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中试生产的结核DNA疫苗免疫效能研究 被引量：1
1
作者 吴小丽 闭兰 +4 位作者 赵亚杰 罗丹 齐建新 王炯 李忠明 《中国防痨杂志》 CAS 2012年第3期168-171,共4页
目的以300L发酵罐中试规模生产的冻干Mtb Ag85A质粒DNA疫苗为基础免疫小鼠,对该疫苗的免疫效能进行研究。方法将4～6周龄的BALB/c小鼠20只通过数字表法随机分为2组,一组免疫MtbAg85A质粒DNA疫苗(结核DNA疫苗免疫组),另一组免疫PBS作为... 目的以300L发酵罐中试规模生产的冻干Mtb Ag85A质粒DNA疫苗为基础免疫小鼠,对该疫苗的免疫效能进行研究。方法将4～6周龄的BALB/c小鼠20只通过数字表法随机分为2组,一组免疫MtbAg85A质粒DNA疫苗(结核DNA疫苗免疫组),另一组免疫PBS作为阴性对照(PBS对照组);于免疫前采血,肌内注射免疫3次。在第3次免疫后3周摘眼球处死小鼠,收集血清,进行血清特异性抗体检测和细胞因子(IFN-γ、IL-4)检测;同时对每只小鼠取脾细胞进行特异性γ干扰素(IFN-γ)分泌检测和脾细胞CD4+、CD8+百分率检测。结果 (1)免疫前后免疫组与对照组抗体水平吸光度A值均小于0.2。(2)结核DNA疫苗免疫组血清细胞因子IL-4水平[(146.2±34.3)pg/ml]低于PBS对照组[(177.7±28.1)pg/ml],差异有统计学意义(t=2.244,P=0.038),而IFN-γ水平[(129.6±159.0)pg/ml]虽然高于PBS对照组[(76.5±21.5)pg/ml],但差异无统计学意义(t=-1.047,P=0.309)。(3)酶联免疫斑点检测结果表明结核DNA疫苗免疫组脾细胞特异性IFN-γ分泌水平(分泌IFN-γ细胞个数)(103.60±112.14)高于PBS对照组(5.78±5.83),差异有统计学意义(t=36.538,P=0.018)。(4)结核DNA疫苗免疫组CD4+细胞百分率均值(21.57%)高于PBS对照组(12.17%),差异有统计学意义(t=3.043,P=0.038);CD8+细胞百分率均值(13.70%)与PBS对照组(10.57%)相比,差异无统计学意义(t=0.847,P=0.445)。结论Mtb Ag85A质粒DNA疫苗主要刺激机体Th1型细胞免疫,而对诱导机体产生Th2型细胞免疫应答没有显著的促进作用。 展开更多
关键词 疫苗 DNA 酰基转移酶类 抗原 细菌 免疫活性
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武汉(Wu)系列抗入T细胞及其亚群单抗 被引量：1
2
作者 史良如 陈善华 +8 位作者 王中德 谭向阳 欧阳斌 徐辉 吴晓波 封江南 王志友 孙可芳 赵亚杰 《单克隆抗体通讯》 CSCD 1989年第2期22-29,共8页
本文报告了Wu系列抗人T及其亚群单抗按国际第三次人白细胞分化抗原专题讨论会要求进行检定的结果。这是国内第一套较全的OKT样系列单抗,即WuT1(OKT1,CD5);WuT3(OKT3,CD3);WuT4(OKT4,CD4);WuT6(OKT6,CD1a):WuT8(OKT8,CD8);WuT9(OKT9,抗... 本文报告了Wu系列抗人T及其亚群单抗按国际第三次人白细胞分化抗原专题讨论会要求进行检定的结果。这是国内第一套较全的OKT样系列单抗,即WuT1(OKT1,CD5);WuT3(OKT3,CD3);WuT4(OKT4,CD4);WuT6(OKT6,CD1a):WuT8(OKT8,CD8);WuT9(OKT9,抗转铁蛋白受体,抗TfR);WuT10(OKT10,CD38);WuT11(OKT11,CD2)及Wu-Tac(Tac,CD25)。 展开更多
关键词 单抗 亚群 T细胞 人白细胞分化抗原 抗转铁蛋白受体 武汉 专题讨论会 OKT8
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鼠抗CD71单抗轻链及重链可变区基因的克隆和序列分析 被引量：1
3
作者 王志友 沈弢 +5 位作者 张爱华 闭兰 金玉铃 孙可芳 余模松 史良如 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2002年第5期409-411,共3页
目的 获得鼠抗人CD71分子单抗的轻链及重链可变区基因。方法 用一步法提取总RNA,逆转录形成cDNA,设计并合成一套扩增小鼠重、轻链可变区的通用引物,通过PCR扩增基因．分别克隆人pMD18－T载体中,作核苷酸序列分析。结果用重链引物扩增获... 目的 获得鼠抗人CD71分子单抗的轻链及重链可变区基因。方法 用一步法提取总RNA,逆转录形成cDNA,设计并合成一套扩增小鼠重、轻链可变区的通用引物,通过PCR扩增基因．分别克隆人pMD18－T载体中,作核苷酸序列分析。结果用重链引物扩增获得长约350bp的片段,用轻链引物扩增获得长约330bp的片段,序列测定获得它们的DNA序列。结论克隆的重链可变区基因长度为348bp,属于小鼠H链可变区IA亚组;克隆的轻链可变区基因长度为336bp,属于小鼠K轻链可变区Ⅱ亚组。 展开更多
关键词 CD71 抗体 可变区基因 单克隆抗体 序列分析 动物实验
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鼠抗CD4抗体轻链及重链可变区基因的克隆和序列分析 被引量：1
4
作者 王志友 张爱华 闭兰 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期251-253,共3页
为获得鼠抗人 T细胞分化抗原 4分子单抗的轻链及重链可变区基因。采用 RT- PCR技术 ,从 Wu T4细胞总RNA中扩增出轻链和重链可变区基因 ,进行克隆并作核苷酸序列分析 ,发现 RT- PCR扩增出来的两条轻链和一条重链可变区基因分别为 4 0 0 b... 为获得鼠抗人 T细胞分化抗原 4分子单抗的轻链及重链可变区基因。采用 RT- PCR技术 ,从 Wu T4细胞总RNA中扩增出轻链和重链可变区基因 ,进行克隆并作核苷酸序列分析 ,发现 RT- PCR扩增出来的两条轻链和一条重链可变区基因分别为 4 0 0 bp左右 ,构建的 p MD18T- VL 和 p MD18T- VH 重组克隆载体 ,酶切与预期结果相符。测序得到它们的 DNA序列。结果表明 ,克隆的两条轻链可变区基因序列一致 ,长度均为 32 4 bp,属于鼠轻链 亚类。克隆的重链可变区基因长度为 375 bp,属于鼠重链 (C)亚类。 展开更多
关键词 T细胞分化抗原4 鼠抗体可变区基因 序列分析 基因克隆
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杂交瘤细胞核糖核酸抗病毒作用 被引量：1
5
作者 张涛 封江南 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第12期542-544,共3页
目的：从分泌抗狂犬病毒糖蛋白单克隆抗体（ＩｇＭ）杂交瘤细胞中提取核糖核酸，研究其抗狂犬病毒的作用。方法：腹腔注射该种核糖核酸４ｗ后用狂犬病毒ＣＶＳ株进行颅腔攻击。结果：该核糖核酸能明显延长动物的生存时间。结论：该核糖... 目的：从分泌抗狂犬病毒糖蛋白单克隆抗体（ＩｇＭ）杂交瘤细胞中提取核糖核酸，研究其抗狂犬病毒的作用。方法：腹腔注射该种核糖核酸４ｗ后用狂犬病毒ＣＶＳ株进行颅腔攻击。结果：该核糖核酸能明显延长动物的生存时间。结论：该核糖核酸对狂犬病毒且有一定的抵抗作用。 展开更多
关键词 免疫核糖核酸 杂交瘤 单克隆抗体 狂犬病毒
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抗CD3单克隆抗体重、轻链可变区基因的克隆及序列分析
6
作者 张囡 陈明洁 +6 位作者 陈敬 金海陵 张爱华 闭兰 左建民 王志友 史良如 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第9期608-610,共3页
目的 :抗CD3单克隆抗体 (WuT3)可变区基因克隆及序列分析。方法 :采用RT PCR技术 ,从WuT3杂交瘤细胞总RNA中扩增VH 、VL 片段 ,经酶切后通过链接反应构建重组克隆载体 ,测序鉴定。结果 :通过国际联机检索发现VH 、VL 基因与Ig同源 ,分... 目的 :抗CD3单克隆抗体 (WuT3)可变区基因克隆及序列分析。方法 :采用RT PCR技术 ,从WuT3杂交瘤细胞总RNA中扩增VH 、VL 片段 ,经酶切后通过链接反应构建重组克隆载体 ,测序鉴定。结果 :通过国际联机检索发现VH 、VL 基因与Ig同源 ,分别符合小鼠IgVH 、Vκ基因特征。VH 基因属于鼠重链VH 第IIB亚类 ,全长 36 3bp ,可编码 12 1个氨基酸 ;VL 基因属于鼠κ轻链第III亚类 ,全长 330bp ,可编码 110个氨基酸。结论 :成功获得WuT3单抗的重、轻链可变区基因。 展开更多
关键词 McAb WuT3 基因克隆 DNA序列分析 抗CD3单克隆抗体
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转铁蛋白受体在肝癌细胞上的表达
7
作者 封江南 史良如 《单克隆抗体通讯》 CSCD 1989年第4期42-43,共2页
作者用抗转铁蛋白受体单克隆抗体抗TfR McAb,(D71)检测17例原发性肝癌患者肿瘤组织。发现14例肝癌细胞呈现特异性结合,阳性率为82.4％。其余3例肝癌细胞未检测到转铁蛋白受体(TfR),可能与肝癌细胞的分化程度或分泌程度有关。同时用抗A-F... 作者用抗转铁蛋白受体单克隆抗体抗TfR McAb,(D71)检测17例原发性肝癌患者肿瘤组织。发现14例肝癌细胞呈现特异性结合,阳性率为82.4％。其余3例肝癌细胞未检测到转铁蛋白受体(TfR),可能与肝癌细胞的分化程度或分泌程度有关。同时用抗A-FP单克隆抗体与CD71进行比较,发现肝癌胞细TfR含量高于A-FP含量。该发现为肝癌的诊断及导向治疗提供了新的较好的载体。 展开更多
关键词 肝癌细胞 抗转铁蛋白受体 原发性肝癌患者 单克隆抗体抗 McAb 肿瘤组织 分化程度 CD71 A-FP FFR 特异性 TFR 检测 含量
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单克隆与多克隆双抗体夹心法测定可溶性白细胞介素2受体试剂盒的研制
8
作者 邬义安 王志友 +3 位作者 蒋轶敏 端义坤 李基础 史良如 《同济医科大学学报》 CSCD 1998年第3期187-189,共3页
采用抗白细胞介素2受体(IL-2R)的单克隆与多克隆抗体以及辣根过氧化物酶(HRP)标记的羊抗兔IgG,建立了高特异性及高灵敏度的双抗体夹心法测定可溶性白细胞介素2受体(sIL-2R)。结果,酶联免疫吸附试验(ELISA)测得兔抗人IL-2R多克隆抗体效价... 采用抗白细胞介素2受体(IL-2R)的单克隆与多克隆抗体以及辣根过氧化物酶(HRP)标记的羊抗兔IgG,建立了高特异性及高灵敏度的双抗体夹心法测定可溶性白细胞介素2受体(sIL-2R)。结果,酶联免疫吸附试验(ELISA)测得兔抗人IL-2R多克隆抗体效价达1:10~4,免疫双向扩散法测得羊抗兔抗体效价高达1:256。本试剂盒检测sIL-2R的特异性强,灵敏度为100U/ml,在28C存放一年,稳定性不变。此方法操作简单,适用于临床和基础研究。 展开更多
关键词 单克隆抗体 多克隆抗体 双抗体夹心法 SIL-2R
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用CD38单抗纯化膜抗原制备分泌不同同种型CD38单抗的杂交瘤
9
作者 徐荆豫 史良如 潘莉 《单克隆抗体通讯》 CSCD 1993年第4期64-65,共2页
根据单抗的应用目的不同,人们常常需要免疫球蛋白不同类或亚类的单抗。因此,应用已知某一类型免疫球蛋白的单抗纯化相应抗原,建立分泌不同免疫球蛋白类或亚类的杂交瘤细胞系,具有实际应用价值。本文介绍用已知ISG_1亚类CD 38单抗建立分... 根据单抗的应用目的不同,人们常常需要免疫球蛋白不同类或亚类的单抗。因此,应用已知某一类型免疫球蛋白的单抗纯化相应抗原,建立分泌不同免疫球蛋白类或亚类的杂交瘤细胞系,具有实际应用价值。本文介绍用已知ISG_1亚类CD 38单抗建立分泌IgG2a亚类单抗杂交瘤细胞系的方法。 展开更多
关键词 CD38 单克隆抗体 膜抗原 制备 杂交瘤
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计算机在杂交瘤技术上的应用
10
作者 陈培军 史良如 《单克隆抗体通讯》 CSCD 1989年第1期87-92,共6页
本文首次报道了用DBASEⅢ语言设计的、在IBM XT计算机上实现的两个处理系统,即测定处理系统(TDS)和冻存处理系统(FDS)。在杂交瘤工作中,使单抗测定结果的记录和细胞系冷冻保存的信息实现了计算机化。文中还对TDS和FDS的特点和计算机在... 本文首次报道了用DBASEⅢ语言设计的、在IBM XT计算机上实现的两个处理系统,即测定处理系统(TDS)和冻存处理系统(FDS)。在杂交瘤工作中,使单抗测定结果的记录和细胞系冷冻保存的信息实现了计算机化。文中还对TDS和FDS的特点和计算机在实验室中的应用前景进行了讨论。 展开更多
关键词 计算机 杂交瘤技术 冻存处理系统 测定处理系统
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