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circ-RACGAP1在膀胱癌组织中的表达及对膀胱癌细胞增殖、迁移和侵袭的作用机制
被引量：
2
1
作者
胡志
付桥
+3 位作者
徐律
张炜
盖强强
孙伟
《安徽医科大学学报》
CAS
北大核心
2023年第11期1878-1884,共7页
目的分析circ-RACGAP1在膀胱癌组织中的表达与临床意义,探究circ-RACGAP1对膀胱癌细胞恶性生物学行为的影响及作用机制。方法通过TCGA数据库探究circ-RACGAP1在膀胱癌组织中的表达,分析circ-RACGAP1表达与膀胱癌患者临床病理特征的关系...
目的分析circ-RACGAP1在膀胱癌组织中的表达与临床意义,探究circ-RACGAP1对膀胱癌细胞恶性生物学行为的影响及作用机制。方法通过TCGA数据库探究circ-RACGAP1在膀胱癌组织中的表达,分析circ-RACGAP1表达与膀胱癌患者临床病理特征的关系。通过实时荧光定量聚合酶链式反应(qPCR)法分析细胞系5637、T24、J82、RT-4、UM-UC-3中circ-RACGAP1表达。通过脂质体转染技术将circ-RACGAP1敲降质粒转染T24细胞。克隆形成实验、划痕实验和Transwell实验分别分析敲降circ-RACGAP1对T24细胞增殖、迁移和侵袭的影响。采用deepBase、Circbank、CircInteractome、circRNABase数据库和荧光报告系统验证circ-RACGAP1和miR-4324之间的靶向结合。qPCR检测敲降circ-RACGAP1对T24细胞中miR-4324表达的影响。采用Western blot法检测敲降circ-RACGAP1对T24细胞中Rac-GTP酶激活蛋白1(RACGAP1)蛋白和磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)信号通路蛋白表达的影响。结果膀胱癌组织中circ-RACGAP1呈高表达(P<0.01),其表达随着患者临床分期恶性程度增高而升高(P<0.01)。膀胱癌细胞系中circ-RACGAP1表达明显高于人正常膀胱上皮细胞(均P<0.01)。与对照组比较,sh-sh-circ-RACGAP1组T24细胞增殖、迁移和侵袭能力均明显降低(均P<0.01)。circ-RACGAP1可靶向抑制miR-4324的表达(P<0.01)。与对照组比较,sh-circ-RACGAP1组T24细胞中RACGAP1蛋白表达水平降低(P<0.01),PI3K/AKT信号通路蛋白磷酸化磷脂酰肌醇-3-激酶(p-PI3K)、磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)、核因子κB(NF-κB)表达水平均降低(均P<0.01)。结论膀胱癌组织和细胞系中circ-RACGAP1呈高表达,敲降circ-RACGAP1能够抑制T24细胞的恶性生物学行为,circ-RACGAP1是通过抑制miR-4324表达激活PI3K/AKT信号通路来发挥作用。
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关键词
膀胱癌
环状RNA
circ-RACGAP1
miR-4324
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职称材料
1, 25-二羟基维生素D_(3)通过下调葡萄糖转运蛋白-1表达抑制膀胱癌细胞增殖
被引量：
1
2
作者
周舰
张朝阳
+3 位作者
程耿
杨军
张景宇
戚晓红
《重庆医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第6期693-699,共7页
目的:研究1,25-二羟基维生素D_(3)(1,25-(OH)_(2)-VitD_(3))对膀胱癌细胞增殖的影响,并探讨其作用机制。方法:体外培养膀胱癌细胞T24,MTT法检测不同浓度1,25-(OH)_(2)-VitD_(3)对细胞活力的影响,并筛选1,25-(OH)_(2)-VitD_(3)干预细胞...
目的:研究1,25-二羟基维生素D_(3)(1,25-(OH)_(2)-VitD_(3))对膀胱癌细胞增殖的影响,并探讨其作用机制。方法:体外培养膀胱癌细胞T24,MTT法检测不同浓度1,25-(OH)_(2)-VitD_(3)对细胞活力的影响,并筛选1,25-(OH)_(2)-VitD_(3)干预细胞的最佳时间及半数抑制浓度。将细胞分为4组:对照组、葡萄糖转运蛋白-1(glucose transporter-1,GLUT1)抑制组、1,25-(OH)_(2)-VitD_(3)组、1,25-(OH)_(2)-VitD_(3)+GLUT1抑制组。采用Hoechst 33258染色观察各组细胞形态变化;试剂盒检测细胞内葡萄糖摄取、三磷酸腺苷(adenosine triphosphate,ATP)产生及乳酸形成水平;Real-time PCR及Western blot检测GLUT1、己糖激酶2(hexokinase 2,HK2)、6-磷酸果糖-2-激酶/果糖-2,6-二磷酸酶3(6-phosphofructo-2-kinase/fructose-2,6-biphosphatase 3,PFKFP3)、丙酮酸激酶同工酶2(pyruvate kinase isozyme type M2,PKM2)、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase A,LDHA)和低氧诱导因子1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)mRNA和蛋白表达水平。结果:1,25-(OH)_(2)-VitD_(3)可降低T24细胞增殖能力,且呈剂量依赖性。1,25-(OH)_(2)-VitD_(3)组、GLUT1抑制组及1,25-(OH)_(2)-VitD_(3)+GLUT1抑制组细胞凋亡水平高于对照组,而GLUT1、HK2、PFKFP3、PKM2、LDHA和HIF-1αmRNA及蛋白表达水平明显低于对照组。与GLUT1抑制组比较,1,25-(OH)_(2)-VitD_(3)+GLUT1抑制组GLUT1、HK2、PFKFP3、PKM2、LDHA和HIF-1αmRNA(均P=0.000)和蛋白(均P=0.000)表达水平明显降低。结论:1,25-(OH)_(2)-VitD_(3)可抑制膀胱癌细胞增殖,诱导细胞凋亡,其作用机制可能与下调GLUT1表达抑制细胞糖酵解过程有关。
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关键词
1
25-二羟基维生素D_(3)
膀胱癌
葡萄糖转运蛋白-1
糖酵解
增殖
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职称材料
题名
circ-RACGAP1在膀胱癌组织中的表达及对膀胱癌细胞增殖、迁移和侵袭的作用机制
被引量：
2
1
作者
胡志
付桥
徐律
张炜
盖强强
孙伟
机构
武汉
市第三
医院
(
武汉大学
附属
同仁医院
)
泌
尿
外科
华中科技
大学
附属
同济
医院
泌
尿
外科
出处
《安徽医科大学学报》
CAS
北大核心
2023年第11期1878-1884,共7页
基金
国家自然科学基金(编号:82103284)
中国博士后科学基金面上项目(编号:2019M662640)。
文摘
目的分析circ-RACGAP1在膀胱癌组织中的表达与临床意义,探究circ-RACGAP1对膀胱癌细胞恶性生物学行为的影响及作用机制。方法通过TCGA数据库探究circ-RACGAP1在膀胱癌组织中的表达,分析circ-RACGAP1表达与膀胱癌患者临床病理特征的关系。通过实时荧光定量聚合酶链式反应(qPCR)法分析细胞系5637、T24、J82、RT-4、UM-UC-3中circ-RACGAP1表达。通过脂质体转染技术将circ-RACGAP1敲降质粒转染T24细胞。克隆形成实验、划痕实验和Transwell实验分别分析敲降circ-RACGAP1对T24细胞增殖、迁移和侵袭的影响。采用deepBase、Circbank、CircInteractome、circRNABase数据库和荧光报告系统验证circ-RACGAP1和miR-4324之间的靶向结合。qPCR检测敲降circ-RACGAP1对T24细胞中miR-4324表达的影响。采用Western blot法检测敲降circ-RACGAP1对T24细胞中Rac-GTP酶激活蛋白1(RACGAP1)蛋白和磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)信号通路蛋白表达的影响。结果膀胱癌组织中circ-RACGAP1呈高表达(P<0.01),其表达随着患者临床分期恶性程度增高而升高(P<0.01)。膀胱癌细胞系中circ-RACGAP1表达明显高于人正常膀胱上皮细胞(均P<0.01)。与对照组比较,sh-sh-circ-RACGAP1组T24细胞增殖、迁移和侵袭能力均明显降低(均P<0.01)。circ-RACGAP1可靶向抑制miR-4324的表达(P<0.01)。与对照组比较,sh-circ-RACGAP1组T24细胞中RACGAP1蛋白表达水平降低(P<0.01),PI3K/AKT信号通路蛋白磷酸化磷脂酰肌醇-3-激酶(p-PI3K)、磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)、核因子κB(NF-κB)表达水平均降低(均P<0.01)。结论膀胱癌组织和细胞系中circ-RACGAP1呈高表达,敲降circ-RACGAP1能够抑制T24细胞的恶性生物学行为,circ-RACGAP1是通过抑制miR-4324表达激活PI3K/AKT信号通路来发挥作用。
关键词
膀胱癌
环状RNA
circ-RACGAP1
miR-4324
Keywords
bladder cancer
circular RNA
circ-RACGAP1
miR-4324
分类号
R737.14 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
1, 25-二羟基维生素D_(3)通过下调葡萄糖转运蛋白-1表达抑制膀胱癌细胞增殖
被引量：
1
2
作者
周舰
张朝阳
程耿
杨军
张景宇
戚晓红
机构
武汉大学附属同仁医院泌尿外科
出处
《重庆医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第6期693-699,共7页
文摘
目的:研究1,25-二羟基维生素D_(3)(1,25-(OH)_(2)-VitD_(3))对膀胱癌细胞增殖的影响,并探讨其作用机制。方法:体外培养膀胱癌细胞T24,MTT法检测不同浓度1,25-(OH)_(2)-VitD_(3)对细胞活力的影响,并筛选1,25-(OH)_(2)-VitD_(3)干预细胞的最佳时间及半数抑制浓度。将细胞分为4组:对照组、葡萄糖转运蛋白-1(glucose transporter-1,GLUT1)抑制组、1,25-(OH)_(2)-VitD_(3)组、1,25-(OH)_(2)-VitD_(3)+GLUT1抑制组。采用Hoechst 33258染色观察各组细胞形态变化;试剂盒检测细胞内葡萄糖摄取、三磷酸腺苷(adenosine triphosphate,ATP)产生及乳酸形成水平;Real-time PCR及Western blot检测GLUT1、己糖激酶2(hexokinase 2,HK2)、6-磷酸果糖-2-激酶/果糖-2,6-二磷酸酶3(6-phosphofructo-2-kinase/fructose-2,6-biphosphatase 3,PFKFP3)、丙酮酸激酶同工酶2(pyruvate kinase isozyme type M2,PKM2)、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase A,LDHA)和低氧诱导因子1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)mRNA和蛋白表达水平。结果:1,25-(OH)_(2)-VitD_(3)可降低T24细胞增殖能力,且呈剂量依赖性。1,25-(OH)_(2)-VitD_(3)组、GLUT1抑制组及1,25-(OH)_(2)-VitD_(3)+GLUT1抑制组细胞凋亡水平高于对照组,而GLUT1、HK2、PFKFP3、PKM2、LDHA和HIF-1αmRNA及蛋白表达水平明显低于对照组。与GLUT1抑制组比较,1,25-(OH)_(2)-VitD_(3)+GLUT1抑制组GLUT1、HK2、PFKFP3、PKM2、LDHA和HIF-1αmRNA(均P=0.000)和蛋白(均P=0.000)表达水平明显降低。结论:1,25-(OH)_(2)-VitD_(3)可抑制膀胱癌细胞增殖,诱导细胞凋亡,其作用机制可能与下调GLUT1表达抑制细胞糖酵解过程有关。
关键词
1
25-二羟基维生素D_(3)
膀胱癌
葡萄糖转运蛋白-1
糖酵解
增殖
Keywords
1,25-(OH)_(2)-VitD_(3)
bladder cancer
glucose transporter-1
glucolusis
proliferation
分类号
R737.14 [医药卫生—肿瘤]
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题名
作者
出处
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被引量
操作
1
circ-RACGAP1在膀胱癌组织中的表达及对膀胱癌细胞增殖、迁移和侵袭的作用机制
胡志
付桥
徐律
张炜
盖强强
孙伟
《安徽医科大学学报》
CAS
北大核心
2023
2
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职称材料
2
1, 25-二羟基维生素D_(3)通过下调葡萄糖转运蛋白-1表达抑制膀胱癌细胞增殖
周舰
张朝阳
程耿
杨军
张景宇
戚晓红
《重庆医科大学学报》
CAS
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北大核心
2022
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