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题名水稻花粉总蛋白质双向凝胶电泳方法建立及应用
被引量：6
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作者
文李
刘盖
李绍清
李国民
陶钧
朱英国
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机构
长沙理工大学生物与食品工程学院
武汉大学教育部发育生物学重点实验室
武汉大学教育部发育生物学重点实验室
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出处
《中国水稻科学》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第1期13-19,共7页
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基金
国家重点基础研究(973)项目(2001CB108806)
中国高校博士点专项研究基金资助项目(20020486037)。
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文摘
采用石英砂加液氮研磨方法破碎花粉，然后用两种不同的方法提取水稻花粉总蛋白质，之后采用固相pH梯度等电聚焦／SDS-PAGE双向凝胶电泳对红莲型细胞质雄性不育水稻单核期花粉总蛋白质进行了分离。通过银染显色，PDOuest2DE软件可识别约1000-1500个蛋白质点。其中TCA-丙酮提取法更适合提取花粉总蛋白质进行双向凝胶电泳分离，并可获得分辨率和重复性较好的双向电泳图谱。对红莲型细胞质雄性不育水稻的不育系单核期和二核期花粉总蛋白进行了双向电泳分离，通过比较两个时期花粉蛋白质电泳图谱后发现，二核期的花粉蛋白质较单核期花粉蛋白质数目减少，并且部分蛋白质表达量下降。
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关键词
花粉
水稻
双向凝胶电泳
细胞质雄性不育性
蛋白组学
研究方法
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Keywords
pollen
rice
two-dimensional gel electrophoresis
cytoplasmic male sterility
proteomics
methodology
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分类号
S511
[农业科学—作物学]
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题名水稻中期染色体和DNA纤维的高效制备技术
被引量：5
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作者
彭莉莉
赵丽娟
宋运淳
李立家
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机构
武汉大学教育部植物发育生物学重点实验室
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出处
《武汉植物学研究》
CSCD
2004年第4期364-367,共4页
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基金
国家自然科学基金资助项目(30270678
30270740)。
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文摘
水稻中期染色体和DNA纤维制备是水稻分子细胞遗传学研究中的关键技术。目前,这两个技术还有很多不足,该研究建立了高效制备水稻中期染色体和DNA纤维的方法。该方法制备的染色体,分裂相多、杂质少、背景清晰、染色体分散且形态好,水稻根尖分生组织细胞的分裂指数高达25%。植物细胞的细胞壁是制备DNA纤维的最大障碍,所以必须先提取细胞核,然后裂解细胞核释放出DNA纤维。在这个研究中,还建立了一个用刀切法分离细胞核,进而用SDS裂解核膜,用载玻片拖出DNA来制备水稻DNA纤维的方法。该方法制备的DNA纤维多呈平行的细线,背景清晰,伸展的程度均匀,适合于原位杂交。
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关键词
水稻
中期染色体
DNA纤维
高效制备
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Keywords
Rice
Metaphase chromosomes
DNA fibres
High efficiency
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分类号
S511
[农业科学—作物学]
Q813.4
[生物学—生物工程]
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题名RTSV和Glh在药用野生稻中的物理定位
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作者
黄思罗
覃瑞
傅彬英
金危危
何光存
宋运淳
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机构
武汉大学教育部植物发育生物学重点实验室
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出处
《武汉植物学研究》
CSCD
2001年第5期353-356,T001,共5页
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基金
国家自然科学基金 (批准号 :39870 4 2 3)
高等学校博士学科点专项研究基金 (批准号 :2 0 7980 1 1 2 )资助项目
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文摘
药用野生稻具有多种抗病虫性 ,是水稻品种改良重要的种质资源之一。本研究采用与栽培稻遗传图第 4连锁群中与 RTSV和 Glh紧密连锁的 RFLP标记 RZ2 6 2及其筛选出来的 BAC克隆作探针 ,对药用野生稻进行荧光原位杂交 ,供试探针均被定位于药用野生稻第 4染色体短臂的中部 ,百分距分别为 74.86± 3 .72和 73 .98± 4.44,信号检出率为 7.6 %和45 .1 %。 BAC克隆和 RFL P标记探针杂交位置几乎一致 ,说明在栽培稻和野生稻中 RFLP标记 RZ2 6 2都存在同一 BAC克隆的大插入片段中 ,药用野生稻与抗性基因 RTSV和 Glh的同源顺序就在第 4染色体信号出现的相应位置 ,从而为作物育种开发和利用野生资源的抗性基因提供了理论依据。
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关键词
药用野生稻
BAC-FISH
比较物理定位
RTSV
Glh
抗性基因
栽培稻
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Keywords
Oryza officinalis
BAC-FISH
Comparative physical map
RTSV
Glh
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分类号
Q943
[生物学—植物学]
S511.03
[农业科学—作物学]
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