武汉市蛋鸡养殖业存在的主要问题及对策解析

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作者 陶利文 李忠良 +1 位作者 吴建英 黄海军 《湖北畜牧兽医》 2013年第9期67-68,共2页

该文通过调查了解武汉市蛋鸡养殖业容易出现的问题,并从养殖成本、市场行情、政策导向、风险抵御等方面进行了剖析,提出了相应的解困对策。

关键词 蛋鸡养殖业 问题 对策

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鲤春病毒血症病毒焦磷酸测序检测技术的建立 被引量：4

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作者 刘瑶 尹伟力 +2 位作者 张四化 岳志芹 孙涛 《水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期449-455,共7页

通过收集鲤春病毒血症病毒基因序列,设计了鲤春病毒血症病毒最为保守的指纹序列,以及测序引物,建立了鲤春病毒血症病毒焦磷酸测序检测方法。对所构建的鲤春病毒血症病毒焦磷酸检测方法进行特异性试验和灵敏度检测,试验结果表明所建立的... 通过收集鲤春病毒血症病毒基因序列,设计了鲤春病毒血症病毒最为保守的指纹序列,以及测序引物,建立了鲤春病毒血症病毒焦磷酸测序检测方法。对所构建的鲤春病毒血症病毒焦磷酸检测方法进行特异性试验和灵敏度检测,试验结果表明所建立的方法特异性好,在8种鱼类病毒中能够特异性检测出目的病毒,检测方法灵敏度高,最低检出核酸量为10pg/μL。对建立的焦磷酸测序检测方法进行了实际应用研究,选取国内采集与进口的鱼类样本共计80批次进行鲤春病毒血症病毒检测。结果显示,焦磷酸测序检测方法可以有效的检出常规RT-PCR不能检出的假阴性样本和弱阳性样本,该方法的灵敏度和特异性可以满足水生动物疫病检测的需要。 展开更多

关键词 鲤春病毒血症病毒 焦磷酸测序 检测

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液相芯片技术同时检测对虾桃拉病毒和虾黄头病毒的研究 被引量：3

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作者 尹伟力 张四化 +2 位作者 岳志芹 郑小龙 刘荭 《水产科学》 CAS 北大核心 2014年第1期46-51,共6页

为建立一种同时检测对虾桃拉病毒、虾黄头病毒的液相芯片快速检测技术,用DNAStar软件对GenBank中对虾桃拉病毒的CP2基因和虾黄头病毒的N基因进行序列分析,设计对虾桃拉病毒、虾黄头病毒特异性引物并标记生物素。探针氨基化修饰,与荧光... 为建立一种同时检测对虾桃拉病毒、虾黄头病毒的液相芯片快速检测技术,用DNAStar软件对GenBank中对虾桃拉病毒的CP2基因和虾黄头病毒的N基因进行序列分析,设计对虾桃拉病毒、虾黄头病毒特异性引物并标记生物素。探针氨基化修饰,与荧光编码微球偶联后与对虾桃拉病毒、虾黄头病毒病毒RT-PCR产物杂交反应,用液相芯片仪器检测荧光信号。该检测体系对对虾桃拉病毒、虾黄头病毒病毒核酸检测灵敏度高,其最低检测限为100pg,且与白斑病毒、鲤春病毒血症病毒、传染性造血器官坏死病毒核酸等无交叉反应。该方法灵敏度及特异性高,为同时快速检测对虾桃拉病毒、虾黄头病毒提供了简捷快速的技术手段。 展开更多

关键词 对虾桃拉病毒 虾黄头病毒 液相芯片 检测

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病毒性出血性败血症病毒液相芯片检测技术的建立 被引量：3

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作者 尹伟力 梁君妮 +3 位作者 林超 张四化 岳志芹 刘荭 《中国动物检疫》 CAS 2015年第6期64-68,共5页

为建立检测病毒性出血性败血症病毒(VHSV)的液相芯片快速检测技术,用DNAStar软件对GenBank中VHSV的G基因进行序列分析,设计VHSV特异性引物并标记生物素。探针氨基化修饰并与荧光编码微球偶联后与VHSV RT-PCR产物杂交反应,用液相芯片仪... 为建立检测病毒性出血性败血症病毒(VHSV)的液相芯片快速检测技术,用DNAStar软件对GenBank中VHSV的G基因进行序列分析,设计VHSV特异性引物并标记生物素。探针氨基化修饰并与荧光编码微球偶联后与VHSV RT-PCR产物杂交反应,用液相芯片仪器检测荧光信号。结果表明液相芯片检测体系能够正确检出VHSV。病毒核酸的最低检出量为10pg,检测特异性高,说明初步建立了检测VHSV的液相芯片技术,为VHSV的检测提供了新方法。 展开更多

关键词 病毒性出血性败血症病毒(VHS) 液相芯片 检测

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病毒性出血性败血症病毒焦磷酸测序检测技术的建立 被引量：1

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作者 尹伟力 刘瑶 +3 位作者 黄微 张四化 岳志芹 孙涛 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第7期564-568,共5页

为建立病毒性出血性败血症病毒(VHSV)焦磷酸测序检测技术,本研究通过对VHSV靶基因特异性序列的同源性分析,设计出适合焦磷酸测序特异性扩增和测序的引物,对焦磷酸测序反应体系和反应程序进行优化,建立了VHSV焦磷酸测序检测方法。结果表... 为建立病毒性出血性败血症病毒(VHSV)焦磷酸测序检测技术,本研究通过对VHSV靶基因特异性序列的同源性分析,设计出适合焦磷酸测序特异性扩增和测序的引物,对焦磷酸测序反应体系和反应程序进行优化,建立了VHSV焦磷酸测序检测方法。结果表明,该方法仅对目的病毒基因扩增,而对其它病毒检测为阴性,表明该方法特异性好;该方法最低检出核酸量为82拷贝/μL,灵敏度高。选取国内采集与进口的鱼类样本共计1924批次进行VHSV检测,结果显示,焦磷酸测序检测方法检测结果与常规RT-PCR一致,该方法的特异性和灵敏度可以满足水生动物疫病检测的需要。 展开更多

关键词 病毒性出血性败血症病毒 焦磷酸测序 检测

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稳定转染CD151或CD163的Marc145细胞系的建立及其在PRRS疫苗生产中的应用 被引量：1

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作者 阮征 刘开武 +6 位作者 吴建英 华娟 夏瑜 王莲芳 胡小明 刘杰 黄海军 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2015年第6期93-96,I0006,共5页

为了进一步探讨提高PRRSV感染靶细胞滴度的有效方法,本研究采用脂质体介导方法,通过G418筛选稳定转染Marc145细胞,并利用单个细胞克隆技术,获得了稳定超表达CD151蛋白和(或)CD163蛋白的Marc145细胞株,经免疫荧光化学和Western Blot鉴定... 为了进一步探讨提高PRRSV感染靶细胞滴度的有效方法,本研究采用脂质体介导方法,通过G418筛选稳定转染Marc145细胞,并利用单个细胞克隆技术,获得了稳定超表达CD151蛋白和(或)CD163蛋白的Marc145细胞株,经免疫荧光化学和Western Blot鉴定证实,成功表达出基因重组猪CD151蛋白和CD163蛋白。在GMP生产车间将超表达CD151、CD163蛋白或CD151/CD163蛋白共表达的Marc145细胞感染PRRSV,使病毒感染滴度提高了10倍以上。将上述收获的病毒液制备了灭活苗,疫苗效力超过部颁标准。 展开更多

关键词 猪繁殖与呼吸综合征 CD151分子 CD163分子 真核表达 疫苗生产

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新生猪骨髓间充质干细胞衍生细胞的分离、培养及生物学特性分析 被引量：2

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作者 阮征 王莲芳 +8 位作者 胡修忠 吴建英 张四化 代长云 华娟 夏瑜 胡小明 李杰 黄海军 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期170-176,共7页

利用骨髓间充质干细胞(Bone mesenchymal stem cells,BMSCs)治疗疾病已经逐渐成为现实,但是作为被移植的种子细胞,BMSCs体外传代能力非常有限,种子细胞来源极为贫乏。本研究通过差速贴壁筛选的方法分离出一种猪BMSCs的衍生细胞株,命名... 利用骨髓间充质干细胞(Bone mesenchymal stem cells,BMSCs)治疗疾病已经逐渐成为现实,但是作为被移植的种子细胞,BMSCs体外传代能力非常有限,种子细胞来源极为贫乏。本研究通过差速贴壁筛选的方法分离出一种猪BMSCs的衍生细胞株,命名为猪骨髓间充质干细胞衍生细胞(Bone mesenchymal stem-derived cells,BMSDCs)。分别对BMSDCs与BMSCs细胞进行细胞生物学特性分析,探讨其体外诱导分化特性,并应用流式细胞术测定细胞表面标记物。结果表明,BMSC和BMSDCs细胞倍增时间分别为31.3 h和30.3 h,平均传代时间分别为3-5 d和2-3 d;两种细胞均阳性表达CD34、CD90,阴性表达CD44、CD45;经体外诱导后均可分化为成脂细胞和成肌细胞。在传代能力上,前者可传代15至20次,后者可长期传代(200次以上)且维持正常染色体特征。研究认为在适宜的实验条件下,体外培养的猪骨髓间充质干细胞的衍生细胞——BMSDCs能够稳定生存增殖并维持BMSCs多向分化潜能,可作为组织工程的理想种子细胞。 展开更多

关键词 骨髓间充质干细胞 衍生细胞 猪 生物学特性 组织工程

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矿物质缺乏对家禽生理功能的影响 被引量：5

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作者 刘开武 戴红安 邢建成 《湖北畜牧兽医》 2008年第1期14-15,共2页

家禽所需的钙质约99％用于构成骨骼和蛋壳。其余分布于细胞和体液中，对维持神经、肌肉、心脏的正常生理功能及体内酸碱平衡，促进伤口血液凝固等具有重要作用。

关键词 生理功能 矿物质缺乏 家禽 体内酸碱平衡 血液凝固 蛋壳 伤口

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PRRS病毒主要受体蛋白CD151和CD163真核表达载体的构建

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作者 阮征 李杰 +5 位作者 刘开武 王莲芳 华娟 胡小明 刘杰 黄海军 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期190-194,共5页

为了进一步研究PRRSV与细胞受体之间的相互作用机理,通过基因工程方法从PAM细胞中克隆获得了CD151和CD163全长编码片段,利用Sal I和Kpn I内切酶对回收得到的CD151(762 bp)和CD163(3 333 bp)DNA片段进行酶切,构建了p IRES2-EGFP-CD151和p... 为了进一步研究PRRSV与细胞受体之间的相互作用机理,通过基因工程方法从PAM细胞中克隆获得了CD151和CD163全长编码片段,利用Sal I和Kpn I内切酶对回收得到的CD151(762 bp)和CD163(3 333 bp)DNA片段进行酶切,构建了p IRES2-EGFP-CD151和p IRES2-EGFP-CD163真核表达载体。经PCR和酶切鉴定后,分别提取重组质粒进行细胞转染。荧光显微镜下可见单独转染CD151和CD163基因或CD151/CD163共转染的Marc 145细胞表达强烈的绿色荧光,Western blot分析结果进一步证实,CD151和CD163蛋白在转染后的细胞中获得超表达。猪CD151和CD163真核表达载体的成功构建为进一步探索CD151和CD163在PRRSV感染细胞过程中的协同作用提供了物质基础,特别是对深入研究PRRS病毒的入侵及宿主识别具有重要意义。 展开更多

关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 CD151分子 CD163分子 真核表达载体 细胞转染

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初生仔猪固定乳头有讲究

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作者 刘开武 邢建成 吴桂香 《湖北畜牧兽医》 2008年第6期15-15,共1页

母猪是养猪生产的基础，提高母猪生产能力是提高养猪生产效益的前提，母猪的生产能力主要由年产仔窝数与窝断奶仔猪头数两部分决定，其中年产仔窝数是由母猪繁殖周期的长短决定的，窝断奶仔数是由窝产活仔数和断奶成活率决定的，而做好... 母猪是养猪生产的基础，提高母猪生产能力是提高养猪生产效益的前提，母猪的生产能力主要由年产仔窝数与窝断奶仔猪头数两部分决定，其中年产仔窝数是由母猪繁殖周期的长短决定的，窝断奶仔数是由窝产活仔数和断奶成活率决定的，而做好初生仔猪固定乳头工作是保证断奶成活率的关键。在养猪生产实践中，给初生仔猪固定乳头则需要综合考虑母猪的泌乳特点、仔猪的吃乳习性和仔猪的用途等因素。 展开更多

关键词 初生仔猪 乳头 断奶成活率 年产仔窝数 养猪生产 生产能力 窝产活仔数 生产效益

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奶牛结核病和布鲁氏菌病的防制 被引量：1

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作者 张四化 倪杨帆 +4 位作者 刘心建 刘开武 李东 万云 阮征 《养殖与饲料》 2014年第10期48-51,共4页

奶牛结核病和布鲁氏菌病(以下简称"两病")是严重危害人类健康和畜牧业生产发展的人畜共患病,是近年来人感染"两病"的重要来源之一。虽然国家出台了有关政策要求规范控制奶牛"两病",但是防制效果不理想,... 奶牛结核病和布鲁氏菌病(以下简称"两病")是严重危害人类健康和畜牧业生产发展的人畜共患病,是近年来人感染"两病"的重要来源之一。虽然国家出台了有关政策要求规范控制奶牛"两病",但是防制效果不理想,近些年"两病"又有抬头蔓延之势。笔者结合工作实践,简要分析了奶牛"两病"难以控制的原因,提出了一些对策,以期早日实现奶牛"两病"的净化,确保奶牛健康养殖,不出现因"两病"引起的公共卫生安全事件。 展开更多

关键词 奶牛 奶牛结核病 布鲁氏菌病 防制 对策

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副猪嗜血杆菌反应调节因子CpxR自杀性质粒的构建

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作者 付书林 陈夏冰 +8 位作者 何斌 邵志勇 杨文海 刘武 金尔光 童伟文 陶弼菲 张四化 陈洁 《湖北农业科学》 2015年第19期4787-4789,共3页

以副猪嗜血杆菌双组分信号转导系统CpxA/R中反应调节因子CpxR为研究对象,成功构建自杀性质粒ΔpEM-CpxR,这就为构建副猪嗜血杆菌CpxR突变株以及探究CpxA/CpxR双组分信号转导系统调控副猪嗜血杆菌分子致病机制提供了基础。

关键词 副猪嗜血杆菌 反应调节因子 CpxR 自杀性质粒

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母猪与仔猪PRRS免疫程序的观察与分析

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作者 陈橙 刘心建 +9 位作者 吕景福 杜德利 方向东 张凯旋 陶利文 杨永平 李东 代长云 魏耀荣 徐建武 《上海畜牧兽医通讯》 2015年第2期36-37,共2页

试验旨在观察南堰猪场母猪与仔猪的PRRS免疫程序。选取15日龄乳猪、25～79日龄保育猪、产后15d及产后25d的母猪,采用猪蓝耳病毒ELISA抗体检测法,检测其母源抗体与免疫抗体水平,其中25日龄仔猪的PRRS母源抗体合格率仅41.3%,而接种高致病... 试验旨在观察南堰猪场母猪与仔猪的PRRS免疫程序。选取15日龄乳猪、25～79日龄保育猪、产后15d及产后25d的母猪,采用猪蓝耳病毒ELISA抗体检测法,检测其母源抗体与免疫抗体水平,其中25日龄仔猪的PRRS母源抗体合格率仅41.3%,而接种高致病性猪繁殖与呼吸综合征活疫苗后14d具有可靠保护力。因此,该场仔猪的PRRS免疫程序需要调整,免疫接种时间可提前到15日龄。产后25d的断奶母猪即免疫高致病性猪繁殖与呼吸综合征活疫苗后146d免疫抗体合格率为100%,说明所选用的高致病性猪繁殖与呼吸综合征活疫苗免疫保护期达5个月。因此,采用母猪断奶时接种该疫苗的跟胎免疫法切实可行。 展开更多

关键词 母猪 仔猪 PRRS 免疫程序 观察

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