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工程酿酒酵母产番茄红素的提取纯化工艺优化及结构鉴定 被引量:2
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作者 石彬 朱伶俐 邓小敏 《中国酿造》 CAS 北大核心 2024年第8期202-208,共7页
为探究工程酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)发酵生产的番茄红素提取纯化方法及其结构,通过单因素和正交试验优化番茄红素的提取纯化工艺,并采用核磁共振(NMR)技术对其结构进行鉴定。结果表明,番茄红素的最佳提取工艺条件为酸热破壁... 为探究工程酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)发酵生产的番茄红素提取纯化方法及其结构,通过单因素和正交试验优化番茄红素的提取纯化工艺,并采用核磁共振(NMR)技术对其结构进行鉴定。结果表明,番茄红素的最佳提取工艺条件为酸热破壁:盐酸浓度3.0 mol/L,盐酸用量3.0 mL/0.1 g菌体,酸化时间60 min,酸化温度45℃;NaOH脱脂:NaOH浓度0.10 mol/L、NaOH用量2.0 mL/0.1 g菌体、皂化时间30 min,皂化后水浴温度40℃;丙酮提取∶料液比1∶20(g∶mL),提取温度40℃,提取时间50 min。最佳纯化工艺为正己烷析晶:40℃下用正己烷将粗提物溶解过滤,-20℃析晶12 h。在此优化提取纯化工艺条件下,番茄红素提取率为76%,纯度为96.7%。NMR结果显示,番茄红素结构为全反式番茄红素,与植物源番茄红素结构一致。 展开更多
关键词 工程酿酒酵母 番茄红素 提取纯化 工艺优化 结构鉴定
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利用橡胶树来源β-石竹烯新合成酶构建工程酿酒酵母的研究 被引量:2
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作者 石彬 娄晶 +1 位作者 杨竹如 邓小敏 《中国酿造》 CAS 北大核心 2023年第8期147-152,共6页
为了利用生物技术高效合成β-石竹烯,该研究从橡胶树(Hevea brasiliensis)中筛选并鉴定到β-石竹烯新合成酶,并构建高产β-石竹烯酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)工程菌株。结果表明,在橡胶树中筛选鉴定出一个新的β-石竹烯合成酶基... 为了利用生物技术高效合成β-石竹烯,该研究从橡胶树(Hevea brasiliensis)中筛选并鉴定到β-石竹烯新合成酶,并构建高产β-石竹烯酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)工程菌株。结果表明,在橡胶树中筛选鉴定出一个新的β-石竹烯合成酶基因,命名为HbBACS,其与已报道的β-石竹烯合成酶相比,编码蛋白的氨基酸序列同源性和相似性均较低。利用密码子优化的该基因构建工程酿酒酵母YCAR02,其β-石竹烯摇瓶发酵产量为206 mg/L。进一步对工程酿酒酵母YCAR02进行两阶段分批补料发酵,在添加10%肉豆蔻酸异丙酯覆盖剂的条件下,5 L发酵罐中β-石竹烯产量达到8.47 g/L。橡胶树来源的新β-石竹烯合成酶活性较高,这为利用合成生物技术规模化生产β-石竹烯提供了新的思路与方法。 展开更多
关键词 β-石竹烯 橡胶树 新合成酶 酿酒酵母 倍半萜 分批补料发酵
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HPLC-QAMS法同时测定何首乌防脱育发精华液中9种成分含量 被引量:3
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作者 刘英 林敏 戴思芮 《日用化学工业(中英文)》 CAS 北大核心 2023年第7期841-848,共8页
建立高效液相色谱一测多评法(HPLC-QAMS法)同时检测何首乌防脱育发精华液中9种成分的含量,并验证所建立方法的可行性和准确性。以槲皮苷为含量参照物,甲醇-0.1%磷酸为流动相,分别采用外标法和HPLC-QAMS法同时测定12批何首乌防脱育发精... 建立高效液相色谱一测多评法(HPLC-QAMS法)同时检测何首乌防脱育发精华液中9种成分的含量,并验证所建立方法的可行性和准确性。以槲皮苷为含量参照物,甲醇-0.1%磷酸为流动相,分别采用外标法和HPLC-QAMS法同时测定12批何首乌防脱育发精华液中大黄素、大黄素甲醚、杨梅苷、槲皮苷、杨梅素、槲皮素、山柰酚、穗花杉双黄酮、扁柏双黄酮的含量,对比两种方法的结果差异,验证HPLC-QAMS法的适用性。结果显示,9种成分各线性范围良好,相关系数均大于0.999,检出限为0.027~0.151μg/mL,定量限为0.076~0.449μg/mL。以槲皮苷为内参比物质,大黄素、大黄素甲醚、杨梅苷、杨梅素、槲皮素、山柰酚、穗花杉双黄酮、扁柏双黄酮的相对校正因子分别为0.7537,0.8369,1.0192,2.9913,1.6875,2.2369,1.0963和1.2493。两种方法测得的何首乌防脱育发精华液中9种成分的含量差异均无统计学意义(P>0.05)。以槲皮苷为含量参照物建立的相对校正因子重现性好,HPLC-QAMS法可用于何首乌防脱育发精华液中9种成分的质量评价。 展开更多
关键词 何首乌防脱育发精华液 高效液相色谱一测多评法 含量测定 相对校正因子
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