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槲皮素通过HMGB1/RAGE/NF-κB通路减轻癫痫大鼠神经炎症的实验研究 被引量:5
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作者 吴琼莹 高文勇 +2 位作者 艾艳萍 魏海棠 魏芬飞 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期1601-1606,共6页
目的:探讨槲皮素是否通过调控高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、糖基化终末产物受体(RAGE)、核转录因子κB(NF-κB)参与减轻癫痫大鼠神经炎症,探究HMGB1/RAGE/NF-κB通路作为槲皮素作用新靶点的可能性。方法:将60只SD大鼠随机选取12只作为健康... 目的:探讨槲皮素是否通过调控高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、糖基化终末产物受体(RAGE)、核转录因子κB(NF-κB)参与减轻癫痫大鼠神经炎症,探究HMGB1/RAGE/NF-κB通路作为槲皮素作用新靶点的可能性。方法:将60只SD大鼠随机选取12只作为健康组,剩余大鼠构建癫痫大鼠实验模型,将造模成功的大鼠分为模型组、槲皮素高剂量组、槲皮素低剂量组、槲皮素+通路激活剂组,每组12只。观察大鼠海马组织病理变化;评估大鼠的神经行为学功能;检测大鼠海马组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-6、IL-1β水平及HMGB1、RAGE、NF-κB mRNA及蛋白表达。结果:健康组大鼠海马组织结构完整;与健康组相比,模型组大鼠海马组织结构分散,存活神经元数显著降低,凋亡指数显著上升,Racine等级显著升高,海马组织TNF-α、IL-1β、IL-6含量及HMGB1、RAGE、NF-κB mRNA和蛋白表达量显著升高;与模型组相比,槲皮素低、高剂量组大鼠海马组织结构较为完整,存活神经元数显著上升,凋亡指数显著降低,Racine等级显著降低,TNF-α、IL-1β、IL-6含量及HMGB1、RAGE、NF-κB mRNA和蛋白表达量显著降低,且槲皮素高剂量组的改善效果更佳;与槲皮素高剂量组相比,槲皮素+通路激活剂组存活神经元数显著降低,凋亡指数显著上升,Racine等级显著升高,海马组织TNF-α、IL-1β、IL-6含量及HMGB1、RAGE、NF-κB mRNA和蛋白表达量显著升高。结论:槲皮素可通过抑制HMGB1/RAGE/NF-κB通路,降低相关基因mRNA和蛋白表达,从而有效减轻癫痫大鼠的神经炎症。 展开更多
关键词 槲皮素 癫痫 高迁移率族蛋白B1 糖基化终末产物受体 核转录因子ΚB
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杜鹃素调节cGAS-STING信号通路对LPS诱导的小胶质细胞炎症损伤的影响
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作者 吴琼莹 高文勇 +2 位作者 艾艳萍 魏海棠 陈芬 《中国免疫学杂志》 北大核心 2025年第5期1078-1083,共6页
目的:探讨杜鹃素(Far)调节环鸟苷酸-腺苷酸合成酶(cGAS)-干扰素基因刺激蛋白(STING)信号通路对LPS诱导的小胶质细胞炎症损伤的影响。方法:将小鼠BV2小胶质细胞株分为Control组(正常培养)、LPS组(1μg/ml)、Far低、中、高剂量组(1、5、10... 目的:探讨杜鹃素(Far)调节环鸟苷酸-腺苷酸合成酶(cGAS)-干扰素基因刺激蛋白(STING)信号通路对LPS诱导的小胶质细胞炎症损伤的影响。方法:将小鼠BV2小胶质细胞株分为Control组(正常培养)、LPS组(1μg/ml)、Far低、中、高剂量组(1、5、10μmol/L)、激活剂组(10μmol/L Far+75μg/ml cGAS-STING信号通路激活剂DMXAA);MTT、平板克隆实验与流式细胞术分别检测BV2细胞增殖和凋亡;qRT-PCR和ELISA检测细胞及上清中IL-6、IL-1β、TNF-α水平;硝酸还原酶法检测细胞上清中NO含量;Western blot检测BV2细胞中增殖细胞核抗原(PCNA)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、细胞抗凋亡因子B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)及cGAS-STING通路蛋白表达。结果:与Control组比较,LPS组BV2细胞A_(490)、克隆细胞数、PCNA、Bcl-2蛋白表达降低,凋亡率、IL-6、IL-1β、TNF-αmRNA表达、IL-6、IL-1β、TNF-α、NO含量及Bax、cGAS、STING蛋白表达升高(P<0.05);与LPS组比较,Far低、中、高剂量组BV2细胞A_(490)、克隆细胞数、PCNA、Bcl-2蛋白表达升高,凋亡率、IL-6、IL-1β、TNF-αmRNA表达、IL-6、IL-1β、TNF-α、NO含量及Bax、cGAS、STING蛋白表达降低(P<0.05);与Far高剂量组比较,激活剂组BV2细胞A_(490)、克隆细胞数、PCNA、Bcl-2蛋白表达降低,凋亡率、IL-6、IL-1β、TNF-αmRNA表达、IL-6、IL-1β、TNF-α、NO含量及Bax、cGAS、STING蛋白表达升高(P<0.05)。结论:Far可能通过抑制cGAS-STING通路抑制BV2细胞凋亡和炎症反应,促进其增殖,从而减轻LPS诱导的BV2细胞炎症损伤。 展开更多
关键词 杜鹃素 cGAS-STING LPS 小胶质细胞 炎症损伤
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环磷腺苷注射液对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用 被引量:5
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作者 李姣 王永华 +5 位作者 黄芳 姚汉玲 肖钦 高文勇 徐鹏展 吴琼莹 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2009年第21期3583-3585,共3页
目的:探讨不同浓度的环磷腺苷注射液对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用及其机制。方法:采用线栓法阻塞大鼠大脑中动脉,建立大鼠局灶性脑缺血实验模型,观察不同浓度环磷腺苷注射液(0.5mg/kg、1.0mg/kg、1.5mg/kg)对脑缺血再灌注损伤后大... 目的:探讨不同浓度的环磷腺苷注射液对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用及其机制。方法:采用线栓法阻塞大鼠大脑中动脉,建立大鼠局灶性脑缺血实验模型,观察不同浓度环磷腺苷注射液(0.5mg/kg、1.0mg/kg、1.5mg/kg)对脑缺血再灌注损伤后大鼠神经学评分、脑梗死体积的改变,并观察梗死组织细胞因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)水平。结果:假手术组无神经行为改变;各用药组神经学评分明显低于缺血再灌注对照组。各用药组脑梗死体积明显小于缺血再灌注对照组;TNF-α、IL-6水平也明显低于缺血再灌注对照组,而三种剂量组之间差异无显著性。结论:环磷腺苷注射液对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤有保护作用,其机制可能与抑制细胞因子TNF-α、IL-6的表达有关。 展开更多
关键词 脑缺血 再灌注损伤 环磷腺苷 大脑中动脉 梗死体积
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基于Cre-LoxP系统的新型慢病毒表达载体pLOX-CMV-E/P的构建与鉴定
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作者 高文勇 夏景波 +4 位作者 陈卓莹 吴彩红 王健欢 龙颖妍 齐绪峰 《暨南大学学报(自然科学与医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期160-167,共8页
目的:基于Cre-Lox P系统构建携带EGFP及Puromycin抗性基因,并带有巨细胞病毒(CMV)及翻译延伸因子1α(EF1α)双启动子的新型慢病毒表达载体,为基因治疗及基因功能研究提供有效的慢病毒载体系统.方法:以已经插入Lox P序列的p LOX-TERT-ire... 目的:基于Cre-Lox P系统构建携带EGFP及Puromycin抗性基因,并带有巨细胞病毒(CMV)及翻译延伸因子1α(EF1α)双启动子的新型慢病毒表达载体,为基因治疗及基因功能研究提供有效的慢病毒载体系统.方法:以已经插入Lox P序列的p LOX-TERT-ires TK慢病毒载体为模板,用Spe I与Kpn I进行双酶切,去除TERT-ires TK片段,然后与人工设计合成的多克隆位点片段连接,构建p LOX-MCS表达载体.同时,以p B513载体为模板扩增EF1α-EGFP-Puro表达框(带有Bam HI及Kpn I酶切位点),然后与经过Bam HI及Kpn I双酶切的p LOX-MCS载体连接,进而构建p LOX-CMV-EF1α-EGFP-Puro(简称p LOX-CMV-E/P)载体.将p LOX-CMV-E/P载体与慢病毒包装载体p CMVR8.74及p MD2.G共转染293T细胞,包装病毒进行报告基因的功能分析.结果:菌落聚合酶链式反应(PCR)、酶切鉴定及测序结果均与预期结果一致,绿色荧光蛋白及抗药性基因均有较好的活性与功能.结论:成功构建了p LOX-MCS及p LOX-CMV-E/P慢病毒表达载体,为基因治疗及基因功能研究提供有效的慢病毒表达系统. 展开更多
关键词 慢病毒表达载体 CRE-LOXP 系统 绿色荧光蛋白基因 嘌呤霉素抗性基因
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