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高效液相色谱法测定抑制剂对肿瘤坏死因子-α转化酶的抑制作用
被引量：
1
1
作者
申玲玲
顾久玲
+1 位作者
黄巍
赵云斌
《华中科技大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第1期87-90,97,共5页
目的对高效液相色谱法(HPLC)测定抑制剂对肿瘤坏死因子-α转化酶(TACE)的抑制作用进行方法改进,以提高其准确度和普及性,并用于测定抑制剂GM6001及抑制剂A对TACE的抑制作用。方法TACE与多肽底物经37℃孵育15 min后,加入Ala-Dpa作为内标...
目的对高效液相色谱法(HPLC)测定抑制剂对肿瘤坏死因子-α转化酶(TACE)的抑制作用进行方法改进,以提高其准确度和普及性,并用于测定抑制剂GM6001及抑制剂A对TACE的抑制作用。方法TACE与多肽底物经37℃孵育15 min后,加入Ala-Dpa作为内标物,用高效液相色谱法进行分析。以55%甲醇水溶液为流动相,检测波长353 nm。根据剩余底物与内标物的色谱峰面积比,从校准曲线中得出底物的转化量,据此计算TACE的酶活性。结果底物与内标物的色谱峰面积比与底物浓度呈良好线性关系,相关系数为0.996 8,线性范围10μmol/L至400μmol/L。精密度试验表明,采用内标法定量,精密度得到显著改善。经测定,抑制剂GM6001及抑制剂A对TACE的半数抑制浓度IC50分别为317.5 nmol/L和175.8 nmol/L。结论以Ala-Dpa作内标物,HPLC测定TACE酶活性,为TACE抑制剂的筛选提供了一种更准确、更实用的方法。
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关键词
高效液相色谱法
内标法
肿瘤坏死因子-α转化酶
抑制作用
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职称材料
题名
高效液相色谱法测定抑制剂对肿瘤坏死因子-α转化酶的抑制作用
被引量：
1
1
作者
申玲玲
顾久玲
黄巍
赵云斌
机构
华中科技大学化学与化工学院应用化学系
武汉市医学科学研究所分子生物学实验室
出处
《华中科技大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第1期87-90,97,共5页
基金
湖北省自然科学基金资助项目(No.2006ABA094)
武汉市青年科技晨光计划资助项目(No.20055003059-18)
文摘
目的对高效液相色谱法(HPLC)测定抑制剂对肿瘤坏死因子-α转化酶(TACE)的抑制作用进行方法改进,以提高其准确度和普及性,并用于测定抑制剂GM6001及抑制剂A对TACE的抑制作用。方法TACE与多肽底物经37℃孵育15 min后,加入Ala-Dpa作为内标物,用高效液相色谱法进行分析。以55%甲醇水溶液为流动相,检测波长353 nm。根据剩余底物与内标物的色谱峰面积比,从校准曲线中得出底物的转化量,据此计算TACE的酶活性。结果底物与内标物的色谱峰面积比与底物浓度呈良好线性关系,相关系数为0.996 8,线性范围10μmol/L至400μmol/L。精密度试验表明,采用内标法定量,精密度得到显著改善。经测定,抑制剂GM6001及抑制剂A对TACE的半数抑制浓度IC50分别为317.5 nmol/L和175.8 nmol/L。结论以Ala-Dpa作内标物,HPLC测定TACE酶活性,为TACE抑制剂的筛选提供了一种更准确、更实用的方法。
关键词
高效液相色谱法
内标法
肿瘤坏死因子-α转化酶
抑制作用
Keywords
high performance liquid chromatography
internal standard method
tumor necrosis faetor-α converting en zyme
inhibitory effect
分类号
R977.3 [医药卫生—药品]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
高效液相色谱法测定抑制剂对肿瘤坏死因子-α转化酶的抑制作用
申玲玲
顾久玲
黄巍
赵云斌
《华中科技大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2010
1
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