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p300/CBP相关因子对大鼠血管平滑肌细胞迁移的影响及机制研究 被引量：1
1
作者 邱立强 夏豪 +1 位作者 江洪 徐昌武 《中华老年心脑血管病杂志》 CAS 北大核心 2020年第1期75-78,共4页
目的探讨p300/CBP相关因子(PCAF)对大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)迁移的作用及机制。方法组织块贴壁法获取大鼠原代VSMC,使用Ad-PCAF RNAi腺病毒转染VSMC以下调PCAF表达。选择1μg/ml的脂多糖作为VSMC迁移诱导剂。将实验分为4组:不添加脂多... 目的探讨p300/CBP相关因子(PCAF)对大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)迁移的作用及机制。方法组织块贴壁法获取大鼠原代VSMC,使用Ad-PCAF RNAi腺病毒转染VSMC以下调PCAF表达。选择1μg/ml的脂多糖作为VSMC迁移诱导剂。将实验分为4组:不添加脂多糖(对照组)、1μg/ml脂多糖刺激(A组)、Ad-绿色荧光蛋白(GFP)腺病毒转染+1μg/ml脂多糖刺激(B组)、Ad-PCAF RNAi腺病毒转染+1μg/ml脂多糖刺激(C组)。采用Transwell实验检测细胞迁移水平。免疫荧光染色实验检测VSMC中NF-κB p65的核转位情况。Western blot检测PCAF、NF-κB p65、磷酸化NF-κB p65蛋白表达水平。结果 Western blot结果显示,与对照组比较,A组和B组PCAF和磷酸化NF-κB p65蛋白表达明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);与B组比较,C组PCAF和磷酸化NF-κB p65蛋白表达明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。Transwell实验结果显示,与对照组比较,A组和B组穿出小室细胞数明显增多,差异有统计学意义[(766.30±40.86)个/视野、(794.00±76.36)个/视野vs (202.70±22.59)个/视野,P<0.05];与B组比较,C组穿出小室细胞数明显减少,差异有统计学意义[(337.00±82.95)个/视野vs (794.00±76.36)个/视野,P<0.05]。免疫荧光染色实验结果显示,与对照组比较,A组和B组细胞核内NF-κB p65蛋白表达明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与B组比较,C组细胞核内NF-κB p65蛋白表达明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论下调PCAF的表达可明显抑制VSMC迁移,其机制可能与下调PCAF后抑制NF-κB信号通路介导的炎性反应有关。 展开更多
关键词 p300-CBP转录因子 肌细胞 平滑肌 细胞运动 绿色荧光蛋白质类 NF-κB
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大鼠肾去交感神经实验动物模型的制备
2
作者 郑晓新 汪小丁 +2 位作者 侯果 邱璇 蒋学俊 《中国心血管病研究》 CAS 2016年第10期940-944,F0003,共6页
目的 制备大鼠肾去交感神经实验动物模型.方法 52只SPF级SD大鼠随机分为正常对照组（N组）、肾去交感组（RDN组）、心肌梗死组（MI＋Sham组）和心肌梗死加肾去交感治疗组（MI＋RDN组）四组.MI＋Sham组和MI＋RSD组分别结扎前降支冠脉制... 目的 制备大鼠肾去交感神经实验动物模型.方法 52只SPF级SD大鼠随机分为正常对照组（N组）、肾去交感组（RDN组）、心肌梗死组（MI＋Sham组）和心肌梗死加肾去交感治疗组（MI＋RDN组）四组.MI＋Sham组和MI＋RSD组分别结扎前降支冠脉制备心梗模型,7d后分别予肾去交感假手术或手术处理.电刺激法评估术前及RDN术后即刻,HE染色法评估术前和MI术后4周肾交感去除情况,ELISA法评估血浆血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）、醛固酮（ALD）和去甲肾上腺素（NE）变化情况.结果 RDN术总死亡率为18.1％,手术成功率为81.9％.在RDN术前,肾神经干电刺激可诱导明显交感反应,而术后上述反应消失.HE染色显示,正常未消融的肾动脉外膜外可见完整交感神经,RDN术后3周未见任何完整肾交感神经,肾动脉血管壁未见明显异常.与MI＋Sham组相比,MI＋RDN组AngⅡ、ALD及NE均明显减少[NE：（669.0±24.0）ng/L比（1349.0±209.0）ng/L,P＜0.01;AngⅡ：（205.5±16.4）ng/L比（1069.0±209.1）ng/L,P＜0.01;ALD：（290.0±36.0）ng/L比（1049.5±298.5）ng/L,P＜0.01].结论 本研究所制备的大鼠肾去交感模型具有良好的操作性、安全性、实用性和有效性. 展开更多
关键词 大鼠 肾去交感 化学消融 模型
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肾去交感支配对心肌梗死后大鼠心肌纤维化和转化生长因子-β1的影响 被引量：1
3
作者 郑晓新 侯果 +1 位作者 邱璇 蒋学俊 《中国心血管病研究》 CAS 2016年第9期845-849,863,864,共7页
目的 探讨肾去交感神经术（RSD）对心肌梗死大鼠心肌纤维化和转化生长因子-β1（TGF-β1）表达水平的影响.方法 52只雄性SD大鼠随机分为4组：正常对照组（Control组）、肾去交感组（RSD组）、心肌梗死组（MI7d＋Sham组）和肾去交感干预... 目的 探讨肾去交感神经术（RSD）对心肌梗死大鼠心肌纤维化和转化生长因子-β1（TGF-β1）表达水平的影响.方法 52只雄性SD大鼠随机分为4组：正常对照组（Control组）、肾去交感组（RSD组）、心肌梗死组（MI7d＋Sham组）和肾去交感干预组（MI7d＋RSD组）.MI7d＋Sham组和MI7d＋RSD组分别给予前降支冠脉结扎术制备心梗模型,7d后行肾交感假手术或去交感术.心脏彩超评估大鼠左心室收缩末期直径（LVESD）、左心室射血分数（LVEF）和左心室短轴缩短率（LVFS）.Masson法检测大鼠左心室心肌胶原容积分数（CVF）.RT-PCR法和Western-blot法分别检测大鼠左室心肌TGF-β1 mRNA和TGF-β1蛋白的相对表达水平.结果 与MI7d＋Sham组相比,M17d＋RSD组大鼠LVESD明显减小[LVESD （3.13±0.25）mm比（5.23±0.15）mm,P＜0.01],而LVFS和LVEF均增高[LVFS（38.2±4.5）％比（23.1±3.3）％,P＜0.01;LVEF（61.7±1.3）％比（40.4±2.7）％,P＜0.01].与MI7d＋Sham组相比,Mt7d＋RSD组胶原容积分数减少[（42.66±7.55）％比（59.33 ±9.79）％,P＜0.01],TGF-β1 mRNA（1.47±0.09比2.00±0.09,P＜0.01）和TGF-βI蛋白（0.46±0.04比0.73±0.02,P＜0.01）的相对表达量均减少.结论 肾去交感神经术能抑制心肌梗死大鼠心肌纤维化并改善心功能,可能与下调TGF-β1的表达有关. 展开更多
关键词 肾去交感支配 心肌梗死 心肌纤维化 转化生长因子-Β1
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