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STAT3磷酸化在铁死亡调控中的作用及其对人骨肉瘤细胞顺铂耐药的影响
1
作者
王新平
王林宽
+1 位作者
胡鹏超
石义华
《安徽医科大学学报》
北大核心
2025年第9期1670-1681,共12页
目的探究STAT3磷酸化在铁死亡调控中的作用及其对人骨肉瘤细胞顺铂耐药的影响。方法以人骨肉瘤细胞系HOS及其顺铂耐药细胞系HOS/DDP为实验对象,顺铂(0.5、1、2、4、8、16、32 mg/L)、铁死亡激动剂Erastin(Era)(2μmol/L)和铁死亡抑制剂F...
目的探究STAT3磷酸化在铁死亡调控中的作用及其对人骨肉瘤细胞顺铂耐药的影响。方法以人骨肉瘤细胞系HOS及其顺铂耐药细胞系HOS/DDP为实验对象,顺铂(0.5、1、2、4、8、16、32 mg/L)、铁死亡激动剂Erastin(Era)(2μmol/L)和铁死亡抑制剂Ferrostain-1(Fer1)(10μmol/L)单独或联合处理。使用CCK-8法和细胞克隆形成实验测定不同处理组细胞活力与增殖能力;细胞划痕实验测定细胞的迁移能力;采用试剂盒测定细胞活性氧(ROS)、细胞内亚铁离子含量、细胞内线粒体的膜电位和功能状态、丙二醛(MDA)水平和还原型谷胱甘肽/氧化型谷胱甘肽(GSH/GSSG)比值;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测铁死亡相关基因的mRNA表达水平;通过Western blot检测各组谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、溶质载体家族7成员11(SLC7A11)、磷酸化信号传导子及转录激活子3(p-STAT3)及信号转导和转录激活因子3(STAT3)蛋白的表达。结果顺铂单独处理后HOS细胞活力、线粒体膜电位及GSH/GSSG比值下降(P<0.01),ROS水平、亚铁离子水平及MDA含量升高(P<0.01),GPX4(P<0.01)和SLC7A11蛋白及p-STAT3水平下降(P<0.05);联合铁死亡抑制剂Fer1处理可逆转上述结果(P<0.05)。在HOS/DDP细胞中,铁死亡抑制基因GPX4、FTH1、SLC7A11和AIFM2较HOS细胞高(P<0.05),而铁死亡促进基因ACSL4、PTGS2则较HOS细胞低(P<0.05),顺铂单独处理引起的细胞活力及线粒体膜电位下降程度、ROS、亚铁离子及MDA水平的升高程度均低于HOS细胞,SLC7A11蛋白含量变化不明显;但联合铁死亡激动剂Era处理后,HOS/DDP细胞的活力、线粒体膜电位、GSH/GSSG比值均下降(P<0.05),且p-STAT3、GPX4及SLC7A11的蛋白水平也降低(P<0.05)。结论激活由p-STAT3参与调控的铁死亡过程可以增强HOS/DDP对顺铂的敏感性。
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关键词
人骨肉瘤细胞
铁死亡
顺铂
耐药
STAT3蛋白
p-STAT3蛋白
在线阅读
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职称材料
石蒜碱通过YAP1/TRFC通路促进骨肉瘤细胞铁死亡并增强顺铂敏感性
2
作者
王林宽
王新平
+3 位作者
易开君
黎智勇
赵琦
石义华
《中国病理生理杂志》
北大核心
2025年第5期882-894,共13页
目的:探讨石蒜碱(lycorine,Lyc)联合顺铂(cisplatin,Cis)对人骨肉瘤细胞的顺铂治疗的增敏效果,并探讨其作用机制。方法:利用人骨肉瘤细胞MG63、HOS和顺铂耐药细胞HOS/DDP,通过CCK8实验分别检测Lyc、顺铂单独或联合用药对细胞活力的影响...
目的:探讨石蒜碱(lycorine,Lyc)联合顺铂(cisplatin,Cis)对人骨肉瘤细胞的顺铂治疗的增敏效果,并探讨其作用机制。方法:利用人骨肉瘤细胞MG63、HOS和顺铂耐药细胞HOS/DDP,通过CCK8实验分别检测Lyc、顺铂单独或联合用药对细胞活力的影响;集落形成实验检测药物对细胞增殖能力的影响;划痕实验检测药物对细胞迁移能力的影响;活性氧(reactive oxygen species,ROS)试剂盒检测细胞ROS水平的改变;谷胱甘肽(gultathione,GSH)/氧化型谷胱甘肽(oxidized glutathione,GSSG)试剂盒测定细胞内GSH水平的变化;线粒体膜电位探针JC-1检测药物对线粒体功能的影响;FerrOrange亚铁离子荧光探针检测细胞内亚铁离子含量的改变;采用丙二醛(malondialdehyde,MDA)试剂盒测定细胞内MDA含量的变化;RT-qPCR检测药物对铁死亡关键基因表达水平的影响;Western blot检测Yes相关蛋白1(Yes-associated protein 1,YAP1)、脂酰辅酶A合成酶长链家族成员4(acyl-CoA sythetase long-chain family member 4,ACSL4)、谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)、血红素加氧酶1(heme oxygenase-1,HO-1)和转铁蛋白受体(transferrin receptor,TFRC)的蛋白表达水平的改变。结果:Lyc与顺铂均能抑制人骨肉瘤细胞的增殖,与单独顺铂处理相比,Lyc联合顺铂处理后MG63、HOS及HOS/DDP细胞的活力均显著下降,细胞增殖及迁移能力受到显著抑制;ROS水平显著升高、GSH含量减少,线粒体损伤明显,亚铁离子水平显著增加,MDA含量显著增加;RT-qPCR结果显示,Lyc联合顺铂较顺铂单独处理能更显著下调铁死亡促进基因的表达,并上调铁死亡抑制基因的表达(P<0.05);Western blot结果显示Lyc联合顺铂处理后GPX4的蛋白表达略下降,YAP1、TRFC、ACSL4及HO-1表达均显著升高(P<0.05)。结论:Lyc通过增加YAP1/TRFC通路介导的铁死亡,提高MG63、HOS及HOS/DDP细胞对顺铂的敏感性。
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关键词
石蒜碱
骨肉瘤
顺铂
耐药性
铁死亡
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职称材料
题名
STAT3磷酸化在铁死亡调控中的作用及其对人骨肉瘤细胞顺铂耐药的影响
1
作者
王新平
王林宽
胡鹏超
石义华
机构
武汉科技大学医学院襄阳市第一人民医院研究生联合培养基地骨科
湖北医药
学院
附属
襄阳市
第一
人民医院
中心实验室
湖北医药
学院
附属
襄阳市
第一
人民医院
骨科
出处
《安徽医科大学学报》
北大核心
2025年第9期1670-1681,共12页
基金
国家自然科学基金项目(编号:81703015)。
文摘
目的探究STAT3磷酸化在铁死亡调控中的作用及其对人骨肉瘤细胞顺铂耐药的影响。方法以人骨肉瘤细胞系HOS及其顺铂耐药细胞系HOS/DDP为实验对象,顺铂(0.5、1、2、4、8、16、32 mg/L)、铁死亡激动剂Erastin(Era)(2μmol/L)和铁死亡抑制剂Ferrostain-1(Fer1)(10μmol/L)单独或联合处理。使用CCK-8法和细胞克隆形成实验测定不同处理组细胞活力与增殖能力;细胞划痕实验测定细胞的迁移能力;采用试剂盒测定细胞活性氧(ROS)、细胞内亚铁离子含量、细胞内线粒体的膜电位和功能状态、丙二醛(MDA)水平和还原型谷胱甘肽/氧化型谷胱甘肽(GSH/GSSG)比值;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测铁死亡相关基因的mRNA表达水平;通过Western blot检测各组谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、溶质载体家族7成员11(SLC7A11)、磷酸化信号传导子及转录激活子3(p-STAT3)及信号转导和转录激活因子3(STAT3)蛋白的表达。结果顺铂单独处理后HOS细胞活力、线粒体膜电位及GSH/GSSG比值下降(P<0.01),ROS水平、亚铁离子水平及MDA含量升高(P<0.01),GPX4(P<0.01)和SLC7A11蛋白及p-STAT3水平下降(P<0.05);联合铁死亡抑制剂Fer1处理可逆转上述结果(P<0.05)。在HOS/DDP细胞中,铁死亡抑制基因GPX4、FTH1、SLC7A11和AIFM2较HOS细胞高(P<0.05),而铁死亡促进基因ACSL4、PTGS2则较HOS细胞低(P<0.05),顺铂单独处理引起的细胞活力及线粒体膜电位下降程度、ROS、亚铁离子及MDA水平的升高程度均低于HOS细胞,SLC7A11蛋白含量变化不明显;但联合铁死亡激动剂Era处理后,HOS/DDP细胞的活力、线粒体膜电位、GSH/GSSG比值均下降(P<0.05),且p-STAT3、GPX4及SLC7A11的蛋白水平也降低(P<0.05)。结论激活由p-STAT3参与调控的铁死亡过程可以增强HOS/DDP对顺铂的敏感性。
关键词
人骨肉瘤细胞
铁死亡
顺铂
耐药
STAT3蛋白
p-STAT3蛋白
Keywords
human osteosarcoma cell
ferroptosis
cisplatin
drug resistance
STAT3 protein
p-STAT3 protein
分类号
R738.1 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
石蒜碱通过YAP1/TRFC通路促进骨肉瘤细胞铁死亡并增强顺铂敏感性
2
作者
王林宽
王新平
易开君
黎智勇
赵琦
石义华
机构
武汉科技大学医学院襄阳市第一人民医院研究生联合培养基地骨科
湖北医药
学院
附属
襄阳市
第一
人民医院
中心实验室
湖北医药
学院
附属
襄阳市
第一
人民医院
骨科
出处
《中国病理生理杂志》
北大核心
2025年第5期882-894,共13页
基金
国家自然科学基金资助项目(No.81703015)
湖北省自然科学基金创新发展联合基金资助项目(No.2024AFD059,No.2023AFD042)
+1 种基金
湖北省自然科学基金资助项目(No.2023AFB936)
湖北省卫生健康委科研项目(No.WJ2023F075)。
文摘
目的:探讨石蒜碱(lycorine,Lyc)联合顺铂(cisplatin,Cis)对人骨肉瘤细胞的顺铂治疗的增敏效果,并探讨其作用机制。方法:利用人骨肉瘤细胞MG63、HOS和顺铂耐药细胞HOS/DDP,通过CCK8实验分别检测Lyc、顺铂单独或联合用药对细胞活力的影响;集落形成实验检测药物对细胞增殖能力的影响;划痕实验检测药物对细胞迁移能力的影响;活性氧(reactive oxygen species,ROS)试剂盒检测细胞ROS水平的改变;谷胱甘肽(gultathione,GSH)/氧化型谷胱甘肽(oxidized glutathione,GSSG)试剂盒测定细胞内GSH水平的变化;线粒体膜电位探针JC-1检测药物对线粒体功能的影响;FerrOrange亚铁离子荧光探针检测细胞内亚铁离子含量的改变;采用丙二醛(malondialdehyde,MDA)试剂盒测定细胞内MDA含量的变化;RT-qPCR检测药物对铁死亡关键基因表达水平的影响;Western blot检测Yes相关蛋白1(Yes-associated protein 1,YAP1)、脂酰辅酶A合成酶长链家族成员4(acyl-CoA sythetase long-chain family member 4,ACSL4)、谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)、血红素加氧酶1(heme oxygenase-1,HO-1)和转铁蛋白受体(transferrin receptor,TFRC)的蛋白表达水平的改变。结果:Lyc与顺铂均能抑制人骨肉瘤细胞的增殖,与单独顺铂处理相比,Lyc联合顺铂处理后MG63、HOS及HOS/DDP细胞的活力均显著下降,细胞增殖及迁移能力受到显著抑制;ROS水平显著升高、GSH含量减少,线粒体损伤明显,亚铁离子水平显著增加,MDA含量显著增加;RT-qPCR结果显示,Lyc联合顺铂较顺铂单独处理能更显著下调铁死亡促进基因的表达,并上调铁死亡抑制基因的表达(P<0.05);Western blot结果显示Lyc联合顺铂处理后GPX4的蛋白表达略下降,YAP1、TRFC、ACSL4及HO-1表达均显著升高(P<0.05)。结论:Lyc通过增加YAP1/TRFC通路介导的铁死亡,提高MG63、HOS及HOS/DDP细胞对顺铂的敏感性。
关键词
石蒜碱
骨肉瘤
顺铂
耐药性
铁死亡
Keywords
lycorine
osteosarcoma
cisplatin
drug resistance
ferroptosis
分类号
R738.1 [医药卫生—肿瘤]
R979.11 [医药卫生—药品]
R363 [医药卫生—病理学]
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被引量
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1
STAT3磷酸化在铁死亡调控中的作用及其对人骨肉瘤细胞顺铂耐药的影响
王新平
王林宽
胡鹏超
石义华
《安徽医科大学学报》
北大核心
2025
0
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下载PDF
职称材料
2
石蒜碱通过YAP1/TRFC通路促进骨肉瘤细胞铁死亡并增强顺铂敏感性
王林宽
王新平
易开君
黎智勇
赵琦
石义华
《中国病理生理杂志》
北大核心
2025
0
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