期刊导航
期刊开放获取
上海教育软件发展有限公..
期刊文献
+
任意字段
题名或关键词
题名
关键词
文摘
作者
第一作者
机构
刊名
分类号
参考文献
作者简介
基金资助
栏目信息
任意字段
题名或关键词
题名
关键词
文摘
作者
第一作者
机构
刊名
分类号
参考文献
作者简介
基金资助
栏目信息
检索
高级检索
期刊导航
共找到
2
篇文章
<
1
>
每页显示
20
50
100
已选择
0
条
导出题录
引用分析
参考文献
引证文献
统计分析
检索结果
已选文献
显示方式：
文摘
详细
列表
相关度排序
被引量排序
时效性排序
APPβ分泌酶切割位点特异性单链抗体的制备和鉴定
被引量：
4
1
作者
黄巍
周丽荣
+3 位作者
周婷
孙红霞
黄晓刚
刘桥
《中国药理学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第3期337-342,共6页
目的制备针对人淀粉样蛋白前体(APP)β分泌酶切割位点的特异性单链抗体(ScFv),并进行鉴定。方法设计扩增单克隆抗体细胞株重链和轻链可变区基因片段VH和VL的引物,利用RT-PCR技术,从本室制备的抗人APPβ分泌酶切割位点单克隆抗体细胞株...
目的制备针对人淀粉样蛋白前体(APP)β分泌酶切割位点的特异性单链抗体(ScFv),并进行鉴定。方法设计扩增单克隆抗体细胞株重链和轻链可变区基因片段VH和VL的引物,利用RT-PCR技术,从本室制备的抗人APPβ分泌酶切割位点单克隆抗体细胞株中扩增出VH和VL基因片段,然后通过重叠引物延伸法(SOE)将VH和VL基因拼接成ScFv基因片段,再将其亚克隆入原核表达载体pET-28a中,转化E.coli BL21(DE3)诱导表达,目的蛋白经镍柱纯化和复性后,用SDS-PAGE、ELISA和Western blot等方法对其检测分析。结果成功从一株抗人APPβ位点单克隆抗体细胞株2H10中扩增出VH和VL并拼接成ScFv片段,片段长744 bp,编码248个氨基酸。PCR、酶切和测序表明表达载体构建成功,转化E.coli BL21(DE3),经IPTG诱导可以表达出约29 ku的目的蛋白,主要为包涵体形式,经镍柱纯化和复性后,获得纯度达90%以上的ScFv蛋白,ELISA和Western blot检测表明可溶性ScFv可以与人APPβ分泌酶切割位点序列短肽和全长APP结合。结论成功构建并表达人APPβ分泌酶切割位点的特异性单链抗体,为进一步研究其生物学活性奠定基础。
展开更多
关键词
人淀粉样前体蛋白
Β分泌酶
β分泌酶切割位点
单链抗体
阿尔采末病
Β淀粉样蛋白
在线阅读
下载PDF
职称材料
抗人APPβ水解位点单克隆抗体的制备及其初步鉴定
被引量：
3
2
作者
黄巍
庞蓓蓓
+3 位作者
周婷
熊波
周贝
刘桥
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第12期1235-1237,共3页
目的:制备能特异识别结合人APPβ水解位点的单克隆抗体(mAb)。方法:以APPβ水解位点短序列多抗原肽免疫BALB/c小鼠,取脾细胞和骨髓瘤细胞Sp2/0进行常规融合,通过间接ELISA和有限稀释法进行筛选和亚克隆,获得能分泌针对APPβ水解位点mAb...
目的:制备能特异识别结合人APPβ水解位点的单克隆抗体(mAb)。方法:以APPβ水解位点短序列多抗原肽免疫BALB/c小鼠,取脾细胞和骨髓瘤细胞Sp2/0进行常规融合,通过间接ELISA和有限稀释法进行筛选和亚克隆,获得能分泌针对APPβ水解位点mAb的杂交瘤,采用ELISA、Western blot等方法对其特异性进行检测。结果:获得2株稳定分泌抗人APPβ水解位点mAb的杂交瘤细胞株,分别命名为1A7和2H10,其Ig亚类分别为IgGl和lgG2b。Western blot显示2株抗体可以与全长APP结合。结论:成功制备了能特异识别结合APPβ水解位点的mAb,为进一步研究其对β位点封闭功能和构建小分子抗体奠定基础。
展开更多
关键词
APP
β位点
杂交瘤
单克隆抗体
阿尔茨海默病
在线阅读
下载PDF
职称材料
题名
APPβ分泌酶切割位点特异性单链抗体的制备和鉴定
被引量：
4
1
作者
黄巍
周丽荣
周婷
孙红霞
黄晓刚
刘桥
机构
武汉市医学科学研究所基础医学研究室
出处
《中国药理学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第3期337-342,共6页
基金
国家自然科学基金(No 30500085)
湖北省自然科学基金(No 2009CDB336)
武汉市卫生局科研基金(NoWX09B13)资助项目
文摘
目的制备针对人淀粉样蛋白前体(APP)β分泌酶切割位点的特异性单链抗体(ScFv),并进行鉴定。方法设计扩增单克隆抗体细胞株重链和轻链可变区基因片段VH和VL的引物,利用RT-PCR技术,从本室制备的抗人APPβ分泌酶切割位点单克隆抗体细胞株中扩增出VH和VL基因片段,然后通过重叠引物延伸法(SOE)将VH和VL基因拼接成ScFv基因片段,再将其亚克隆入原核表达载体pET-28a中,转化E.coli BL21(DE3)诱导表达,目的蛋白经镍柱纯化和复性后,用SDS-PAGE、ELISA和Western blot等方法对其检测分析。结果成功从一株抗人APPβ位点单克隆抗体细胞株2H10中扩增出VH和VL并拼接成ScFv片段,片段长744 bp,编码248个氨基酸。PCR、酶切和测序表明表达载体构建成功,转化E.coli BL21(DE3),经IPTG诱导可以表达出约29 ku的目的蛋白,主要为包涵体形式,经镍柱纯化和复性后,获得纯度达90%以上的ScFv蛋白,ELISA和Western blot检测表明可溶性ScFv可以与人APPβ分泌酶切割位点序列短肽和全长APP结合。结论成功构建并表达人APPβ分泌酶切割位点的特异性单链抗体,为进一步研究其生物学活性奠定基础。
关键词
人淀粉样前体蛋白
Β分泌酶
β分泌酶切割位点
单链抗体
阿尔采末病
Β淀粉样蛋白
Keywords
human amyloid precursor protein
BACE
β-secretase cleavage site
single-chain Fv（ScFv）
Alzheimer＇s disease
amyloid-beta peptide（Aβ）
分类号
R341 [医药卫生—基础医学]
R392.11 [医药卫生—免疫学]
在线阅读
下载PDF
职称材料
题名
抗人APPβ水解位点单克隆抗体的制备及其初步鉴定
被引量：
3
2
作者
黄巍
庞蓓蓓
周婷
熊波
周贝
刘桥
机构
武汉市医学科学研究所基础医学研究室
武汉市
疾病预防控制中心病毒科
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第12期1235-1237,共3页
基金
湖北省自然科学基金资助项目(2009CDB336)
武汉市卫生局科研项目(2007-2009年)
文摘
目的:制备能特异识别结合人APPβ水解位点的单克隆抗体(mAb)。方法:以APPβ水解位点短序列多抗原肽免疫BALB/c小鼠,取脾细胞和骨髓瘤细胞Sp2/0进行常规融合,通过间接ELISA和有限稀释法进行筛选和亚克隆,获得能分泌针对APPβ水解位点mAb的杂交瘤,采用ELISA、Western blot等方法对其特异性进行检测。结果:获得2株稳定分泌抗人APPβ水解位点mAb的杂交瘤细胞株,分别命名为1A7和2H10,其Ig亚类分别为IgGl和lgG2b。Western blot显示2株抗体可以与全长APP结合。结论:成功制备了能特异识别结合APPβ水解位点的mAb,为进一步研究其对β位点封闭功能和构建小分子抗体奠定基础。
关键词
APP
β位点
杂交瘤
单克隆抗体
阿尔茨海默病
分类号
Q813.2 [生物学—生物工程]
在线阅读
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
APPβ分泌酶切割位点特异性单链抗体的制备和鉴定
黄巍
周丽荣
周婷
孙红霞
黄晓刚
刘桥
《中国药理学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2012
4
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
抗人APPβ水解位点单克隆抗体的制备及其初步鉴定
黄巍
庞蓓蓓
周婷
熊波
周贝
刘桥
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2010
3
在线阅读
下载PDF
职称材料
已选择
0
条
导出题录
引用分析
参考文献
引证文献
统计分析
检索结果
已选文献
上一页
1
下一页
到第
页
确定
用户登录
登录
IP登录
使用帮助
返回顶部
