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肠道病毒71型外壳蛋白VP2在Pichia．pastoris酵母中的表达
被引量：
2
1
作者
周世力
朱绍咏
+2 位作者
许国权
王国梁
韩雪
《分析科学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第1期67-70,共4页
利用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)的方法,克隆肠道病毒71型(Entero-virus 71,EV71)SHZH03株外壳蛋白VP2基因,构建酵母分泌型表达质粒pPIC9K/VP2,经序列测定证实-αfactor信号肽和VP2的序列和阅读框正确后,用SacI酶切使之线性化,电转化...
利用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)的方法,克隆肠道病毒71型(Entero-virus 71,EV71)SHZH03株外壳蛋白VP2基因,构建酵母分泌型表达质粒pPIC9K/VP2,经序列测定证实-αfactor信号肽和VP2的序列和阅读框正确后,用SacI酶切使之线性化,电转化法将目的基因整合到宿主菌GS115基因组上;经转化子表型筛选和PCR分析鉴定后,甲醇诱导筛选到高效表达VP2蛋白的工程菌株。用饱和硫酸铵法对重组蛋白VP2进行了较好的纯化。Western Blot分析表明,重组蛋白VP2具有较好的反应原性,从而为发展EV71快速、高效、廉价诊断试剂奠定了基础。
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关键词
肠道病毒71型
VP2
巴斯德毕赤酵母
GS115菌株
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职称材料
活性维生素D3对去卵巢骨质疏松大鼠骨质量、维生素D代谢物水平及肾脏维生素D受体(VDR)mRNA表达的影响
被引量：
2
2
作者
王介毅
沈霖
+4 位作者
帅波
杨艳萍
郭向飞
曹晴晴
魏兵
《中华骨质疏松和骨矿盐疾病杂志》
2009年第1期36-40,共5页
目的 研究活性维生素D_3对去卵巢骨质疏松大鼠骨质量25(OH)D_3和1,25(OH)_2D_3水平及肾脏VDR mRNA表达的影响,为临床防治骨质疏松提供依据。方法 36只八月龄健康雌性SD大鼠随机分为3组,即模型组(Model),假手术组(Sham),活性维生素D3治...
目的 研究活性维生素D_3对去卵巢骨质疏松大鼠骨质量25(OH)D_3和1,25(OH)_2D_3水平及肾脏VDR mRNA表达的影响,为临床防治骨质疏松提供依据。方法 36只八月龄健康雌性SD大鼠随机分为3组,即模型组(Model),假手术组(Sham),活性维生素D3治疗组(Treatment),每组12只,对照治疗三月后全部处死,用双能X线骨密度仪及生物力学技术评估模型的骨密度及骨质量,采用酶联免疫吸附方法检测血清或组织中25(OH)D3和1,25(OH)_2D_3含量,用FQ-PCR方法检测肾脏组织中VDR mRNA的表达情况。结果 (1)模型大鼠股骨头及粗隆部的BMD及骨生物力学指标(最大载荷和最大压应变)均明显下降(P<0.05);(2)活性维生素D3治疗组与模型组比较,血清、肝脏和肾脏组织中25(OH)D_3和1,25(OH)_2D_3的含量明显提高(P<0.05),与假手术组比较无统计学意义;(3)模型组大鼠肾脏VDR mRNA的表达显著低于活性维生素D3治疗组(P=0.004)。结论本实验结果提示适当补充活性维生素D_3可有效的防治去卵巢大鼠骨量丢失和骨质量下降,为临床活性维生素D应用提供实验依据。
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关键词
维生素D受体
骨密度
骨生物力学
骨质疏松症
1
25(OH)2D3
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职称材料
题名
肠道病毒71型外壳蛋白VP2在Pichia．pastoris酵母中的表达
被引量：
2
1
作者
周世力
朱绍咏
许国权
王国梁
韩雪
机构
江汉大学生命科学学院
武汉市黄陂人民医院
出处
《分析科学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第1期67-70,共4页
基金
湖北省科技攻关计划项目(No.2005AA301C56)
文摘
利用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)的方法,克隆肠道病毒71型(Entero-virus 71,EV71)SHZH03株外壳蛋白VP2基因,构建酵母分泌型表达质粒pPIC9K/VP2,经序列测定证实-αfactor信号肽和VP2的序列和阅读框正确后,用SacI酶切使之线性化,电转化法将目的基因整合到宿主菌GS115基因组上;经转化子表型筛选和PCR分析鉴定后,甲醇诱导筛选到高效表达VP2蛋白的工程菌株。用饱和硫酸铵法对重组蛋白VP2进行了较好的纯化。Western Blot分析表明,重组蛋白VP2具有较好的反应原性,从而为发展EV71快速、高效、廉价诊断试剂奠定了基础。
关键词
肠道病毒71型
VP2
巴斯德毕赤酵母
GS115菌株
Keywords
Enterovirus 71
VP2
Pichia. pastoris
GS115
分类号
Q93 [生物学—微生物学]
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职称材料
题名
活性维生素D3对去卵巢骨质疏松大鼠骨质量、维生素D代谢物水平及肾脏维生素D受体(VDR)mRNA表达的影响
被引量：
2
2
作者
王介毅
沈霖
帅波
杨艳萍
郭向飞
曹晴晴
魏兵
机构
华中科技大学同济医学院附属协和
医院
骨代谢实验室
武汉市黄陂人民医院
骨科
出处
《中华骨质疏松和骨矿盐疾病杂志》
2009年第1期36-40,共5页
基金
湖北省卫生厅资助课题(编号：鄂卫发2008-Y18)
文摘
目的 研究活性维生素D_3对去卵巢骨质疏松大鼠骨质量25(OH)D_3和1,25(OH)_2D_3水平及肾脏VDR mRNA表达的影响,为临床防治骨质疏松提供依据。方法 36只八月龄健康雌性SD大鼠随机分为3组,即模型组(Model),假手术组(Sham),活性维生素D3治疗组(Treatment),每组12只,对照治疗三月后全部处死,用双能X线骨密度仪及生物力学技术评估模型的骨密度及骨质量,采用酶联免疫吸附方法检测血清或组织中25(OH)D3和1,25(OH)_2D_3含量,用FQ-PCR方法检测肾脏组织中VDR mRNA的表达情况。结果 (1)模型大鼠股骨头及粗隆部的BMD及骨生物力学指标(最大载荷和最大压应变)均明显下降(P<0.05);(2)活性维生素D3治疗组与模型组比较,血清、肝脏和肾脏组织中25(OH)D_3和1,25(OH)_2D_3的含量明显提高(P<0.05),与假手术组比较无统计学意义;(3)模型组大鼠肾脏VDR mRNA的表达显著低于活性维生素D3治疗组(P=0.004)。结论本实验结果提示适当补充活性维生素D_3可有效的防治去卵巢大鼠骨量丢失和骨质量下降,为临床活性维生素D应用提供实验依据。
关键词
维生素D受体
骨密度
骨生物力学
骨质疏松症
1
25(OH)2D3
Keywords
VDR
BMD
bone biomechanics
osteoporosis
1,25-dihydroxyvitamin D3
分类号
R681 [医药卫生—骨科学]
R274.91 [医药卫生—中西医结合]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
肠道病毒71型外壳蛋白VP2在Pichia．pastoris酵母中的表达
周世力
朱绍咏
许国权
王国梁
韩雪
《分析科学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009
2
在线阅读
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职称材料
2
活性维生素D3对去卵巢骨质疏松大鼠骨质量、维生素D代谢物水平及肾脏维生素D受体(VDR)mRNA表达的影响
王介毅
沈霖
帅波
杨艳萍
郭向飞
曹晴晴
魏兵
《中华骨质疏松和骨矿盐疾病杂志》
2009
2
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