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几种促进剂的添加时间对中国红豆杉细胞悬浮培养紫杉醇合成的影响 被引量:10
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作者 李干雄 李志良 +2 位作者 曾腾锋 何艳宇 黄巧明 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 2008年第5期876-879,共4页
采用正交实验检测中国红豆杉[Taxus chinensis(Pilger) Rehd.]细胞悬浮培养中水杨酸、硝酸银、氨基酸前体、D-果糖和硫酸镧的添加时间对细胞生长和紫杉醇(taxol)积累的影响。这些促进剂的添加时间对中国红豆杉细胞悬浮培养的生长没有明... 采用正交实验检测中国红豆杉[Taxus chinensis(Pilger) Rehd.]细胞悬浮培养中水杨酸、硝酸银、氨基酸前体、D-果糖和硫酸镧的添加时间对细胞生长和紫杉醇(taxol)积累的影响。这些促进剂的添加时间对中国红豆杉细胞悬浮培养的生长没有明显的影响,但能明显促进紫杉醇的合成,当在细胞培养的第14d添加1.67mg/L硝酸银,第18d添加0.1mg/L水杨酸,第21d添加氨基酸前体,第21d添加10g/LD-果糖和2mg/L硫酸镧时对紫杉醇的促进作用最明显,在此最优组合处理时紫杉醇含量达到10.05mg/L,相对于最差组合处理时紫杉醇含量仅有1.77mg/L,紫杉醇含量提高5.7倍,这些因素的添加时间对紫杉醇合成的相互作用达不到显著水平。 展开更多
关键词 中国红豆杉 添加时间 相互作用 紫杉醇 正交设计
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HPLC法测定红豆杉中紫杉醇及同系物的含量 被引量:1
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作者 黄巧明 李朝红 +2 位作者 李干雄 骆雪兰 李志良 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 2008年第B05期77-80,共4页
建立了HPLC法测定红豆杉枝叶中10-去乙酰基巴卡亭Ⅲ(简称10-DABⅢ)、巴卡亭Ⅲ、三尖杉宁碱和紫杉醇的含量。采用二种流动相系统分别测定南方红豆杉枝叶中四种成分,以较大极性的甲醇-水(43:57)流动相系统测定10-去乙酰基巴卡亭Ⅲ... 建立了HPLC法测定红豆杉枝叶中10-去乙酰基巴卡亭Ⅲ(简称10-DABⅢ)、巴卡亭Ⅲ、三尖杉宁碱和紫杉醇的含量。采用二种流动相系统分别测定南方红豆杉枝叶中四种成分,以较大极性的甲醇-水(43:57)流动相系统测定10-去乙酰基巴卡亭Ⅲ和巴卡亭Ⅲ,以乙腈-水-甲醇(27:44:29)为流动相测定三尖杉宁碱和紫杉醇,采用Nova—Pak C18反相柱,流速为1mL/min,柱温35℃,紫外检测波长为227nm。10-去乙酰基巴卡亭Ⅲ、巴卡亭Ⅲ、三尖杉宁碱和紫杉醇的线性范围(n=5)分别为0.01~0.5μg(r=0.9998),0.01~1μg(r=0.9999),0.015~0.5μg(r:0.9990),0.01~0.5μg(r=0.9992);样品用丙酮和水浸提,体积比为60:40,回收丙酮后,用二氯甲烷萃取得到上述四种成分。本实验方法操作简便,结果准确,重现性好,可作为不同地区红豆杉的质量控制方法之一。 展开更多
关键词 HPLC 红豆杉 10-去乙酰基巴卡亭Ⅲ 巴卡亭Ⅲ 三尖杉宁碱 紫杉醇
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应用电导率监测红豆杉细胞悬浮培养中细胞生长与紫杉醇的累积 被引量:1
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作者 李志良 饶秋容 +2 位作者 李干雄 黄巧明 曾腾锋 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 2008年第2期346-348,共3页
对中国红豆杉细胞悬浮培养过程中细胞生长和紫杉醇累积及培养液的电导率变化规律进行了研究,实验表明,细胞悬浮培养过程中随着细胞生物量与紫杉醇含量的增加,培养液的电导率逐渐下降,细胞生长和紫杉醇累积曲线与培养液的电导率曲线恰成... 对中国红豆杉细胞悬浮培养过程中细胞生长和紫杉醇累积及培养液的电导率变化规律进行了研究,实验表明,细胞悬浮培养过程中随着细胞生物量与紫杉醇含量的增加,培养液的电导率逐渐下降,细胞生长和紫杉醇累积曲线与培养液的电导率曲线恰成镜像相关,当生物量达到最高时电导率达到并稳定于最低;紫杉醇累积的高峰滞后于细胞生物量的高峰2 ~3 d;电导率可作为红豆杉细胞培养中确定生物量和紫杉醇累积高峰期的监测指标。 展开更多
关键词 中国红豆杉 细胞培养 紫杉醇 电导率 在线监测
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