中,并用RT-PC... 目的:构建人IL-8正义和反义真核表达载体。方法:RT-PCR扩增正义和反义IL-8基因片段后,将其克隆入真核表达载体pcDNA3.1(+),通过菌落PCR、双酶切及测序进行鉴定后,采用脂质体法分别瞬时转染至人卵巢癌细胞系A2780和SKOV3细胞中,并用RT-PCR和ELISA法检测细胞转染后IL-8的表达水平。结果:经验证,重组人IL-8正义/反义真核表达载体构建正确。pcDNA3.1(+)-ssIL-8转染A2780细胞后,其IL-8 mRNA及蛋白表达水平均显著增加;而pcDNA3.1(+)-asIL-8转染SKOV3细胞后,其IL-8分泌水平降低。结论:成功构建了人IL-8正义/反义真核表达质粒pcDNA3.1(+)-ssIL-8/pcDNA3.1(+)-asIL-8,为后续研究IL-8在卵巢癌及其他肿瘤中的作用打下基础。 展开更多
关键词 IL-8 正义/反义 真核表达载体 卵巢癌细胞
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