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两种检测尼帕病毒的实时荧光定量PCR方法的比较与效果验证
1
作者
肖舒奇
师永霞
+3 位作者
夏菡
危宏平
袁志明
黄弋
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第4期303-308,共6页
目的 建立稳定可靠的尼帕病毒特异性检测技术和方法,对该病毒进行监测和检测、预警预报。方法 本研究对已建立的两种尼帕病毒的实时荧光定量PCR检测方法的特异性与敏感性进行了比较和验证。结果 研究结果显示两种方法检测体外转录RNA时...
目的 建立稳定可靠的尼帕病毒特异性检测技术和方法,对该病毒进行监测和检测、预警预报。方法 本研究对已建立的两种尼帕病毒的实时荧光定量PCR检测方法的特异性与敏感性进行了比较和验证。结果 研究结果显示两种方法检测体外转录RNA时灵敏度为10 copies/μL,检测活病毒的灵敏度为10 TCID_(50)/mL。特异性检测结果表明,两种检测方法均与登革病毒、日本乙型脑炎病毒、云南版纳病毒、艾比湖病毒、寨卡病毒、西藏环状病毒、克里米亚-刚果出血热病毒和埃博拉病毒样本无交叉扩增,特异性良好。结论 本研究是国内首次利用尼帕病毒细胞感染样品对两种尼帕病毒的实时荧光定量PCR方法进行评估验证和比较验证,证明两种检测方法均具有较好的灵敏度和特异度,为建立稳定可靠的尼帕病毒实验室诊断方法提供参考。
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关键词
尼帕病毒
实时荧光定量PCR
效果验证和比较
生物安全四级实验室
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职称材料
一种快速定量检测猴组织中SIV/SHIV的方法
2
作者
高歌
孟凤珍
姚艳丰
《中国比较医学杂志》
CAS
北大核心
2020年第12期103-108,共6页
目的以猴-人免疫缺陷病毒(simian-human immunodeficiency virus,SHIV)gag基因为特异性扩增靶标,建立一种快速、灵敏、特异的TaqMan实时荧光定量PCR法检测猴血浆、外周血单核细胞和淋巴结中的猴免疫缺陷病毒(simian immunodeficiency vi...
目的以猴-人免疫缺陷病毒(simian-human immunodeficiency virus,SHIV)gag基因为特异性扩增靶标,建立一种快速、灵敏、特异的TaqMan实时荧光定量PCR法检测猴血浆、外周血单核细胞和淋巴结中的猴免疫缺陷病毒(simian immunodeficiency virus,SIV)和SHIV。方法以SHIVSF162p3n gag基因为模板,用普通PCR方法扩增出109 bp DNA片段用于克隆构建标准品质粒pGEM^®-T-SHIV gag。通过对SHIV标准品质粒定量分析,优化反应体系,检测TaqMan实时荧光定量PCR方法的灵敏度、特异度和重复性。结果TaqMan实时荧光定量PCR法能有效地检测出10^2~10^7 copies/μL SIV/SHIV gag基因mRNA,线性系数为R^2=0.998,slop=-3.304。方法重复性检测显示CV%在0.6%~1.1%之间。结论该TaqMan实时荧光定量PCR法具有快速、灵敏和特异性高的优点,适用于SIV/SHIV感染猴动物模型的研究工作。
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关键词
猴免疫缺陷病毒
猴-人免疫缺陷病毒
TaqMan实时荧光定量PCR
灵敏度
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职称材料
题名
两种检测尼帕病毒的实时荧光定量PCR方法的比较与效果验证
1
作者
肖舒奇
师永霞
夏菡
危宏平
袁志明
黄弋
机构
中国科学院
武汉
病毒研究所
广州海关技术中心
武汉国家生物安全实验室
出处
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第4期303-308,共6页
基金
国家科技重大专项(No.2018ZX10711001-006)。
文摘
目的 建立稳定可靠的尼帕病毒特异性检测技术和方法,对该病毒进行监测和检测、预警预报。方法 本研究对已建立的两种尼帕病毒的实时荧光定量PCR检测方法的特异性与敏感性进行了比较和验证。结果 研究结果显示两种方法检测体外转录RNA时灵敏度为10 copies/μL,检测活病毒的灵敏度为10 TCID_(50)/mL。特异性检测结果表明,两种检测方法均与登革病毒、日本乙型脑炎病毒、云南版纳病毒、艾比湖病毒、寨卡病毒、西藏环状病毒、克里米亚-刚果出血热病毒和埃博拉病毒样本无交叉扩增,特异性良好。结论 本研究是国内首次利用尼帕病毒细胞感染样品对两种尼帕病毒的实时荧光定量PCR方法进行评估验证和比较验证,证明两种检测方法均具有较好的灵敏度和特异度,为建立稳定可靠的尼帕病毒实验室诊断方法提供参考。
关键词
尼帕病毒
实时荧光定量PCR
效果验证和比较
生物安全四级实验室
Keywords
Nipah virus
TaqMan real-time RT-PCR
comparison and validation
BSL-4
分类号
R373.9 [医药卫生—病原生物学]
S855.2 [农业科学—临床兽医学]
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职称材料
题名
一种快速定量检测猴组织中SIV/SHIV的方法
2
作者
高歌
孟凤珍
姚艳丰
机构
中国科学院
武汉
病毒研究所
武汉
大学基础医学院
出处
《中国比较医学杂志》
CAS
北大核心
2020年第12期103-108,共6页
文摘
目的以猴-人免疫缺陷病毒(simian-human immunodeficiency virus,SHIV)gag基因为特异性扩增靶标,建立一种快速、灵敏、特异的TaqMan实时荧光定量PCR法检测猴血浆、外周血单核细胞和淋巴结中的猴免疫缺陷病毒(simian immunodeficiency virus,SIV)和SHIV。方法以SHIVSF162p3n gag基因为模板,用普通PCR方法扩增出109 bp DNA片段用于克隆构建标准品质粒pGEM^®-T-SHIV gag。通过对SHIV标准品质粒定量分析,优化反应体系,检测TaqMan实时荧光定量PCR方法的灵敏度、特异度和重复性。结果TaqMan实时荧光定量PCR法能有效地检测出10^2~10^7 copies/μL SIV/SHIV gag基因mRNA,线性系数为R^2=0.998,slop=-3.304。方法重复性检测显示CV%在0.6%~1.1%之间。结论该TaqMan实时荧光定量PCR法具有快速、灵敏和特异性高的优点,适用于SIV/SHIV感染猴动物模型的研究工作。
关键词
猴免疫缺陷病毒
猴-人免疫缺陷病毒
TaqMan实时荧光定量PCR
灵敏度
Keywords
simian immunodeficiency virus(SIV)
simian-human immunodeficiency virus(SHIV)
TaqMan realtime FQ-PCR
sensitivity
分类号
R-33 [医药卫生]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
两种检测尼帕病毒的实时荧光定量PCR方法的比较与效果验证
肖舒奇
师永霞
夏菡
危宏平
袁志明
黄弋
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2022
0
在线阅读
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职称材料
2
一种快速定量检测猴组织中SIV/SHIV的方法
高歌
孟凤珍
姚艳丰
《中国比较医学杂志》
CAS
北大核心
2020
0
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职称材料
已选择
0
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