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CRISPR/CAS9敲除PD-1的肿瘤浸润T淋巴细胞回输对小鼠结肠癌的治疗作用 被引量：1
1
作者 瞿紫微 李晓辉 +3 位作者 郭建辉 陈华涛 吴彪 孟庆彬 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期1189-1196,共8页
目的:探讨应用成簇规律间隔的短回文重复序列及其相关蛋白(CRISPR/Cas9)技术敲除程序性死亡分子-1(PD-1)的肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)回输对结肠癌小鼠的治疗作用。方法:皮下注射CT26构建小鼠结肠癌模型,从3只模型小鼠肿瘤组织中提取TIL,并... 目的:探讨应用成簇规律间隔的短回文重复序列及其相关蛋白(CRISPR/Cas9)技术敲除程序性死亡分子-1(PD-1)的肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)回输对结肠癌小鼠的治疗作用。方法:皮下注射CT26构建小鼠结肠癌模型,从3只模型小鼠肿瘤组织中提取TIL,并提取外周血淋巴细胞;对TIL进行PD-1基因敲除;回输实验分为对照组(Control)、输注淋巴细胞组(Lym)、输注荷瘤小鼠TIL组(TIL)、慢病毒空载对照组(pVSV-G-PX458-NC)组、PX458-PD-1-sgRNA1组(PD-1-sgRNA1),每组10只;测量各组小鼠肿瘤组织质量及肿瘤抑制率;TUNEL法检测各组小鼠肿瘤组织细胞凋亡;ELISA检测各组小鼠肿瘤组织TNF-α和IFN-γ含量;免疫组化检测肿瘤组织CD4+T、CD8+T细胞表达;免疫荧光法检测肿瘤组织细胞增殖核抗原-67(Ki-67)和血管内皮生长因子(VEGF)表达;Western blot检测肿瘤组织PD-1及其主要配体PD-L1表达。结果:PD-1-sgRNA1能明显抑制小鼠肿瘤细胞体内生长,抑制肿瘤组织Ki-67和VEGF表达及PD-1、PD-L1表达,提高肿瘤组织细胞凋亡率、TNF-α、IFN-γ含量、CD4+T、CD8+T细胞表达(均P<0.05)。结论:CRISPR/CAS9敲除PD-1的TIL回输能明显抑制结肠癌小鼠肿瘤组织Ki-67和VEGF表达,增加CD4+T、CD8+T细胞,诱导肿瘤细胞凋亡,发挥抑制肿瘤生长作用。 展开更多
关键词 CRISPR/Cas9 PD-1 结肠癌 肿瘤浸润淋巴细胞 肿瘤生长
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基于CCL2-CCR2信号轴探索松萝酸对胃癌细胞恶性行为的影响
2
作者 滕晓丽 时昭红 +4 位作者 孟庆彬 周晓黎 廖艳 万莹 杨健 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期1665-1670,共6页
目的:探讨松萝酸(UA)调节CC趋化因子配体2-CCL2受体(CCR2)信号轴对胃癌细胞恶性行为的影响。方法:以生长良好的人胃癌细胞系SGC-7901细胞为研究对象,通过不同浓度的UA处理,设为UA低浓度(UA-L)组(62.5μmol/L UA)、UA中浓度(UA-M)组(125... 目的:探讨松萝酸(UA)调节CC趋化因子配体2-CCL2受体(CCR2)信号轴对胃癌细胞恶性行为的影响。方法:以生长良好的人胃癌细胞系SGC-7901细胞为研究对象,通过不同浓度的UA处理,设为UA低浓度(UA-L)组(62.5μmol/L UA)、UA中浓度(UA-M)组(125μmol/L UA)、UA高浓度(UA-H)组(250μmol/L UA);同时对细胞转染CCL2过表达载体(pc DNA3.1 CCL2)、空载体(pc DNA3.1)、沉默CCL2(si CCL2)及阴性对照(si control),并采用250μmol/L UA处理SGC-7901细胞,标记为UA-H+pc DNA3.1 CCL2组、UA-H+pc DNA3.1组、UA-H+si CCL2组、UA-H+si control组,另取未处理的SGC-7901细胞作为对照组。流式细胞术、MTT及qRT-PCR检测细胞凋亡、增殖及CCL2、CCR2 mRNA表达水平;Western blot检测PD-L1、凋亡蛋白(Bax)、增殖蛋白(CyclinD1、CCL2、CCR2)、免疫逃逸相关蛋白(B7H1)表达水平;与体外分离培养的CD8+T细胞共培养后,ELISA检测上清液中IL-4、IFN-γ、IL-10水平。将各组细胞与活化的外周血单个核细胞(PBMC)1∶1共培养72 h,比较各组胃癌细胞对T细胞介导的杀伤敏感性。结果:与对照组相比,UA-L组、UA-M组、UA-H组细胞增殖率、IL-10水平、CyclinD1、PD-L1、CCL2、CCR2、B7H1蛋白及mRNA表达、与活化的PBMC 1∶1共培养72 h后的细胞计数显著降低,细胞凋亡率、IL-4、IFN-γ水平、Bax蛋白表达显著升高(P<0.05);与UA-H+pc DNA3.1组相比,UA-H+pc DNA3.1 CCL2组细胞增殖率、IL-10水平、CyclinD1、PDL1、CCL2、CCR2蛋白及mRNA表达、与活化的PBMC 1∶1共培养72 h后的细胞计数显著增加,细胞凋亡率、IL-4、IFN-γ水平、Bax蛋白表达显著降低(P<0.05);与UA-H+si control组相比,UA-H+si CCL2组细胞增殖率、IL-10水平、CyclinD1、PD-L1、CCL2、CCR2蛋白及mRNA表达、与活化的PBMC 1∶1共培养72 h后的细胞计数显著降低,细胞凋亡率、IL-4、IFN-γ水平、Bax蛋白表达显著升高(P<0.05)。结论:UA可抑制胃癌细胞增殖、免疫逃逸,诱导其凋亡,可能与抑制CCL2-CCR2信号轴有关。 展开更多
关键词 松萝酸 CCL2-CCR2信号轴 胃癌细胞 增殖 凋亡 免疫逃逸
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骨科患者器械相关压力性损伤预防及管理的最佳证据总结
3
作者 何子涵 晏蓉 +6 位作者 詹昱新 陈怿 德宗 皮蓉 刘方 汪艳 李素云 《护理学杂志》 CSCD 北大核心 2024年第20期41-45,共5页
目的总结骨科器械相关压力性损伤预防及管理的最佳证据,为临床护理实践提供参考。方法根据“6S”证据资源金字塔模型检索国内外相关网站和数据库中骨科器械相关压力性损伤预防管理的相关文献,检索时限为建库至2024年2月。完成质量评价... 目的总结骨科器械相关压力性损伤预防及管理的最佳证据,为临床护理实践提供参考。方法根据“6S”证据资源金字塔模型检索国内外相关网站和数据库中骨科器械相关压力性损伤预防管理的相关文献,检索时限为建库至2024年2月。完成质量评价后结合专业知识逐条总结相关证据。结果共纳入11篇文献,包括4篇指南、4篇专家共识、2篇系统评价、1篇证据总结。围绕皮肤、支撑面、活动、失禁/潮湿、营养、自我护理6个方面汇总39条最佳证据。结论总结的证据可用于预防骨科患者器械相关压力性损伤,医护人员需结合临床情境、患者意见,更好地应用和转化证据。 展开更多
关键词 骨科 压力性损伤 器械相关性压力性损伤 预防 管理 SSKINS集束化方案 证据总结
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艾灸关元穴缓解直肠下端黏膜环切术后患者排尿障碍 被引量：9
4
作者 舒玉珍 孟庆彬 +3 位作者 卢昕 赵菡洁 黄莉 王艳子 《护理学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第8期42-43,共2页
目的探讨艾灸关元穴对使用镇痛泵的混合痔直肠下端黏膜环切术术后患者排尿的影响。方法将200例混合痔直肠下端黏膜环切术患者随机分为两组,每组100例,对照组按照术后常规护理促进排尿,观察组实施艾灸关元穴促进排尿。结果干预后,两组术... 目的探讨艾灸关元穴对使用镇痛泵的混合痔直肠下端黏膜环切术术后患者排尿的影响。方法将200例混合痔直肠下端黏膜环切术患者随机分为两组,每组100例,对照组按照术后常规护理促进排尿,观察组实施艾灸关元穴促进排尿。结果干预后,两组术后首次排尿时间及排尿困难发生率比较,差异有统计学意义(均P<0.01)。结论艾灸关元穴可促进混合痔直肠下端黏膜环切术术后患者排尿,预防术后并发症,减轻患者痛苦。 展开更多
关键词 混合痔 直肠下端黏膜环切术 艾灸 关元穴 术后排尿 尿潴留
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重症脑卒中病人急性期两种肠内营养方式对比观察 被引量：14
5
作者 笱玉兰 吴彪 +2 位作者 罗利俊 胡明 陈国华 《肠外与肠内营养》 CAS 北大核心 2013年第6期353-355,共3页
目的：探讨鼻空肠置管和普通鼻胃管置管肠内营养（EN）对重症脑卒中急性期病人感染发生与控制、卒中预后的影响。方法：60例格拉斯哥昏迷量表（GCS）评分为4～7分的重症脑卒中病人，试验组给予内镜直视下鼻空肠置管，对照组放置普通鼻... 目的：探讨鼻空肠置管和普通鼻胃管置管肠内营养（EN）对重症脑卒中急性期病人感染发生与控制、卒中预后的影响。方法：60例格拉斯哥昏迷量表（GCS）评分为4～7分的重症脑卒中病人，试验组给予内镜直视下鼻空肠置管，对照组放置普通鼻胃管，并进行EN支持，对比观察两组病人肺部感染的发生和控制、美国国立卫生研究院脑卒中量表（NIHSS）评分及营养状况等指标的差异。结果：试验组病人在气管插管率、肺部感染发生率、抗生素使用频度明显低于对照组，入住ICU时间短于对照组，14d NIHSS评分低于对照组，但腹泻发生率高于对照组。结论：早期内镜下鼻空肠置管EN能减少重症脑卒中病人肺部感染的发生，减少抗生素的使用和缩短病人人住ICU的时间，腹泻是常见的不良反应。 展开更多
关键词 鼻空肠置管 重症脑卒中 肺部感染
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肠内营养联合聚乙二醇在结直肠肿瘤伴不全肠梗阻病人围手术期中的应用 被引量：6
6
作者 瞿紫微 张红芬 +2 位作者 李晓辉 吴彪 肖新波 《肠外与肠内营养》 CAS 北大核心 2014年第6期343-345,348,共4页
目的:探讨口服肠内营养(EN)联合聚乙二醇对伴有不全肠梗阻的结直肠肿瘤病人行围手术期准备的可行性及疗效。方法:对结直肠癌伴有不全梗阻的病人分为两组,研究组(n=72)病人术前口服整蛋白型EN和聚乙二醇进行围手术期准备;对照组(n=105)... 目的:探讨口服肠内营养(EN)联合聚乙二醇对伴有不全肠梗阻的结直肠肿瘤病人行围手术期准备的可行性及疗效。方法:对结直肠癌伴有不全梗阻的病人分为两组,研究组(n=72)病人术前口服整蛋白型EN和聚乙二醇进行围手术期准备;对照组(n=105)病人术前给予流质饮食和冲服番泻叶行常规术前准备。观察两组病人术前营养评分、术中肠道清洁度、术后肛门首次排气时间、术后吻合口瘘、感染并发症、免疫指标以及血浆内毒素水平等。结果:研究组病人营养评分、肠道清洁度均好于对照组(P<0.05)。对照组病人感染并发症的发生率明显高于研究组。研究组病人术后第7天的Ig G、Ig M和CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+水平较对照组高,术前1 d血浆内毒素含量低于对照组,两组比较均有显著性差异(P<0.05)。结论:整蛋白型EN制剂联合聚乙二醇在结直肠肿瘤伴不全肠梗阻病人围手术期中的应用,不仅术中肠道清洁度满意,而且还能改善病人术后营养和免疫功能,保护肠黏膜屏障,加速胃肠功能的恢复。 展开更多
关键词 肠内营养 肠梗阻 结肠癌 免疫营养
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混合痔患者术后的中医综合护理 被引量：20
7
作者 舒玉珍 张肖楠 +6 位作者 张丽娟 赵菡洁 黄泉云 钱程 杨琳 谢文 陈婷 《护理学杂志》 CSCD 北大核心 2022年第16期44-46,共3页
目的探讨中医综合护理干预应用于混合痔术后患者的康复效果。方法将152例混合痔患者随机分为两组各76例。对照组实施常规护理;观察组在此基础上实施辨证论治、疼痛管理、辨证施膳、情志调护等中医综合护理干预。结果观察组术后12 h、24 ... 目的探讨中医综合护理干预应用于混合痔术后患者的康复效果。方法将152例混合痔患者随机分为两组各76例。对照组实施常规护理;观察组在此基础上实施辨证论治、疼痛管理、辨证施膳、情志调护等中医综合护理干预。结果观察组术后12 h、24 h、72 h疼痛评分,术后首次排便时肛门疼痛评分及术后5 d、14 d创面水肿评分显著低于对照组,术后1 d、3 d焦虑评分显著低于对照组(均P<0.05)。结论混合痔术后患者实施中医综合护理干预,有利于降低并发症,缓解焦虑情绪,促进患者术后康复。 展开更多
关键词 混合痔 中医护理 快速康复 辨证论治 疼痛管理 辨证施膳 情志调护
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黄芩苷诱导小鼠结肠癌发生坏死性凋亡作用的体外研究 被引量：5
8
作者 杨爱霞 吴彪 +4 位作者 何伟 胡必成 黄鹤归 徐蕾 张力凡 《医药导报》 CAS 北大核心 2019年第2期167-172,共6页
目的探讨黄芩苷对小鼠结肠癌CT26.WT细胞的作用及细胞死亡形式。方法 CT26.WT细胞分为4组,(1)正常对照组,加入新鲜培养基,常规培养;(2)黄芩苷组,加入终浓度为100μmol·L-1黄芩苷;(3) z-VAD-fmk组,加入终浓度为20μmol·L-1z-VA... 目的探讨黄芩苷对小鼠结肠癌CT26.WT细胞的作用及细胞死亡形式。方法 CT26.WT细胞分为4组,(1)正常对照组,加入新鲜培养基,常规培养;(2)黄芩苷组,加入终浓度为100μmol·L-1黄芩苷;(3) z-VAD-fmk组,加入终浓度为20μmol·L-1z-VAD-fmk;(4)联合用药组,加入终浓度为20μmol·L-1z-VAD-fmk 1 h后加入100μmol·L-1黄芩苷。采用CCK8法检测黄芩苷对细胞增殖抑制作用和细胞存活率。DAPI染色检测细胞核的变化;透射电镜观察细胞超微结构; QPCR法和Western blotting法检测黄芩苷对细胞内RIP3基因和蛋白表达水平的影响。结果与正常对照组比较,黄芩苷组和联合用药组差异有统计学意义(P<0.05);正常对照组细胞死亡率为(10.54±0.19)%,黄芩苷组为(34.93±0.16)%,z-VAD组为(11.23±0.59)%,联合用药组为(23.27±1.20)%(P<0.01)。与正常对照组比较,黄芩苷组核浓染,出现碎裂现象;与黄芩苷组比较,联合用药组核浓染,有明显核碎裂现象。电镜结果显示黄芩苷组细胞发生坏死性凋亡,细胞肿胀,线粒体肿胀,内容物泄漏。黄芩苷组RIP3 mRNA的表达明显上调(P<0.01),RIP3蛋白的表达明显增强(P<0.05)。结论黄芩苷诱导CT26.WT细胞发生坏死性凋亡,可使RIP3的基因和蛋白表达明显上调。 展开更多
关键词 黄芩苷 结肠癌 Z-VAD-FMK RIP3蛋白 坏死性凋亡
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小干扰RNA抑制真核翻译起始因子5A2对MKN28胃癌细胞恶性生物学行为的影响 被引量：2
9
作者 孟庆彬 于健春 +5 位作者 康维明 马志强 周立 叶欣 曹战江 田树波 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期482-487,共6页
目的研究真核翻译起始因子5A2(EIF5A2)在胃癌细胞增殖及迁移侵袭调控中的作用及其可能机制。方法采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)及Western blot法检测EIF5A2在MKN28、HGC27细胞及正常胃黏膜上皮细胞(GES-1)内的表达,评估小干扰RNA(siRNA)... 目的研究真核翻译起始因子5A2(EIF5A2)在胃癌细胞增殖及迁移侵袭调控中的作用及其可能机制。方法采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)及Western blot法检测EIF5A2在MKN28、HGC27细胞及正常胃黏膜上皮细胞(GES-1)内的表达,评估小干扰RNA(siRNA)对EIF5A2的抑制效果。检测EIF5A2蛋白在2例人胃癌及匹配的非癌胃黏膜组织的表达。采用细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测细胞增殖,Transwell法检测细胞迁移及侵袭力,Western blot法检测CyclinD1、CyclinD3、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、E-cadherin、Vimintin、C-myc及转移相关蛋白1(MTA1)的表达水平。结果 EIF5A2在MKN28细胞及人胃癌组织内呈高表达。EIF5A2 siRNA#1可明显抑制MKN28细胞内EIF5A2 mRNA及蛋白的表达。抑制EIF5A2后可明显抑制MKN28细胞增殖(P均<0.01)、迁移(P<0.001)及侵袭能力(P<0.001)。抑制EIF5A2后,Vimentin表达下调,E-cadherin表达上调,CyclinD1、CyclinD3、MTA1及C-myc表达明显受抑制。结论siRNA下调EIF5A2可能通过抑制CyclinD1、CyclinD3抑制MKN28细胞增殖,并通过抑制MTA1、C-myc及上皮间质转化抑制MKN28细胞迁移及侵袭能力。 展开更多
关键词 真核翻译起始因子5A2 胃癌 小干扰RNA 增殖 转移
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结直肠癌手术患者基于预后营养指数评估的营养护理 被引量：25
10
作者 宁洁 舒玉珍 +5 位作者 林爱珍 陈笑吟 龚元祥 张丹凤 韩颖 孙光军 《护理学杂志》 CSCD 北大核心 2021年第23期93-95,共3页
目的探讨结直肠癌患者基于预后营养指数的分级营养干预效果。方法按照时间顺序,将64例结直肠癌患者设为对照组,实施常规营养干预;56例结直肠癌患者设为观察组,实施基于预后营养指数评估的分级营养支持干预。结果两组术后营养状态分布情... 目的探讨结直肠癌患者基于预后营养指数的分级营养干预效果。方法按照时间顺序,将64例结直肠癌患者设为对照组,实施常规营养干预;56例结直肠癌患者设为观察组,实施基于预后营养指数评估的分级营养支持干预。结果两组术后营养状态分布情况比较,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。观察组术后首次排气、排便、进食固体食物及肠鸣音恢复正常时间显著短于对照组,术后肺部感染和切口感染率显著低于对照组(P<0.05,P<0.01)。结论基于预后营养指数的营养干预可有效改善患者营养情况,降低术后并发症发生率,促进术后康复。 展开更多
关键词 结直肠癌 营养评估 预后营养指数 营养干预 术后康复
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