浅析兽用生物制品企业污水处理 被引量：1

1

作者 韩兴 秦红刚 +1 位作者 熊亮 郑江涛 《中国畜禽种业》 2018年第2期40-41,共2页

随着经济水平的提高,环境问题越来越受到人们的关注,完全以牺牲环境为代价换取经济的时代已经过去,作为兽用生物制品企业,在生产过程中不可避免要产生各种污染物,其排放的废水含有很多有害病原菌,因此,生物制品企业污水处理问题相当严... 随着经济水平的提高,环境问题越来越受到人们的关注,完全以牺牲环境为代价换取经济的时代已经过去,作为兽用生物制品企业,在生产过程中不可避免要产生各种污染物,其排放的废水含有很多有害病原菌,因此,生物制品企业污水处理问题相当严峻。很多兽用生物制品企业都根据本单位生产情况采用相应的污水处理方式。 展开更多

关键词 兽用生物制品 企业 污水处理

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猪瘟病毒和牛病毒性腹泻病毒双重RT-PCR鉴别检测方法的建立及应用 被引量：18

2

作者 李晶梅 刘丹 +5 位作者 薛霜 秦红刚 陈其兵 靖志强 漆世华 谢红玲 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2014年第4期66-71,共6页

猪瘟病毒和牛病毒性腹泻病毒同属于黄病毒科瘟病毒属,在基因组序列上有很高的同源性,2种病毒交叉污染的情况十分严重,给疫病诊断和疫苗质量控制带来很大麻烦。为了更好的对这2种病的病原进行分子生物学鉴别检测,参考GenBank上2种病毒标... 猪瘟病毒和牛病毒性腹泻病毒同属于黄病毒科瘟病毒属,在基因组序列上有很高的同源性,2种病毒交叉污染的情况十分严重,给疫病诊断和疫苗质量控制带来很大麻烦。为了更好的对这2种病的病原进行分子生物学鉴别检测,参考GenBank上2种病毒标准株的基因组序列,选取各自的保守基因区域设计可以进行鉴别检测的特异性引物,经过对PCR反应条件的优化,建立了可以对2种病毒同时检测的双重RT-PCR方法。该方法对猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪日本脑炎病毒、猪伪狂犬病病毒、猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒、猪圆环病毒2型的扩增结果均为阴性;该检测方法的敏感性为5ng病毒基因组RNA。建立的猪瘟病毒和牛病毒性腹泻病毒双重RT-PCR检测方法特异性强、敏感性高,可以用于2种疫病的临床分子检测,也可用于猪瘟疫苗的质量控制,为2种病毒的交叉污染的检测提供一种方便、快捷的方法。 展开更多

关键词 猪瘟病毒 牛病毒性腹泻病毒 双重RT—PCR 鉴别检测

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血清3型鸭甲型肝炎病毒实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立与初步应用 被引量：5

3

作者 孙庆歌 薛霜 +7 位作者 肖爱芳 马慧慧 朱薇 漆世华 温文生 舒银辉 谢红玲 苏敬良 《中国兽药杂志》 2013年第4期1-5,共5页

通过对GenBank公布的鸭甲型肝炎病毒全序列比对,在3型鸭甲肝炎病毒(DHVA-3)5’非编码区的保守区,设计了一对检测引物和一条特异性TaqMan探针,以构建的阳性重组质粒经体外转录合成的RNA作为标准品绘制标准曲线,建立了一种快速检测DHAV-3... 通过对GenBank公布的鸭甲型肝炎病毒全序列比对,在3型鸭甲肝炎病毒(DHVA-3)5’非编码区的保守区,设计了一对检测引物和一条特异性TaqMan探针,以构建的阳性重组质粒经体外转录合成的RNA作为标准品绘制标准曲线,建立了一种快速检测DHAV-3的实时荧光定量RT-PCR方法。该方法能特异性地检测出DHAV-3,而与血清1型鸭肝炎病毒(DHAV-1)、鸭瘟病毒、新城疫病毒、禽流感病毒(H9)、呼肠孤病毒、传染性支气管炎病毒无交叉反应。在1.8×103～1.8×108copies/μL的检测范围内标准曲线线性关系较好,R2为0.992。敏感性试验表明,最低检测限为36拷贝数RNA。用该方法和胚半数致死量法对尿囊液中病毒含量进行检测,表明二种方法检测结果呈正相关。本研究所建立的检测方法特异性好,灵敏度高,且操作方便,可为该病毒的快速诊断和流行病学调查提供技术手段。 展开更多

关键词 血清3型鸭甲型肝炎病毒 实时荧光定量RT—PCR

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IFA和IPMA方法测定猪瘟兔化弱毒病毒含量 被引量：12

4

作者 李晶梅 朱薇 +8 位作者 秦红刚 靖志强 廖园园 于义娟 肖敏 袁刚 谢红玲 漆世华 温文生 《中国兽药杂志》 2013年第10期35-38,共4页

使用间接免疫荧光方法(IFA)和过氧化物酶单层试验(IPMA)测定猪瘟兔化弱毒的病毒含量(TCID50)。两种方法都使用韩国JBT公司猪瘟单抗作为一抗,此单抗的稀释倍数最高为300倍。Trueblue过氧化物酶底物显色的、感染猪瘟兔化弱毒的阳性细胞呈... 使用间接免疫荧光方法(IFA)和过氧化物酶单层试验(IPMA)测定猪瘟兔化弱毒的病毒含量(TCID50)。两种方法都使用韩国JBT公司猪瘟单抗作为一抗,此单抗的稀释倍数最高为300倍。Trueblue过氧化物酶底物显色的、感染猪瘟兔化弱毒的阳性细胞呈现蓝色,易于辨识,所以确定Trueblue为IPMA方法中的酶作用底物。建立的的IFA和IPMA方法与兔体反应热法进行了比较,证明两者存在一定平行关系,但IFA和IPMA比兔体反应热法检测结果的数值低1个数量级左右。基于以上结果,TCID50方法可作为猪瘟疫苗效力检验的候选方法。 展开更多

关键词 猪瘟兔化弱毒 TCID50 IPMA IFA

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BHK-21细胞不同处理方式对裸鼠致瘤性的影响 被引量：6

5

作者 于义娟 秦涛 +9 位作者 闵娟娟 漆世华 靖志强 付娅 李晶梅 廖园园 舒银辉 朱薇 徐松 谢红玲 《中国兽药杂志》 北大核心 2017年第11期28-35,共8页

为分析BHK-21细胞不同处理方式对裸鼠致瘤性的影响,分别用甲醛、二乙烯亚胺(BEI)、β-丙内酯(BPL)进行灭活和在-20℃进行冻融处理的BHK-21细胞接种裸鼠,通过病理组织形态学观察判定其是否存在致肿瘤的特性。结果显示,甲醛、BEI、BPL、冻... 为分析BHK-21细胞不同处理方式对裸鼠致瘤性的影响,分别用甲醛、二乙烯亚胺(BEI)、β-丙内酯(BPL)进行灭活和在-20℃进行冻融处理的BHK-21细胞接种裸鼠,通过病理组织形态学观察判定其是否存在致肿瘤的特性。结果显示,甲醛、BEI、BPL、冻融2次或3次分别处理的BHK-21细胞接种裸鼠,对裸鼠致瘤率为零。冻融1次的BHK-21细胞和10~7、10~5和10~3个BHK-21细胞分别接种裸鼠,致瘤率为100%。10个BHK-21细胞接种裸鼠,未见成瘤。试验表明,裸鼠检测BHK-21细胞致瘤性敏感性为10~3个细胞;冻融2次、甲醛、BEI、BPL处理,BHK-21细胞均丧失致瘤性;冻融1次不能使BHK-21细胞丧失致瘤性。 展开更多

关键词 BHK-21细胞 裸鼠 致瘤性

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牛病毒性腹泻-粘膜病病毒TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法的建立及初步应用 被引量：12

6

作者 陈其兵 薛霜 +5 位作者 漆世华 朱薇 张萍 谢红玲 温文生 吴玉石 《中国兽药杂志》 2012年第4期4-6,47,共4页

为建立一种牛病毒性腹泻-粘膜病病毒(BVDV)的快速检测方法,根据GenBank中登录的BVDV基因序列,针对5’UTR的保守序列,设计合成了一对特异性引物和一条TaqMan荧光探针。通过对反应条件和反应体系进行优化,建立了一种能快速定量检测BVDV的... 为建立一种牛病毒性腹泻-粘膜病病毒(BVDV)的快速检测方法,根据GenBank中登录的BVDV基因序列,针对5’UTR的保守序列,设计合成了一对特异性引物和一条TaqMan荧光探针。通过对反应条件和反应体系进行优化,建立了一种能快速定量检测BVDV的荧光定量RT-PCR检测方法。通过对20份胎牛血清样品和猪瘟细胞苗半成品进行检测,对该方法的特异性、敏感性和重复性进行试验。结果显示,建立的方法能检测到BVDV,而对CSFV、PRRSV和MDBK细胞的扩增结果均为阴性,具有高度的特异性。在所检测的20份样品中,BVDV阳性6份(30%)。对所构建的标准品进行检测,在102～108拷贝/μL的范围内可以得到良好的动力学曲线,能检测低至103～104拷贝/mL的病毒量。表明所建立的检测方法具有快速、特异、灵敏、重复性好等特点,可用于临床及科研中对BVDV的快速定量检测和对牛血清及猪瘟兔化弱毒疫苗等生物制品中是否污染BVDV进行监测。 展开更多

关键词 牛病毒性腹泻-粘膜病病毒 荧光定量RT-PCR 检测

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养猪场5种常见疫苗不同组合的免疫效果研究 被引量：3

7

作者 熊忠良 温文生 +5 位作者 史小娜 丁凡 程敏华 杨纯杰 王肆玖 吕长军 《安徽农业科学》 CAS 2018年第33期61-64,70,共5页

[目的]优化免疫接种程序,减少疫苗接种次数以及减轻猪场疫苗接种工作量。[方法]对猪瘟、猪蓝耳病、猪伪狂犬病、猪圆环病毒病以及猪喘气病5种猪场常见猪病的疫苗按照不同组合采用混合注射、分点注射以及单苗注射等接种方式进行免疫试验... [目的]优化免疫接种程序,减少疫苗接种次数以及减轻猪场疫苗接种工作量。[方法]对猪瘟、猪蓝耳病、猪伪狂犬病、猪圆环病毒病以及猪喘气病5种猪场常见猪病的疫苗按照不同组合采用混合注射、分点注射以及单苗注射等接种方式进行免疫试验。[结果]通过田间16轮次的重复试验和效果观察发现,3种不同免疫方式对猪群不同时期的抗体水平、日增重以及育成率等没有显著差异。[结论]5种疫苗不同组合混合接种在临床上具有可行性,为猪场因地制宜地制定免疫程序提供参考。 展开更多

关键词 疫苗 不同组合 免疫效果

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犬细小病毒胶体金检测试纸条的制备与初步评价 被引量：7

8

作者 刘洁 牟林琳 +6 位作者 何文辉 李晶梅 谢红玲 廖园园 朱薇 漆世华 温文生 《中国兽药杂志》 2014年第3期35-37,共3页

为快速检测及诊断犬细小病毒及其引起的传染性疾病,应用胶体金免疫层析技术,采用柠檬酸三钠还原法制备25 nm的胶体金颗粒,标记抗犬细小病毒单克隆抗体CPV-F1株后包被于玻璃纤维膜作为金标垫,在硝酸纤维素膜上分别包被羊抗小鼠IgG二抗和... 为快速检测及诊断犬细小病毒及其引起的传染性疾病,应用胶体金免疫层析技术,采用柠檬酸三钠还原法制备25 nm的胶体金颗粒,标记抗犬细小病毒单克隆抗体CPV-F1株后包被于玻璃纤维膜作为金标垫,在硝酸纤维素膜上分别包被羊抗小鼠IgG二抗和抗犬细小病毒单克隆抗体CPV-B6株作为质控线和检测线,将吸水垫、硝酸纤维素膜、金标垫和样品垫分别粘贴于背衬板上制成犬细小病毒抗原胶体金检测试纸条。特异性试验及与血凝试验的对比结果表明,该试纸条具有良好的特异性和敏感性,与进口产品的总符合率为98%。本研究为进一步研发犬细小病毒检测试纸奠定了基础。 展开更多

关键词 犬细小病毒 抗原 胶体金试纸条

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分泌抗犬细小病毒单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立 被引量：7

9

作者 刘洁 何文辉 +7 位作者 李晶梅 王威 肖敏 谢红玲 廖园园 朱薇 漆世华 温文生 《中国兽药杂志》 2013年第7期9-12,共4页

为制备犬细小病毒(CPV)单克隆抗体,用F81细胞繁殖CPV,病毒液经二乙烯亚胺(BEI)灭活、纯化后免疫BALB/c小鼠,将小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,经筛选获得2株分泌抗CPV单克隆抗体的杂交瘤细胞株,命名为F1和B6。F1和B6分泌的单克隆... 为制备犬细小病毒(CPV)单克隆抗体,用F81细胞繁殖CPV,病毒液经二乙烯亚胺(BEI)灭活、纯化后免疫BALB/c小鼠,将小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,经筛选获得2株分泌抗CPV单克隆抗体的杂交瘤细胞株,命名为F1和B6。F1和B6分泌的单克隆抗体Ig亚类均为IgG1;以F1和B6制备的腹水,经检测,间接ELISA效价均为1×105,免疫荧光效价分别为1∶3200和1∶6400;F1和B6培养上清的抗体中和效价分别为1∶1024和1∶2048,血凝抑制效价分别为1∶2048和1∶4096;免疫印迹(Western-blotting)和抗原表位分析结果显示,F1和B6分泌的单克隆抗体可能分别针对CPV的空间表位和线性表位。2株分泌抗CPV单克隆抗体的杂交瘤细胞株的建立可进一步用于开发CPV特异性诊断制剂和治疗制剂。 展开更多

关键词 犬细小病毒 单克隆抗体 杂交瘤细胞株

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猪伪狂犬病灭活疫苗(HB-J株)对兔与猪免疫攻毒保护平行关系研究 被引量：5

10

作者 舒银辉 黄文辉 +6 位作者 饶清宜 郑良益 漆世华 吴玉石 杨思谊 杨雷 谢红玲 《中国兽药杂志》 2012年第10期5-8,共4页

用研制的连续3批猪伪狂犬病灭活疫苗(HB-J株)分别以不同剂量免疫健康兔和断奶仔猪,检测其免疫28 d后的血清抗体,采用血清中和试验法测定血清中和指数,并对免疫28 d后的兔和断奶仔猪分别进行攻毒,统计各组兔和断奶仔猪免疫后攻毒保护率... 用研制的连续3批猪伪狂犬病灭活疫苗(HB-J株)分别以不同剂量免疫健康兔和断奶仔猪,检测其免疫28 d后的血清抗体,采用血清中和试验法测定血清中和指数,并对免疫28 d后的兔和断奶仔猪分别进行攻毒,统计各组兔和断奶仔猪免疫后攻毒保护率。结果表明,兔免疫28 d后的血清抗体中和指数为794～1258时保护率为60%～80%,血清抗体中和指数≥1479时可获得100%保护;仔猪免疫28 d后的血清抗体中和指数为229～269时保护率为60%～80%,血清抗体中和指数≥331时可获得100%保护。兔与仔猪对猪伪狂犬病灭活疫苗(HB-J株)均产生良好的免疫应答反应,抗体值较高者获得保护率相对较高,兔与猪免疫与攻毒保护呈现平行关系。 展开更多

关键词 猪伪狂犬病 灭活疫苗 免疫攻毒保护 平行关系

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犬狂犬病毒抗体胶体金检测试纸卡的研制 被引量：2

11

作者 牟林琳 刘洁 +10 位作者 廖园园 靖志强 李建 漆世华 朱薇 李晶梅 李作生 秦涛 谢红玲 李婷婷 温文生 《中国兽药杂志》 北大核心 2015年第7期26-29,共4页

为快速检测犬狂犬病毒IgG抗体,应用狂犬病毒G蛋白作为捕获抗原,鼠抗狂犬病毒G蛋白单克隆抗体和羊抗犬IgG分别作为胶体金标记物和诊断抗体,羊抗鼠IgG作为质控线,制备胶体金免疫层析抗体检测试纸。该试纸卡具有良好的特异性、敏感性、重... 为快速检测犬狂犬病毒IgG抗体,应用狂犬病毒G蛋白作为捕获抗原,鼠抗狂犬病毒G蛋白单克隆抗体和羊抗犬IgG分别作为胶体金标记物和诊断抗体,羊抗鼠IgG作为质控线,制备胶体金免疫层析抗体检测试纸。该试纸卡具有良好的特异性、敏感性、重复性和稳定性,与快速荧光灶抑制实验检测值对比总符合率为82.1%。研究显示,本试纸卡能够快速、准确检测犬狂犬病毒IgG抗体,可为临床诊断和宠物犬狂犬疫苗免疫效果的评价提供参考。 展开更多

关键词 犬狂犬病毒 IGG抗体 胶体金试纸卡

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猪圆环病毒2型Cap蛋白ELISA检测方法的建立及初步应用 被引量：4

12

作者 廖园园 朱薇 +7 位作者 李建 王威 秦伟 漆世华 李晶梅 谢红玲 温文生 吴玉石 《中国兽药杂志》 2012年第6期1-4,共4页

将杆状病毒表达系统表达并经梯度离心纯化的PCV2 Cap蛋白作为标准品,利用双抗夹心法建立了针对猪圆环病毒2型Cap蛋白的ELISA检测方法,并应用于圆环病毒2型基因工程疫苗的质控。结果表明,多抗最适包被浓度为1μg/mL,最佳封闭液为1%BSA,... 将杆状病毒表达系统表达并经梯度离心纯化的PCV2 Cap蛋白作为标准品,利用双抗夹心法建立了针对猪圆环病毒2型Cap蛋白的ELISA检测方法,并应用于圆环病毒2型基因工程疫苗的质控。结果表明,多抗最适包被浓度为1μg/mL,最佳封闭液为1%BSA,最佳单抗反应浓度为2μg/mL,反应时间60 min,最佳二抗使用稀释度1∶40000,反应时间60 min。该方法与Sf9细胞、BSA和其他猪病病毒抗原之间无交叉反应,最低检测抗原量为5 ng。 展开更多

关键词 猪圆环病毒2型 衣壳蛋白Cap 检测 夹心法

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昆虫杆状病毒表达系统生产流感疫苗的研究进展 被引量：4

13

作者 李晶梅 靖志强 +4 位作者 秦红刚 薛霜 漆世华 谢红玲 吴玉石 《中国兽药杂志》 2012年第12期67-70,共4页

综述了昆虫杆状病毒表达系统生产流感疫苗的研究进展,同时分析了昆虫杆状病毒表达系统表达流感病毒样颗粒用于流感疫苗的优势和前景,以期为兽用流感病毒VLPs疫苗研发提供参考。

关键词 昆虫杆状病毒表达系统 流感病毒样颗粒 流感疫苗

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微载体灌注培养Marc-145细胞制备猪繁殖与呼吸综合征疫苗 被引量：4

14

作者 杨雷 李伟 +5 位作者 漆世华 秦红刚 韩兴 谢红玲 温文生 吴玉石 《中国兽药杂志》 2013年第2期7-10,共4页

对在生物反应器中用微载体连续灌注培养Marc-145细胞生产猪繁殖与呼吸综合征病毒的制备技术进行了研究。在14 L体积的生物反应器中,加入含10 g/L微载体的细胞培养基DMEM,接种Marc-145细胞至细胞浓度为1×105/mL,培养4 d后细胞可生长... 对在生物反应器中用微载体连续灌注培养Marc-145细胞生产猪繁殖与呼吸综合征病毒的制备技术进行了研究。在14 L体积的生物反应器中,加入含10 g/L微载体的细胞培养基DMEM,接种Marc-145细胞至细胞浓度为1×105/mL,培养4 d后细胞可生长至5～7×106/mL,然后以感染复数(MOI)为0.01接种PRRSV PC株病毒,接毒后36 h开始收获,连续收获3 d左右,收获的病毒滴度范围在106.0～107.3TCID50/mL之间,将收获的病毒液加入适量的保护剂,经冷冻干燥制备成疫苗,无菌、支原体等项目的检验均合格,3批疫苗的免疫保护率均为5/5。实验表明,用生物反应器微载体灌注培养Marc-145细胞制备PRRS疫苗工艺可行。 展开更多

关键词 微载体 灌注培养 猪繁殖与呼吸综合征疫苗

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伪狂犬病毒单克隆抗体的制备和鉴定 被引量：3

15

作者 李建 曹娟 +6 位作者 廖园园 刘洁 朱微 秦伟 秦红刚 漆世华 谢红玲 《中国兽药杂志》 2014年第3期6-9,共4页

以伪狂犬病毒(PRV)作为免疫原,免疫BALB/c小鼠,融合之后经间接ELISA、IFA和IHC试验进行杂交瘤筛选,共获得2株能分泌针对PRV单克隆抗体(简称单抗)的杂交瘤细胞株,2株猪伪狂犬病毒单抗与猪细小病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪圆环病毒2... 以伪狂犬病毒(PRV)作为免疫原,免疫BALB/c小鼠,融合之后经间接ELISA、IFA和IHC试验进行杂交瘤筛选,共获得2株能分泌针对PRV单克隆抗体(简称单抗)的杂交瘤细胞株,2株猪伪狂犬病毒单抗与猪细小病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪圆环病毒2型、猪瘟病毒均无交叉反应,IFA结果显示单抗能与接种于猪睾丸细胞(ST)的PRV发生特异性反应,IHC结果显示单抗能用感染了PRV的猪神经组织发生反应,证实抗PRV单克隆抗体具有良好的特异性和敏感性,此结论为猪伪狂犬病毒抗原表位分析及相关抗原抗体诊断试剂盒的研制奠定了基础。 展开更多

关键词 伪狂犬病毒 单克隆抗体 特异性 敏感性

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大肠杆菌K88、K99、987P纤毛抗原提纯及抗血清制备 被引量：3

16

作者 熊媛媛 黄涛 +3 位作者 郑佳 漆世华 谢红玲 吴玉石 《中国兽药杂志》 2012年第12期2-4,8,共4页

采用加热法和盐析法对大肠杆菌K88、K99、987P纤毛抗原进行了提取、纯化,并通过SDS-PAGE凝胶电泳对提纯效果进行了检验。将纯化的纤毛抗原免疫家兔,制备了K88、K99、987P纤毛抗原抗血清,用琼脂扩散试验检测了抗血清的效价。结果表明,纯... 采用加热法和盐析法对大肠杆菌K88、K99、987P纤毛抗原进行了提取、纯化,并通过SDS-PAGE凝胶电泳对提纯效果进行了检验。将纯化的纤毛抗原免疫家兔,制备了K88、K99、987P纤毛抗原抗血清,用琼脂扩散试验检测了抗血清的效价。结果表明,纯化的K88、K99、987P纤毛为高纯度的纤毛抗原,其分子量分别约为26、18、20 kD。K88、K99、987P抗血清的琼扩效价依次为1∶32、1∶32、1∶128,且特异性高。本研究为K88、K99、987P纤毛抗原定量检测及产纤毛大肠杆菌菌株的鉴定奠定了基础。 展开更多

关键词 产肠毒素大肠杆菌 纤毛抗原 纯化 抗血清

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鸭病毒性肝炎疫苗研究进展 被引量：3

17

作者 孙庆歌 肖爱芳 +2 位作者 朱薇 漆世华 谢红玲 《中国兽药杂志》 2013年第11期54-57,共4页

目前使用的鸭病毒性肝炎疫苗主要是弱毒活疫苗和灭活疫苗,基因工程疫苗的研究也取得了一定进展。就鸭病毒性肝炎疫苗的研究进展进行了综述,以期为进一步深入研究提供参考。

关键词 鸭病毒性肝炎 活疫苗 灭活疫苗 基因工程疫苗

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日本乙型脑炎病毒ELISA抗体检测试剂盒的研制及初步应用 被引量：1

18

作者 李建 廖园园 +7 位作者 秦红刚 刘洁 朱薇 漆世华 韩兴 徐松 舒银辉 谢红玲 《中国兽药杂志》 北大核心 2015年第1期10-13,共4页

采用日本乙型脑炎病毒单克隆抗体预包被酶标板，将纯化的日本乙型脑炎病毒（ JEV）作为检测用抗原，利用包被捕获法建立了用于检测猪乙型脑炎抗体的间接ELISA法。采用建立的ELISA法对50份已知阴性血清样本检测，临界OD450nm值为0．343，... 采用日本乙型脑炎病毒单克隆抗体预包被酶标板，将纯化的日本乙型脑炎病毒（ JEV）作为检测用抗原，利用包被捕获法建立了用于检测猪乙型脑炎抗体的间接ELISA法。采用建立的ELISA法对50份已知阴性血清样本检测，临界OD450nm值为0．343，ELISA与IFA对200份血清进行平行检测，总符合率为92．9％，与商品化的同类国产试剂盒的符合率为95％。与其他常见的猪病毒阳性血清抗体无交叉反应，2～8℃保存12个月稳定。研制的ELISA抗体检测试剂盒为临床JEV血清抗体检测及其疫苗的免疫效果评价提供了技术手段。 展开更多

关键词 日本乙型脑炎病毒 试剂盒 间接ELISA 抗体

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猪伪狂犬病不同佐剂灭活疫苗对兔免疫原性初探 被引量：2

19

作者 舒银辉 黄文辉 +7 位作者 饶清宜 郑良益 漆世华 王桂桂 吴玉石 祝春花 杨思谊 杨雷 《中国兽药杂志》 2011年第12期19-22,共4页

采用分离鉴定的猪伪狂犬病毒(HB-J株)以4种佐剂研制成4批灭活疫苗,以研究其对兔的免疫原性。疫苗分别免疫PRV抗体阴性兔后,用乳胶凝集试验法(LAT)和中和试验法(SNT)对试验兔进行血清抗体检测;于免疫后21、28 d对试验兔分别进行攻毒,观... 采用分离鉴定的猪伪狂犬病毒(HB-J株)以4种佐剂研制成4批灭活疫苗,以研究其对兔的免疫原性。疫苗分别免疫PRV抗体阴性兔后,用乳胶凝集试验法(LAT)和中和试验法(SNT)对试验兔进行血清抗体检测;于免疫后21、28 d对试验兔分别进行攻毒,观察兔保护情况。试验结果表明,兔对不同佐剂的猪伪狂犬病疫苗均产生良好的免疫应答反应,且当兔免疫后血清凝集价≥1∶32或血清抗体中和指数≥1479或中和价≥1∶16时,可以抵抗10 LD50剂量强毒的攻击;当兔免疫后血清凝集价≥1∶64或血清抗体中和指数≥2187或中和价≥1∶32时,可以抵抗100LD50剂量强毒的攻击;4种佐剂灭活疫苗均具有良好的免疫效果。 展开更多

关键词 伪狂犬病 不同佐剂 疫苗 免疫原性

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共表达PRRSV GP5和N蛋白重组杆状病毒的构建与鉴定 被引量：2

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作者 杨雷 漆世华 +3 位作者 温文生 李玉萍 王焕君 谢红玲 《中国兽药杂志》 2013年第12期13-16,共4页

利用杆状病毒双表达系统构建高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP-PRRSV)N蛋白和GP5蛋白的重组杆状病毒Bac-N-GP5,对重组病毒进行间接免疫荧光、Western blot分析以及动物免疫试验。结果表明:重组杆状病毒中表达了重组N和GP5蛋白,重组杆... 利用杆状病毒双表达系统构建高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP-PRRSV)N蛋白和GP5蛋白的重组杆状病毒Bac-N-GP5,对重组病毒进行间接免疫荧光、Western blot分析以及动物免疫试验。结果表明:重组杆状病毒中表达了重组N和GP5蛋白,重组杆状病毒免疫小鼠后产生了抗PRRSV GP5蛋白和N蛋白的特异性抗体。本试验成功构建共表达PRRSV N蛋白和GP5蛋白的重组杆状病毒,为下一步应用该重组杆状病毒作为基因工程亚单位疫苗奠定基础。 展开更多

关键词 猪繁殖与呼吸综合征 共表达 N蛋白 GP5蛋白

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