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EB病毒受体的放射配基结合分析 被引量:1
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作者 吴锋 赵明伦 +1 位作者 黄培春 吴雄文 《同济医科大学学报》 CSCD 北大核心 1996年第5期333-337,共5页
用3H-TdR标记爱波斯坦-巴尔病毒(EBV)进行结合饱和实验和竞争性抑制实验检测3种类型细胞的EBV受体。结果表明,B淋巴细胞性白血病细胞系Raji细胞存在高低两种亲和性EBV结合位点,其Kd1=1.25×10... 用3H-TdR标记爱波斯坦-巴尔病毒(EBV)进行结合饱和实验和竞争性抑制实验检测3种类型细胞的EBV受体。结果表明,B淋巴细胞性白血病细胞系Raji细胞存在高低两种亲和性EBV结合位点,其Kd1=1.25×10(-13)mol/L,B(max)1=9.89病毒粒子/细胞;Kd2=2.80×10(-12)mol/L,B(max)2=170.35病毒粒子/细胞,而EBV不与红白血病细胞系K562细胞结合。上皮细胞性低分化鼻咽癌细胞系CNE-2Z细胞也表达EBV受体,其Kd=6.17×10(-13)mol/L,B(max)=10.24病毒粒子/细胞。EBV及α干扰素均能阻止3H-EBV与Raji细胞或CNE-2Z细胞的特异性结合。 展开更多
关键词 放射配位体测定 鼻咽肿瘤 受体 EB病毒
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重组汉坦病毒核壳蛋白的制备及其单克隆抗体的研制
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作者 黄汉菊 王小红 +5 位作者 杨泗 黄庆华 朱慧芬 沈关心 郭兆彪 杨瑞馥 《同济医科大学学报》 CSCD 1999年第1期1-3,共3页
将PCR扩增的HTV76-118RNA小片段的cDNA克隆插入到载体pDS56/RBSⅡ-(O)-6His中,通过IPTG诱导表达以及镍螯合层析纯化重组NP,经过SDS-PAGE、免疫转印和ELISA方法分析其蛋白特... 将PCR扩增的HTV76-118RNA小片段的cDNA克隆插入到载体pDS56/RBSⅡ-(O)-6His中,通过IPTG诱导表达以及镍螯合层析纯化重组NP,经过SDS-PAGE、免疫转印和ELISA方法分析其蛋白特性,证实该重组NP与毒粒NP相同,均为49.6ku,能与肾综合征出血热(HFRS)患者血清产生特异性反应。以此重组NP作为抗原制备抗NP单克隆抗体,获得两株持续稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株。用抗NPMcAb建立检测IgM抗体的ELISA捕获法。证实纯化重组NP作为抗原,避免了组织培养病毒的感染性和非特异性以及难以标准化的缺点。所建立的ELISA捕获法检测HFRS患者血清中IgM抗体的方法特异性强、敏感性高。 展开更多
关键词 汉坦病毒 重组NP蛋白 单克隆抗体
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单克隆抗体可变区DNA序列的测定
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作者 苏娜 《同济医科大学学报》 CSCD 北大核心 1995年第2期98-101,共4页
采用聚合酶链反应(PCR)方法获得单克隆抗体重、轻链的可变区基因,并进行了PCR产物直接DNA序列测定,或将扩增产物分别插入pUC18质粒,筛选出阳性克隆,用末端终止法进行DNA序列测定。得到大约350bp可变区基因... 采用聚合酶链反应(PCR)方法获得单克隆抗体重、轻链的可变区基因,并进行了PCR产物直接DNA序列测定,或将扩增产物分别插入pUC18质粒,筛选出阳性克隆,用末端终止法进行DNA序列测定。得到大约350bp可变区基因,符合Ig可变区基因编码。直接法简便可靠,节省时间和试剂;而克隆法带有酶切位点,有利于基因工程抗体的构建和表达。 展开更多
关键词 单克隆 抗体 可变区 DNA 序列测定
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