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甘草酸对博莱霉素诱导的实验性肺纤维化的干预作用 被引量：12
1
作者 李祎 李鑫 +5 位作者 李琦 苏程程 周欣 彭守春 魏路清 姬文婕 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期528-533,共6页
目的:探讨甘草酸(GA)对博莱霉素(BLM)诱导的小鼠肺纤维化的干预作用及其可能机制。方法:将160只雄性C57BL/6J小鼠随机分为生理盐水(NS)组、BLM组、BLM+NS组和BLM+GA组。通过口咽气管吸入法吸入博莱霉素(2.5 mg/kg)建立实验性肺纤维化模... 目的:探讨甘草酸(GA)对博莱霉素(BLM)诱导的小鼠肺纤维化的干预作用及其可能机制。方法:将160只雄性C57BL/6J小鼠随机分为生理盐水(NS)组、BLM组、BLM+NS组和BLM+GA组。通过口咽气管吸入法吸入博莱霉素(2.5 mg/kg)建立实验性肺纤维化模型,BLM+GA组及BLM+NS组每天给予40 mg/kg甘草酸或等体积的生理盐水灌胃,于术后第3、7、14、21天取材。采用HE染色和Masson染色观察肺组织病理学变化及纤维化程度,采用流式细胞术检测循环单核细胞和肺泡巨噬细胞的亚群比例变化,采用RT-qPCR检测肺组织中转化生长因子β1(TGF-β1)mRNA的表达水平,采用碱水解法检测肺组织中羟脯氨酸(HYP)含量。结果:与NS组相比,BLM组和BLM+NS组肺组织的炎症浸润及胶原含量明显增多,实验性肺纤维化模型制备成功。与BLM+NS组相比:BLM+GA组肺组织的炎症细胞浸润及胶原纤维沉积较少;第3、7天的Ly6C^(hi)单核细胞亚群比例和第7、14天肺泡巨噬细胞M2表型比例显著降低(P<0.01);肺组织TGF-β1 mRNA表达量和HYP含量显著降低(P<0.01)。结论:GA可以减轻博莱霉素诱导的小鼠肺组织的炎症反应和胶原纤维沉积,可能与GA对单核巨噬细胞的表型偏移和调控以及肺组织TGF-β1的表达下调有关。 展开更多
关键词 甘草酸 肺纤维化 单核细胞 肺泡巨噬细胞 转化生长因子Β1
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苦参碱通过调节单核吞噬细胞表型偏移改善博莱霉素诱导的肺纤维化 被引量：8
2
作者 李鑫 李琦 +5 位作者 李祎 苏程程 周欣 彭守春 魏路清 姬文婕 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期322-328,共7页
目的:研究苦参碱(matrine,MA)对博菜霉素(bleomycin,BLM)诱导的循环单核细胞和肺泡巨噬细胞表型偏移的调节作用。方法:160只C57BL/6雄性小鼠随机分为生理盐水(NS)组、BLM组、苦参碱干预组(BLM+MA组)及溶剂对照组(BLM+NS组)经口咽吸入法... 目的:研究苦参碱(matrine,MA)对博菜霉素(bleomycin,BLM)诱导的循环单核细胞和肺泡巨噬细胞表型偏移的调节作用。方法:160只C57BL/6雄性小鼠随机分为生理盐水(NS)组、BLM组、苦参碱干预组(BLM+MA组)及溶剂对照组(BLM+NS组)经口咽吸入法给予BLM(2.5 mg/kg)建立实验性肺纤维化模型,对照组给予等体积NS,BLM+MA组和BLM+NS组分别在术后每天灌胃给予MA(15 mg·kg^(-1)·d^(-1))或等量NS。术后第3、7、14和21天处死小鼠,采用HE染色和Masson染色观察肺组织病理学变化及纤维化程度,采用碱水解法测定肺组织羟脯氨酸的含量,用流式细胞术分别检测循环单核细胞亚群和支气管肺泡灌洗液细胞表型的变化。结果:与对照组相比,MA干预可以明显减轻BLM诱导的小鼠肺组织炎症反应及纤维化程度(P<0.05);与NS组相比,BLM组的Ly6C^(hi)单核细胞比例升高,肺泡巨噬细胞表型由M1型向M2型偏移且与炎症反应和纤维化程度呈现一定的相关性;MA干预后可以部分逆转BLM诱导的循环单核细胞和肺泡巨噬细胞的表型偏移。结论:苦参碱可以减轻BLM诱导的急性肺泡炎症和肺纤维化程度,可能是部分通过逆转循环单核细胞和肺泡巨噬细胞表型的偏移而实现的。 展开更多
关键词 苦参碱 肺纤维化 单核细胞 巨噬细胞 博莱霉素
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单核细胞亚群在大鼠心肌缺血再灌注模型中的动态变化及意义 被引量：5
3
作者 卢芮伊 周欣 +6 位作者 姬文婕 罗悦晨 杨国红 孙海英 葛兰 姜铁民 李玉明 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期131-134,共4页
目的观察单核细胞不同亚群在大鼠心肌缺血再灌注(I/R)模型中的动态变化,并探讨其与I/R损伤后炎症程度及组织修复的关系。方法 Wistar大鼠16只随机分为缺血再灌注组(I/R组)和假手术组(sham组)。采用结扎左冠状动脉前降支45 min后再灌注... 目的观察单核细胞不同亚群在大鼠心肌缺血再灌注(I/R)模型中的动态变化,并探讨其与I/R损伤后炎症程度及组织修复的关系。方法 Wistar大鼠16只随机分为缺血再灌注组(I/R组)和假手术组(sham组)。采用结扎左冠状动脉前降支45 min后再灌注的方法制备I/R模型。于术前、术后1、3、5、7、14 d抽取大鼠尾静脉血,运用流式细胞术将单核细胞分为CD172a+CD43low和CD172a+CD43high两个亚群,检测各时间点单核细胞亚群的比例,并于术后第30天取心脏行Masson及麦胚凝集素(WGA)染色,观察心肌梗死区纤维化程度及心肌细胞肥大程度与单核细胞表型变化的关系。结果 I/R组CD172a+CD43low单核细胞比例在术后第1天较基线显著升高(P<0.05),第3天达到高峰(P<0.01),之后逐渐下降,从第7天起与基线水平一致;Sham组CD172a+CD43low单核细胞比例在术后第1天升高,与基线相比差异有统计学意义(P<0.05),从第3天起降至基线水平;与sham组相比,I/R组第3天时CD172a+CD43low比例较显著性升高(P<0.01),其余时间点则无显著性差异。两组大鼠CD172a+CD43high细胞比例在各组呈现与CD43low相反的变化。Masson及WGA染色结果显示,I/R组大鼠心肌存在大量胶原纤维的沉积(P<0.05),且心肌细胞存在不同程度的肥大(P<0.01)。术后第3天CD172a+CD43low单核细胞比例与术后30 d左室壁心肌纤维化程度的相关性分析结果显示两者呈正相关(r=0.86,P<0.05)。结论研究表明大鼠心肌I/R后单核细胞亚群发生了动态变化,具有促炎症表型的CD172a+CD43low单核细胞可能成为心肌I/R损伤的治疗靶点。 展开更多
关键词 单核细胞 亚群 缺血再灌注 流式细胞术
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盐皮质激素受体在博来霉素诱导的实验性肺纤维化中的作用 被引量：3
4
作者 胡道川 姬文婕 +3 位作者 陈雪芬 马永强 周欣 魏路清 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第11期2039-2043,共5页
目的:研究盐皮质激素受体(MR)在博来霉素诱导的实验性肺纤维化进展过程中的作用及机制。方法:将126只6~8周龄雄性C57BL/6小鼠随机分为对照组、博来霉素组和MR阻断剂螺内酯干预组,气管内一次性滴注博来霉素(2.5 mg/kg)溶液建立实验性小... 目的:研究盐皮质激素受体(MR)在博来霉素诱导的实验性肺纤维化进展过程中的作用及机制。方法:将126只6~8周龄雄性C57BL/6小鼠随机分为对照组、博来霉素组和MR阻断剂螺内酯干预组,气管内一次性滴注博来霉素(2.5 mg/kg)溶液建立实验性小鼠肺纤维化模型,螺内酯干预组每天按螺内酯20 mg/kg经灌胃给药。于术后12 h、1 d、2 d、3 d、7 d、14 d和28 d处死小鼠,采用HE染色和Masson染色观察肺组织病理学变化及纤维化程度,采用real-time PCR检测各组肺组织中胶原1(Col1)、Col3、转化生长因子β(TGF-β)、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)及MR mRNA的表达水平。结果:(1)与对照组小鼠相比,博来霉素组及螺内酯干预组小鼠在滴注博来霉素后经历了典型的急性炎症期(12 h^3 d)、纤维化进展期(14 d)和纤维化晚期(28 d)。阻断MR下调早期炎症反应并减轻了纤维化程度。(2)螺内酯干预可以有效降低MR mRNA表达水平;阻断MR在急性炎症期显著下调MCP-1 mRNA的表达,在14 d显著下调TGF-β、Col1和Col3 mRNA表达水平。结论:(1)阻断MR可以明显减轻博来霉素诱导的肺纤维化程度;(2)阻断MR可能通过在急性炎症期调节MCP-1和TGF-β的表达,减轻炎症反应,并在纤维化进展期,下调TGF-β的表达,从而抑制肺纤维化的进展。 展开更多
关键词 肺纤维化 受体 盐皮质激素 博来霉素 螺内酯
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螺内酯对实验性矽肺小鼠的干预研究 被引量：3
5
作者 向国安 苏程程 +4 位作者 张译丹 马永强 周欣 魏路清 姬文婕 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期947-951,955,共6页
目的：探讨螺内酯（spirolactone,SPI）在实验性小鼠矽肺病理进展中的作用及机制。方法：将120只雄性C57 BL/6小鼠（18~20 g）随机分为生理盐水组（NS组）、石英组（quartz组）、石英＋生理盐水组（quartz＋NS组）和石英＋螺内酯组（qua... 目的：探讨螺内酯（spirolactone,SPI）在实验性小鼠矽肺病理进展中的作用及机制。方法：将120只雄性C57 BL/6小鼠（18~20 g）随机分为生理盐水组（NS组）、石英组（quartz组）、石英＋生理盐水组（quartz＋NS组）和石英＋螺内酯组（quartz＋SPI组）,经口咽吸入石英混悬液建立实验性小鼠矽肺模型;quartz＋SPI组及quartz＋NS组每天分别经灌胃给予螺内酯10 mg/kg或等体积的生理盐水。术后3 d、14 d和28 d处死小鼠,行常规支气管肺泡灌洗术,回收支气管肺泡灌洗液（bronchoalveolar lavage fluid,BALF）进行细胞分类和计数;采用ELISA法检测BALF上清中转化生长因子β1（TGF-β1）的含量;采用HE染色、Masson染色和免疫荧光染色观察肺组织病理学变化及纤维化程度;采用RT-q PCR检测各组肺组织中胶原Ⅰ（Col Ⅰ）、胶原Ⅲ（Col Ⅲ）及TGF-β1的mRNA表达水平。结果：经口咽吸入石英后,小鼠肺组织经历了典型的急性炎症期和纤维化期改变,给予SPI干预后的小鼠肺组织炎症反应程度相比于quartz＋NS组减轻（P〈0.05）。给予螺内酯干预后,在第3天小鼠肺组织TGF-β1的mRNA表达量显著下调（P〈0.01）,BALF中TGF-β1的含量也显著减少（P〈0.01）。到第28天,quartz＋SPI组小鼠肺组织Col Ⅰ、Col Ⅲ的mRNA表达量明显低于quartz＋NS组（P〈0.05）。结论：SPI可能通过调控TGF-β1的mRNA表达,减少TGF-β1蛋白的分泌,从而改善石英导致的早期急性炎症反应,并在纤维化期减轻了Col Ⅰ和Col Ⅲ的mRNA表达,抑制了纤维化的进展。 展开更多
关键词 石英 肺纤维化 螺内酯 转化生长因子Β1
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干扰盐皮质激素受体基因对RAW264.7细胞增殖和凋亡的影响 被引量：1
6
作者 姬文婕 胡道川 +4 位作者 陈雪芬 马永强 卢芮伊 周欣 魏路清 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期2261-2265,共5页
目的:应用RNA干扰技术沉默小鼠RAW 264.7巨噬细胞盐皮质激素受体(MR)基因,建立稳定干扰细胞株,并观察其对细胞增殖和凋亡的影响。方法:针对MR基因设计合成重组MR shRNA质粒,脂质体法转染质粒至RAW 264.7细胞,经G418筛选后获得稳定表达... 目的:应用RNA干扰技术沉默小鼠RAW 264.7巨噬细胞盐皮质激素受体(MR)基因,建立稳定干扰细胞株,并观察其对细胞增殖和凋亡的影响。方法:针对MR基因设计合成重组MR shRNA质粒,脂质体法转染质粒至RAW 264.7细胞,经G418筛选后获得稳定表达细胞株。细胞分为3组:野生型(WT)组、阴性对照(NC)组和干扰(shMR)组。荧光显微镜下观察确定细胞的转染效率;实时定量PCR法检测细胞中MR mRNA的表达;CCK-8方法检测细胞增殖活性;流式细胞术分析细胞周期分布和凋亡情况。结果:(1)MR shRNA能明显抑制RAW264.7细胞的MR基因表达,抑制率70%以上。(2)从第3 d开始,shMR组细胞的生长速度明显低于NC和WT组(P<0.05),说明MR shRNA能明显抑制细胞增殖。(3)WT、NC和shMR组的增殖指数分别为(37.2±0.5)%、(37.5±1.6)%和(31.0±1.3)%,shMR组的细胞周期出现改变,S期和G2/M期比例明显下降,增殖指数下降(P<0.05)。(4)WT、NC和shMR组的细胞凋亡率分别为(2.18±0.36)%、(6.65±0.81)%和(7.70±1.34)%,shMR组略高于NC组,但二者的差异无统计学意义(P>0.05)。结论:本研究成功构建了稳定干扰MR基因表达的RAW 264.7细胞株,MR shRNA能够明显抑制RAW 264.7细胞增殖,但对其凋亡无明显影响。 展开更多
关键词 受体 盐皮质激素 RNA干扰 RAW 264 7细胞 细胞增殖 细胞凋亡
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干扰P2X_7R基因对RAW264.7细胞增殖和吞噬的影响 被引量：4
7
作者 苏程程 张译丹 +7 位作者 马永强 陈雪芬 向国安 周欣 彭守春 林志春 魏路清 姬文婕 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第11期2065-2069,共5页
目的:应用RNA干扰技术抑制小鼠巨噬细胞RAW264.7细胞P2X7受体(P2X7R)基因的表达,建立稳定干扰细胞株,并观察其对细胞增殖和凋亡的影响。方法:用脂质体法将P2X7R shRNA重组质粒转染至RAW264.7细胞,经G418筛选后获得稳定干扰细胞株。细胞... 目的:应用RNA干扰技术抑制小鼠巨噬细胞RAW264.7细胞P2X7受体(P2X7R)基因的表达,建立稳定干扰细胞株,并观察其对细胞增殖和凋亡的影响。方法:用脂质体法将P2X7R shRNA重组质粒转染至RAW264.7细胞,经G418筛选后获得稳定干扰细胞株。细胞分为野生型(WT)组、阴性对照(NC)组和干扰(sh P2X7R)组。Real-time PCR法检测细胞中P2X7R mRNA的表达,Western blot检测细胞中P2X7R蛋白的表达;CCK-8方法检测细胞生长活性,5-乙炔基-2’-脱氧尿苷(5-ethynyl-2’-deoxyuridine,Ed U)掺入实验检测细胞增殖活性;流式细胞术分析细胞周期的分布和吞噬情况。结果:P2X7R shRNA能明显抑制RAW264.7细胞的P2X7R mRNA和蛋白的表达,抑制率在80%以上。48 h后,sh P2X7R组细胞的生长速度明显高于NC组和WT组(P<0.05),增殖期细胞比例明显升高(P<0.05),说明下调P2X7R基因能明显促进细胞增殖。sh P2X7R组的细胞周期出现改变,S期和G2/M期的比例明显上升,增殖指数增高(P<0.05)。sh P2X7R组的细胞吞噬活性明显高于NC组(P<0.05)。结论:本研究成功构建了稳定干扰P2X7R基因表达的小鼠巨噬细胞株RAW264.7,sh P2X7R能够明显促进RAW264.7细胞的增殖,改变了细胞的吞噬活性。 展开更多
关键词 P2X7受体 RNA干扰 RAW264.7巨噬细胞 细胞增殖 细胞吞噬
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ATP清除剂三磷酸腺苷双磷酸酶对实验性矽肺的干预作用 被引量：6
8
作者 苏程程 向国安 +4 位作者 马永强 周欣 彭守春 魏路清 姬文婕 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期792-797,共6页
目的:观察三磷酸腺苷双磷酸酶(apyrase,Apy)对实验性矽肺小鼠肺纤维化的干预作用及可能机制。方法:160只雄性C57BL/6小鼠,随机分为对照组、矽肺组、Apy组及溶剂组,采用经口咽吸入法给予Si O2悬浊液(50 mg/kg)建立小鼠实验性矽肺模型,对... 目的:观察三磷酸腺苷双磷酸酶(apyrase,Apy)对实验性矽肺小鼠肺纤维化的干预作用及可能机制。方法:160只雄性C57BL/6小鼠,随机分为对照组、矽肺组、Apy组及溶剂组,采用经口咽吸入法给予Si O2悬浊液(50 mg/kg)建立小鼠实验性矽肺模型,对照组给予等量生理盐水。Apy组在造模的同时及造模后4 h采用经口咽吸入法给予Apy(40 mg/kg),溶剂组给予等体积的无菌生理盐水。分别于术后3 h、7 d、14 d和28 d处死小鼠,计算各组小鼠肺指数,采用生物发光法检测小鼠肺组织的ATP含量,采用HE染色和苦味酸-天狼星红染色观察肺组织的病理学变化,采用real-time PCR法检测各组肺组织中Ⅰ型胶原(ColⅠ)、Ⅲ型胶原(ColⅢ)和转化生长因子β1(TGF-β1)的mRNA表达水平,采用ELISA法测定肺泡灌洗液TGF-β1的蛋白水平。结果:与对照组相比,模型组和溶剂对照组小鼠的肺指数和胶原含量明显升高,证明矽肺模型制备成功。Apy组与溶剂组相比,肺组织的ATP含量下降,肺组织炎症表现明显减轻,炎症评分显著下降;同时肺指数、胶原容积分数及ColⅠ和ColⅢ的mRNA表达水平均显著下降。Apy可以明显下调肺组织中TGF-β1的mRNA表达水平和肺泡灌洗液中TGF-β1蛋白表达水平。结论:Apy可以明显减轻实验性矽肺小鼠肺组织的炎症反应和纤维化,该作用可能与Apy减少肺组织ATP的浓度、下调TGF-β1的表达有关。 展开更多
关键词 矽肺 三磷酸腺苷双磷酸酶 转化生长因子Β1
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盐皮质激素受体阻断剂对SiO_2诱导的肺巨噬细胞表型偏移的调节 被引量：3
9
作者 苏程程 张译丹 +5 位作者 向国安 马永强 周欣 彭守春 魏路清 姬文婕 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期1112-1117,共6页
目的:研究盐皮质受体阻断剂螺内酯(spirolactone,SPI)对二氧化硅(SiO_2)诱导的肺巨噬细胞表型偏移的影响。方法:将60只C57BL/6小鼠随机分为生理盐水(NS)组、SiO_2组、SPI治疗组(SiO_2+SPI组)及溶剂对照组(SiO_2+NS组),经口咽吸入SiO_2... 目的:研究盐皮质受体阻断剂螺内酯(spirolactone,SPI)对二氧化硅(SiO_2)诱导的肺巨噬细胞表型偏移的影响。方法:将60只C57BL/6小鼠随机分为生理盐水(NS)组、SiO_2组、SPI治疗组(SiO_2+SPI组)及溶剂对照组(SiO_2+NS组),经口咽吸入SiO_2悬浊液(40 mg/kg)建立矽肺模型,对照组给予等量生理盐水,SiO_2+SPI组在造模后每天经口灌胃给予SPI(10 mg·kg^(-1)·d^(-1)),SiO_2+NS组以相同方式给予等量生理盐水。造模后3 d、14d、28 d取材,进行肺泡灌洗,取灌洗液细胞进行定量、分类计数及流式细胞术分析,右下肺叶用酶解法制成单细胞悬液行流式细胞术分析。结果:与SiO_2组相比,SPI治疗可以明显降低SiO_2干预后3 d、14 d支气管肺泡灌洗液总细胞数及巨噬细胞、中性粒细胞及淋巴细胞数。SiO_2干预后14 d、28 d,肺泡巨噬细胞和间质巨噬细胞由M1表型向M2表型偏移,SPI治疗可以有效逆转SiO_2诱导的巨噬细胞表型偏移。结论:SPI可以减轻SiO_2导致的肺泡炎症细胞浸润,可能是通过逆转SiO_2诱导的巨噬细胞表型偏移实现的。 展开更多
关键词 二氧化硅 盐皮质受体 螺内酯 巨噬细胞
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不同诱导剂体外诱导巨噬细胞胞外诱捕网形成效率的比较
10
作者 苏程程 向国安 +5 位作者 马永强 张译丹 周欣 彭守春 魏路清 姬文婕 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期466-469,共4页
目的比较体外诱导巨噬细胞胞外诱捕网(MET)形成的不同方法。方法采用(0.5、1、5、10)μg/m L脂多糖(LPS)、(10、25、50、80)μmol/L佛波酯(PMA)和(50、100、150)μg/m L二氧化硅(Si O2)处理RAW264.7细胞,在处理后3 h和6 h,采用免疫荧光... 目的比较体外诱导巨噬细胞胞外诱捕网(MET)形成的不同方法。方法采用(0.5、1、5、10)μg/m L脂多糖(LPS)、(10、25、50、80)μmol/L佛波酯(PMA)和(50、100、150)μg/m L二氧化硅(Si O2)处理RAW264.7细胞,在处理后3 h和6 h,采用免疫荧光染色法检测MET的产生,并对其进行半定量分析。结果免疫荧光染色表明MET主要由DNA和组蛋白构成,1μg/m L LPS处理RAW264.7细胞6 h,MET形成百分比为(37.04±10.02)%,明显高于对照组(7.90±2.71)%;80μmol/L的PMA处理细胞后MET形成百分比为(22.40±1.83)%,高于对照组(10.11±1.13)%;各剂量的Si O2诱导MET的量与对照组无明显差异。结论用LPS和PMA均能在体外诱导RAW264.7细胞MET的形成,Si O2诱导不是可行的方法。 展开更多
关键词 巨噬细胞胞外诱捕网 RAW264.7细胞 脂多糖 佛波脂 二氧化硅
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