针对陕北白绒山羊多性状选择育种研究处于起步阶段的现状,以动物模型BLUP法为核心的多性状复合育种技术体系为依托,在Windows XP平台下利用ASP技术和SQL Server 2000数据库开发了一套基于Web的陕北白绒山羊辅助育种管理系统-ABMS。该系...针对陕北白绒山羊多性状选择育种研究处于起步阶段的现状,以动物模型BLUP法为核心的多性状复合育种技术体系为依托,在Windows XP平台下利用ASP技术和SQL Server 2000数据库开发了一套基于Web的陕北白绒山羊辅助育种管理系统-ABMS。该系统能实时地管理分布在不同地域种羊场的生产性能测定信息,并能方便地导入和导出选择性状的育种数据。ABMS在陕北白绒山羊种羊场实际应用中体现了技术先进、易于操作、网络化管理等特点,其推广和应用对实现种羊场育种工作和生产管理的自动化,具有极大的促进作用。展开更多
UTX(ubiquitously transcribed TPR gene on the X chromosome)作为H3K27me2/3的去甲基酶,能够调控动物发育过程,并有着重要的生物学作用。根据猪Utx预测序列,扩增Utx的CDS区全长序列。利用Utx的CDS区序列信息,构建pCD513B-CMV-Utx过表...UTX(ubiquitously transcribed TPR gene on the X chromosome)作为H3K27me2/3的去甲基酶,能够调控动物发育过程,并有着重要的生物学作用。根据猪Utx预测序列,扩增Utx的CDS区全长序列。利用Utx的CDS区序列信息,构建pCD513B-CMV-Utx过表达载体,设计并合成干扰shRNA和阴性对照寡核苷酸片段。其中干扰shRNA及阴性对照通过退火形成双链DNA,并插入pCD513B-U6慢病毒干扰载体。采用双酶切的方法和DNA测序鉴定重组载体。通过干扰和过表达载体质粒共转293T细胞,利用qRT-PCR筛选出最有效的干扰序列。重组质粒与其他3种慢病毒辅助包装质粒(pRsv-Rev、pGag-Pol、pVSV-G)共转染293T细胞包装慢病毒。结果表明,本试验成功扩增Utx基因的全长序列,且成功构建了Utx的过表达和干扰载体。qRT-PCR筛选出pCD513B-U6-Utx-shRNA-3干扰效率最显著,干扰效率为70%。本试验成功包装出慢病毒Lenti-Utx-shRNA、Lenti-NC和Lenti-Utx,测定的病毒滴度分别为6.1×107 TU/mL、4.8×107 TU/mL和3.9×105 TU/mL。此试验为进一步在猪源细胞中进行Utx基因的研究奠定基础。展开更多
文摘针对陕北白绒山羊多性状选择育种研究处于起步阶段的现状,以动物模型BLUP法为核心的多性状复合育种技术体系为依托,在Windows XP平台下利用ASP技术和SQL Server 2000数据库开发了一套基于Web的陕北白绒山羊辅助育种管理系统-ABMS。该系统能实时地管理分布在不同地域种羊场的生产性能测定信息,并能方便地导入和导出选择性状的育种数据。ABMS在陕北白绒山羊种羊场实际应用中体现了技术先进、易于操作、网络化管理等特点,其推广和应用对实现种羊场育种工作和生产管理的自动化,具有极大的促进作用。
文摘UTX(ubiquitously transcribed TPR gene on the X chromosome)作为H3K27me2/3的去甲基酶,能够调控动物发育过程,并有着重要的生物学作用。根据猪Utx预测序列,扩增Utx的CDS区全长序列。利用Utx的CDS区序列信息,构建pCD513B-CMV-Utx过表达载体,设计并合成干扰shRNA和阴性对照寡核苷酸片段。其中干扰shRNA及阴性对照通过退火形成双链DNA,并插入pCD513B-U6慢病毒干扰载体。采用双酶切的方法和DNA测序鉴定重组载体。通过干扰和过表达载体质粒共转293T细胞,利用qRT-PCR筛选出最有效的干扰序列。重组质粒与其他3种慢病毒辅助包装质粒(pRsv-Rev、pGag-Pol、pVSV-G)共转染293T细胞包装慢病毒。结果表明,本试验成功扩增Utx基因的全长序列,且成功构建了Utx的过表达和干扰载体。qRT-PCR筛选出pCD513B-U6-Utx-shRNA-3干扰效率最显著,干扰效率为70%。本试验成功包装出慢病毒Lenti-Utx-shRNA、Lenti-NC和Lenti-Utx,测定的病毒滴度分别为6.1×107 TU/mL、4.8×107 TU/mL和3.9×105 TU/mL。此试验为进一步在猪源细胞中进行Utx基因的研究奠定基础。
