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题名森林假单胞菌遗传转化体系的建立
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作者
赵倩
田龙艳
冯金艳
张良军
徐金柱
何静
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机构
甘肃农业大学大学林学院
森林病虫害生物防治国家林业和草原局重点实验室
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出处
《甘肃农业大学学报》
北大核心
2025年第4期214-221,共8页
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基金
广东省林业科技创新项目(2023KJCX020)
国家自然科学基金项目(32060341)。
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文摘
【目的】森林假单胞菌(Pseudomonassilvicola)T1-3-2菌株对多种林木病原真菌有较强的拮抗作用,为研究其代谢产物及其抗生素合成相关基因,需建立该菌株的遗产转化体系。【方法】通过不同试剂处理获得菌株T1-3-2感受态,随后通过热激和电击的转化方法筛选该菌株最优转化体系。【结果】确定菌株T1-3-2最适转化体系为:使用0.3 mol/L蔗糖处理获得的感受态,利用电击方式:电压1500 V,电阻200Ω,电容25µF,电击5 ms进行转化,转化效率达(8.8±0.24)×10^(4) CFU/ng DNA。利用该转化体系,运用质粒pBBR1MCS5-Tac-EGFP和pUT-mini-Tn5-Km成功构建了菌株T1-3-2的绿色荧光标记菌株与插入突变体库。【结论】可为解析森林假单胞菌与宿主互作、抑菌和促生机理的研究,以及后期开发应用中工程菌株的改造奠定基础。
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关键词
森林假单胞菌
遗传转化
突变体库
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Keywords
Pseudomonas silvicola
genetic transformation
mutant library
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分类号
S714.3
[农业科学—林学]
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