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穿梭表达载体pYG43的构建及碱性纤维素酶基因的分泌表达被引量：5: 1; 作者马磊蔡勇 +6 位作者杨明明李青旺樊俊华祁艳霞吴迪张西峰齐枫《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2005年第3期448-450,共3页; 用枯草杆菌强启动子P43构建了大肠杆菌 -枯草杆菌穿梭表达载体pYG43 ,其可在大肠杆菌胞内高效表达β 半乳糖苷酶 (最高达92 0 0U)。利用该载体分泌表达了枯草杆菌碱性纤维素酶 (最高达 60U/ml) ,在原宿主菌 (B .subtilis 1A747)的基础... 展开更多; 关键词启动子P43 穿梭表达载体碱性纤维素酶; 在线阅读下载PDF 职称材料

枯草芽孢杆菌生物素操纵元的初步改造被引量：7: 2; 作者张西锋李万芬 +4 位作者袁新宇张炜炜刘波王俊杨明明《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2007年第7期169-174,共6页; 为了克服生物素生物合成中的抑制作用,提高生物素操纵元基因本底水平的表达,分别构建了整合表达载体pGJj01和pGJj02,通过双交叉整合的方式先后将线性化的pGJj01和pGJj02整合到枯草芽孢杆菌AS1094的染色体上,构建了枯草芽孢杆菌GJZ01,用... 展开更多; 关键词枯草芽孢杆菌生物素同源重组; 在线阅读下载PDF 职称材料

RP-HPLC测定发酵液中庚二酸的含量被引量：2: 3; 作者蒲跃进刘波 +2 位作者周占琴杨明明樊俊华《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2006年第13期2952-2953,2955,共3页; 用安捷伦Zorbax SB-C18（4．6cm×250cm，5μm）色谱柱，以K2HPO4（0．02mol／L，pH值3）和甲醇（二者体积比为90：10）为流动相，在紫外检测波长218nm的条件下，利用反相高效液相色谱法（RP-HPLC）测定发酵液中庚二酸含量，获得的... 展开更多; 关键词 RP-HPLC 庚二酸发酵液; 在线阅读下载PDF 职称材料

枯草芽孢杆菌bioI基因的克隆和高效表达及BioI蛋白的纯化: 4; 作者龚月生王晶 +4 位作者刘锦妮袁新宇姬生跃王俊杨明明《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2008年第12期35-40,共6页; 【目的】克隆和表达枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)bioI基因并纯化表达产物。【方法】提取B.sub-tilis1A747基因组DNA,从中扩增bioI基因并将其克隆到大肠杆菌(Escherichia coli)的表达载体pET-28a(+)上,构建bioI的表达载体pET28a-bio... 展开更多; 关键词枯草芽孢杆菌 bioI基因大肠杆菌BL21(DE3) 高效表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名穿梭表达载体pYG43的构建及碱性纤维素酶基因的分泌表达被引量：5: 1; 作者马磊蔡勇杨明明李青旺樊俊华祁艳霞吴迪张西峰齐枫; 机构西北农林科技大学动物科技学院湖北省武汉阳光广济医药开发有限公司; 出处《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2005年第3期448-450,共3页; 文摘用枯草杆菌强启动子P43构建了大肠杆菌 -枯草杆菌穿梭表达载体pYG43 ,其可在大肠杆菌胞内高效表达β 半乳糖苷酶 (最高达92 0 0U)。利用该载体分泌表达了枯草杆菌碱性纤维素酶 (最高达 60U/ml) ,在原宿主菌 (B .subtilis 1A747)的基础上提高了 5～ 7倍。; 关键词启动子P43 穿梭表达载体碱性纤维素酶; Keywords Promoter P43 Expressional shuttle vector Alkaline cellulase; 分类号 Q814.9 [生物学—生物工程]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名枯草芽孢杆菌生物素操纵元的初步改造被引量：7: 2; 作者张西锋李万芬袁新宇张炜炜刘波王俊杨明明; 机构武汉阳光广济医药开发有限公司湖北工业大学生物工程学院; 出处《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2007年第7期169-174,共6页; 基金国家重点新产品计划项目[2003ED760039]; 文摘为了克服生物素生物合成中的抑制作用,提高生物素操纵元基因本底水平的表达,分别构建了整合表达载体pGJj01和pGJj02,通过双交叉整合的方式先后将线性化的pGJj01和pGJj02整合到枯草芽孢杆菌AS1094的染色体上,构建了枯草芽孢杆菌GJZ01,用强启动子P43-1替换掉生物素操纵元自身的启动子Pbiotin,并在bioB和bioI基因间加入强终止子和强启动子P43-2。经PCR和Southern检测表明,整合构建正确。试验可为下一步研究生物素操纵元基因表达提供良好的宿主菌素材。; 关键词枯草芽孢杆菌生物素同源重组; Keywords B. subtil is biotin integreate; 分类号 Q786 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名RP-HPLC测定发酵液中庚二酸的含量被引量：2: 3; 作者蒲跃进刘波周占琴杨明明樊俊华; 机构西北农林科技大学动物科技学院湖北省武汉阳光广济医药开发有限公司; 出处《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2006年第13期2952-2953,2955,共3页; 文摘用安捷伦Zorbax SB-C18（4．6cm×250cm，5μm）色谱柱，以K2HPO4（0．02mol／L，pH值3）和甲醇（二者体积比为90：10）为流动相，在紫外检测波长218nm的条件下，利用反相高效液相色谱法（RP-HPLC）测定发酵液中庚二酸含量，获得的庚二酸吸收峰面积与质量浓度的线性相关系数为0．999。庚二酸加标回收率98．38％．101．84％，相对标准偏差为0．45％-1．0％。该方法能准确测定发酵液中庚二酸含量，而且操作简便、快捷、结果可靠。; 关键词 RP-HPLC 庚二酸发酵液; Keywords RP-HPLC Pimelic acid Broth system; 分类号 O657.72 [理学—分析化学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名枯草芽孢杆菌bioI基因的克隆和高效表达及BioI蛋白的纯化: 4; 作者龚月生王晶刘锦妮袁新宇姬生跃王俊杨明明; 机构西北农林科技大学动物科技学院武汉阳光广济医药开发有限公司湖北工业大学生物工程学院; 出处《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2008年第12期35-40,共6页; 基金国家重点新产品计划项目(2003ED760039); 文摘【目的】克隆和表达枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)bioI基因并纯化表达产物。【方法】提取B.sub-tilis1A747基因组DNA,从中扩增bioI基因并将其克隆到大肠杆菌(Escherichia coli)的表达载体pET-28a(+)上,构建bioI的表达载体pET28a-bioI。将重组质粒pET28a-bioI电转化到大肠杆菌表达宿主BL21(DE3)中进行IPTG诱导表达,对表达产物BioI用Ni2+-NAT亲和层析树脂进行纯化,并对纯化蛋白进行波长扫描。【结果】成功构建了表达载体pET28a-bioI,酶切鉴定结果正确并在大肠杆菌中表达成功,经IPTG诱导8 h后,重组蛋白BioI的表达量占总可溶性蛋白的20%;波长扫描发现,重组蛋白BioI在400 nm处有特征吸收峰。【结论】bioI基因克隆表达成功,其表达产物BioI具有P450蛋白的特征,为蛋白性质的进一步研究和抗体的制备奠定了基础。; 关键词枯草芽孢杆菌 bioI基因大肠杆菌BL21(DE3) 高效表达; Keywords Bacillus subtilis bioI E. coli BL21 （DE3） high-level expression; 分类号 Q786 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	穿梭表达载体pYG43的构建及碱性纤维素酶基因的分泌表达	马磊蔡勇杨明明李青旺樊俊华祁艳霞吴迪张西峰齐枫	《安徽农业科学》 CAS 北大核心	2005	5	在线阅读下载PDF 职称材料
2	枯草芽孢杆菌生物素操纵元的初步改造	张西锋李万芬袁新宇张炜炜刘波王俊杨明明	《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心	2007	7	在线阅读下载PDF 职称材料
3	RP-HPLC测定发酵液中庚二酸的含量	蒲跃进刘波周占琴杨明明樊俊华	《安徽农业科学》 CAS 北大核心	2006	2	在线阅读下载PDF 职称材料
4	枯草芽孢杆菌bioI基因的克隆和高效表达及BioI蛋白的纯化	龚月生王晶刘锦妮袁新宇姬生跃王俊杨明明	《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心	2008	0	在线阅读下载PDF 职称材料