文摘目的:探究右美托咪定(dexmedetomidine,DEX)对博莱霉素(bleomycin,BLM)诱导的肺纤维化小鼠的保护作用以及对Toll样受体4/髓样分化因子(toll-like receptor 4/myeloid differentiation factor88,TLR4/MyD88)信号通路的影响。方法:通过注射BLM诱导实验性小鼠肺纤维化。将小鼠分为生理盐水(Sham)组、BLM组、BLM+DEX组、BLM+PFD组和BLM+DEX+LPS组。苏木素-伊红(hematoxylin and eosin,HE)染色和Masson染色分析肺组织病理学变化;免疫组织化学检测纤连蛋白(fibronectin,Fn)、α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)和Ⅰ型胶原蛋白(collagenⅠ)表达情况;原位缺口末端标记法(TdT mediated d UTP nick end labeling,TUNEL)检测肺组织中细胞凋亡;检测支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)中总细胞数量及蛋白质含量;Western blot检测肺组织中TLR4/MyD88信号通路和细胞凋亡相关蛋白水平。结果:与Sham组相比,BLM刺激后肺组织中肺泡炎评分[(2.56±0.24)分vs.(0.15±0.02)分]和Ashcroft评分[(5.68±0.52)分vs.(0.09±0.01)分]明显增高,Fn[(63.63±5.48)%vs.(25.12±2.16)%]、α-SMA[(58.63±5.03)%vs.(17.56±1.25)%]和collagenⅠ[(55.32±5.16)%vs.(12.03±1.20)%]表达升高(P<0.05),肺部炎症程度和纤维化程度增加;同时TUNEL阳性细胞率增高,细胞中bcl-2相关X蛋白(bcl-2 associated X protein,Bax)水平增高,B淋巴细胞瘤-2蛋白(B-cell lymphoma-2 protein,Bcl-2)水平降低(P<0.05);BALF中总细胞数量[(3.54±0.06)×10^(5)个/mL vs.(0.98±0.07)×10^(5)个/mL]和蛋白质含量[(2.85±0.20)mg/mL vs.(0.29±0.03)mg/mL]升高(P<0.05);肺组织中TLR4和MyD88蛋白水平升高(P<0.05)。DEX治疗可减轻BLM诱导的小鼠肺纤维化和炎症,降低TUNEL阳性细胞率,并逆转Fn、α-SMA、collagenⅠ、Bax和Bcl-2表达(P<0.05);同时DEX也降低BLM诱导的小鼠BALF中总细胞数量和蛋白质含量(P<0.05)。此外,DEX降低BLM诱导的小鼠肺组织中TLR4和MyD88蛋白水平(P<0.05)。吡非尼酮(pirfenidone,PFD)与DEX具有相似的作用效果。脂肪酶(lipase,LPS)可以部分逆转DEX对BLM诱导的肺纤维化小鼠保护作用(P<0.05)。结论:DEX可能通过抑制TLR4/MyD88信号通路改善BLM诱导的小鼠肺纤维化。
