重组葡激酶溶栓作用的实验研究 被引量：2

1

作者 陈飞虎 杨军 +3 位作者 刘建辉 王静 智强 刘颖雪 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第6期536-539,共4页

目的　研究重组葡激酶对体内外血栓的溶解作用。方法　采用体外纤维蛋白溶解法，家兔体内纤维蛋白溶解试验，胶原蛋白肾上腺素诱发小鼠体内脑血栓形成模型及静脉结扎形成大鼠下腔静脉血栓模型。结果　重组葡激酶体外给药对纤维蛋白具... 目的　研究重组葡激酶对体内外血栓的溶解作用。方法　采用体外纤维蛋白溶解法，家兔体内纤维蛋白溶解试验，胶原蛋白肾上腺素诱发小鼠体内脑血栓形成模型及静脉结扎形成大鼠下腔静脉血栓模型。结果　重组葡激酶体外给药对纤维蛋白具有显著溶解作用，使家兔血浆优球蛋白溶解时间明显缩短，给药后０－５至２ｈ间血浆鱼精蛋白试验均呈阳性反应，但对血浆纤维蛋白原含量无显著影响；可显著降低脑血栓小鼠死亡率，缩短偏瘫动物的恢复时间；对结扎形成的大鼠下腔静脉血栓湿重有明显降低，给药后血栓所占血管面积明显减少。结论　重组葡激酶具有极显著溶解体内外血栓的作用，等剂量条件下，作用优于尿激酶。 展开更多

关键词 重组葡激酶 静脉血栓 脑血栓 溶栓疗法

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重组人组织型纤溶酶原激活剂缺失变体对猕猴的长期毒性研究

2

作者 董六一 左翔 +4 位作者 范丽 方明 陈飞虎 智强 陈志武 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期582-584,共3页

目的　观察重组人组织型纤溶酶原激活剂缺失变体(reteplase,Ret)的长期毒性作用。 方法　连续 14d给猕猴静脉注射不同剂量Ret。结果　Ret 8 0MIU·kg-1对猕猴不表现任何毒性作用 ,Ret 2 5 0、80 0MIU·kg-1组的血液RBC、HGB及... 目的　观察重组人组织型纤溶酶原激活剂缺失变体(reteplase,Ret)的长期毒性作用。 方法　连续 14d给猕猴静脉注射不同剂量Ret。结果　Ret 8 0MIU·kg-1对猕猴不表现任何毒性作用 ,Ret 2 5 0、80 0MIU·kg-1组的血液RBC、HGB及HCT均降低 ,部分猕猴粪便隐血试验阳性 ,血液生化学检查有TP下降 ,但这些指标在停药 14d时基本恢复正常。另外 ,所有给药猕猴出血时间均延长 ,但脏器系数和病理学未见有毒性变化。结论　Ret静脉注射 8 0MIU·kg-1是安全剂量 ,2 5 0、80 0MIU·kg-1两个剂量有一定的毒性反应 ,主要表现为贫血和出血 ,停药后毒性可以恢复。 展开更多

关键词 重组人组织型纤溶酶原激活剂缺失变体 长期毒性 猕猴

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rhIL-10对银屑病动物模型的治疗作用及免疫功能的影响 被引量：7

3

作者 陈飞虎 陈敏珠 +1 位作者 李俊 智强 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期333-336,共4页

目的　研究重组人白细胞介素 10 (rhIL 10 )对银屑病动物模型的治疗作用以及免疫功能的影响。方法　用小鼠雌激素期阴道上皮模型、鼠尾鳞片表皮模型观察重组人白细胞介素 10的抗银屑病作用 ,并检测ConA诱导T淋巴细胞增殖、LPS诱导B淋... 目的　研究重组人白细胞介素 10 (rhIL 10 )对银屑病动物模型的治疗作用以及免疫功能的影响。方法　用小鼠雌激素期阴道上皮模型、鼠尾鳞片表皮模型观察重组人白细胞介素 10的抗银屑病作用 ,并检测ConA诱导T淋巴细胞增殖、LPS诱导B淋巴细胞增殖、NK细胞活性及细胞因子(IFN γ、IL 2、IL 1、TNF α)水平。结果　rhIL 10 (5 ,2 0 ,80μg·kg-1·d-1,sc)对小鼠阴道上皮细胞有丝分裂有抑制作用 ,促进小鼠尾鳞片颗粒层的形成。对ConA诱导T淋巴细胞增殖反应及IL 2、IFN γ产生有抑制作用 ;对LPS诱导小鼠腹腔巨噬细胞产生IL 1、TNF α具有抑制作用 ;对NK细胞活性有抑制作用 ;对LPS诱导B淋巴细胞增殖有促进作用。结论　rhIL 10可能是通过抑制表皮细胞增殖与促进其分化 。 展开更多

关键词 重组人白细胞介素-10 银屑病 动物模型 免疫 细胞因子

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rhIL-10对银屑病患者与正常人PBMC作用比较 被引量：3

4

作者 陈飞虎 陈敏珠 +1 位作者 李俊 智强 《安徽医科大学学报》 CAS 2003年第1期15-19,共5页

目的　研究重组人白细胞介素 1 0 (rhIL 1 0 )对银屑病患者与正常人外周血单个核细胞 (PBMC)产生细胞因子与一氧化氮 (NO)的影响 ,探讨rhIL 1 0治疗银屑病机制。方法　分离、培养银屑病患者与正常人PBMC ,并检测PHA诱导PBMC产生IL 2、I... 目的　研究重组人白细胞介素 1 0 (rhIL 1 0 )对银屑病患者与正常人外周血单个核细胞 (PBMC)产生细胞因子与一氧化氮 (NO)的影响 ,探讨rhIL 1 0治疗银屑病机制。方法　分离、培养银屑病患者与正常人PBMC ,并检测PHA诱导PBMC产生IL 2、IFN γ与LPS诱导PBMC产生IL 1、IL 6、IL 8和NO水平。结果　银屑病患者活化的PBMC产生IFN γ、IL 1、IL 6和IL 8的水平明显高于正常健康人 ,IL 2与NO水平也较正常人为高 ,提示银屑病活动期一些炎性细胞因子水平升高。rhIL 1 0 (2 5、5、1 0、2 0、40 μg/L)对PHA诱导的银屑病患者与正常人PBMC产生IL 2、IFN γ均有抑制作用 ,对LPS诱导银屑病患者与正常人PBMC产生IL 1、IL 6、IL 8和NO同样具有抑制作用 ,并呈明显剂量依赖关系。anti IL 1 0McAb(2 5、5、1 0、2 0、40mg/L)在rhIL 1 0存在与不存在情况下均能促进PHA活化的银屑病患者与正常健康人PBMC产生IL 2及IFN γ ,但银屑病患者PBMC产生上述细胞因子能力低于正常人。结论　rhIL 1 0对银屑病患者PBMC分泌的炎性细胞因子水平升高具有抑制作用 。 展开更多

关键词 rhIL—10 银屑病 患者 正常人 PBMC 比较 外周血单个核细胞 治疗 发病机制 一氧化氮

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重组人组织型纤溶酶原激活剂缺失变体对家兔纤溶和凝血系统活性的影响 被引量：2

5

作者 董六一 范丽 +5 位作者 江勤 方明 岑德意 陈飞虎 智强 陈志武 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2004年第7期778-780,共3页

目的 :观察重组人组织型纤溶酶原激活剂缺失变体 (reteplase ,Ret)对家兔纤溶和凝血系统活性的影响。方法 :采用常规方法测定家兔血液纤溶和凝血系统相关参数指标。结果 :Ret(3.75、7.5 0、15 .0MIU·kg-1)可明显降低纤溶酶原含量 ... 目的 :观察重组人组织型纤溶酶原激活剂缺失变体 (reteplase ,Ret)对家兔纤溶和凝血系统活性的影响。方法 :采用常规方法测定家兔血液纤溶和凝血系统相关参数指标。结果 :Ret(3.75、7.5 0、15 .0MIU·kg-1)可明显降低纤溶酶原含量 ,使血浆纤维蛋白降解产物转呈阳性反应 ,缩短优球蛋白溶解时间 ,同时延长血浆凝血酶时间 ,凝血酶原时间及活化部分凝血活酶时间。结论 展开更多

关键词 重组人组织型纤溶酶原激活剂缺失变体 组织型纤溶酶原激活剂 纤溶系统 凝血系统 家兔

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rhIL-10对小鼠T淋巴细胞及NK细胞活性的影响 被引量：2

6

作者 陈飞虎 路景涛 +1 位作者 陈敏珠 智强 《安徽医科大学学报》 CAS 1999年第4期258-259,共2页

目的　研究ｒｈ Ｉ Ｌ１０ 对小鼠免疫功能的影响。方法　用 Ｍ Ｔ Ｔ 还原法检测 Ｃｏｎ Ａ 诱导的 Ｔ 淋巴细胞增殖试验，中性红染色法检测 Ｎ Ｋ 细胞活性。结果　ｒｈ Ｉ Ｌ１０ 能抑制小鼠 Ｔ 淋巴细胞及 Ｎ Ｋ 细胞活性（ Ｐ... 目的　研究ｒｈ Ｉ Ｌ１０ 对小鼠免疫功能的影响。方法　用 Ｍ Ｔ Ｔ 还原法检测 Ｃｏｎ Ａ 诱导的 Ｔ 淋巴细胞增殖试验，中性红染色法检测 Ｎ Ｋ 细胞活性。结果　ｒｈ Ｉ Ｌ１０ 能抑制小鼠 Ｔ 淋巴细胞及 Ｎ Ｋ 细胞活性（ Ｐ＜ ００１） ，这种抑制作用随剂量增加而加强。结论　ｒｈ Ｉ Ｌ１０ 能抑制小鼠 Ｔ 淋巴细胞及 Ｎ Ｋ 细胞活性，并呈剂量依赖关系。 展开更多

关键词 白细胞介素10 T细胞 NK细胞 RHIL-10 小鼠

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重组葡激酶及其在大肠杆菌中高效表达与纯化 被引量：1

7

作者 智强 周青 +2 位作者 任斌 朱年春 赵丽萍 《安徽医科大学学报》 CAS 2001年第1期18-21,共4页

目的　研究高效表达葡激酶载体的构建及其体外表达与产物的纯化。方法　用PCR方法扩增葡激酶cDNA ,插入质粒pET 2 2b中构建成表达载体 ,转化入大肠杆菌BL2 1(DE3) ,经IPTG诱导表达 ,表达产物用Q Poros和S Sepharose纯化。 结果　经限制... 目的　研究高效表达葡激酶载体的构建及其体外表达与产物的纯化。方法　用PCR方法扩增葡激酶cDNA ,插入质粒pET 2 2b中构建成表达载体 ,转化入大肠杆菌BL2 1(DE3) ,经IPTG诱导表达 ,表达产物用Q Poros和S Sepharose纯化。 结果　经限制性内切酶酶切图谱分析和DNA序列测定证明所构建质粒为葡激酶重组质粒 ,体外表达产物经离子交换纯化后HPLC纯度达 98%以上 ,SDS PAGE和WesternBlot实验证实该产物为葡激酶。结论　成功构建了重组葡激酶表达载体 ,并经表达纯化获得高纯度葡激酶 ,为产业化和临床应用奠定了良好基础。 展开更多

关键词 聚合酶链反应 葡糖激酶 分离 提纯 大肠杆菌 r-SAK 质粒 HPLC 离子交换 重组葡激酶

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重组人白细胞介素10对角朊细胞增殖及产生细胞因子的影响 被引量：1

8

作者 陈飞虎 陈敏珠 +2 位作者 李俊 汪光宝 智强 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2004年第12期1377-1380,共4页

目的 :研究重组人白细胞介素 10 (rhIL 10 )对无血清培养的角朊细胞增殖和产生细胞因子的影响 ,探讨其治疗银屑病的作用机制。方法 :用四甲基偶氮唑蓝比色法 (MTT)测定其对细胞增殖的影响 ;小鼠胸腺细胞增殖法检测白细胞介素 1(IL 1) ;E... 目的 :研究重组人白细胞介素 10 (rhIL 10 )对无血清培养的角朊细胞增殖和产生细胞因子的影响 ,探讨其治疗银屑病的作用机制。方法 :用四甲基偶氮唑蓝比色法 (MTT)测定其对细胞增殖的影响 ;小鼠胸腺细胞增殖法检测白细胞介素 1(IL 1) ;ELISA法检测白细胞介素 6 (IL 6 )、白细胞介素 8(IL 8)。结果 :重组人白细胞介素 10抑制角朊细胞增殖与IL 1、IL 6及IL 8的分泌 ,并呈剂量依赖关系。结论 :重组人白细胞介素 10抑制角朊细胞与细胞因子分泌 ,可能是治疗银屑病的作用机理之一。 展开更多

关键词 重组人白细胞介素10 角朊细胞 细胞因子 银屑病

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重组葡激酶对犬股动脉血栓的再通作用 被引量：3

9

作者 陈飞虎 杨军 +3 位作者 刘建辉 王静 智强 刘颖雪 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第5期447-449,共3页

目的　研究重组葡激酶对体内血栓的溶解作用。方法　采用狗股动脉富含红细胞血栓形成模型。结果　重组葡激酶明显减少狗股动脉富含红细胞血栓的长度及湿重，促进栓塞动脉再通，给药后，动脉血流量明显增加，再通率提高。结论　重组葡激... 目的　研究重组葡激酶对体内血栓的溶解作用。方法　采用狗股动脉富含红细胞血栓形成模型。结果　重组葡激酶明显减少狗股动脉富含红细胞血栓的长度及湿重，促进栓塞动脉再通，给药后，动脉血流量明显增加，再通率提高。结论　重组葡激酶具有极显著溶解犬实验性动脉血栓的作用，等剂量条件下。 展开更多

关键词 重组葡激酶 动脉血栓 溶栓疗法

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MTT法检测重组人内抑素对人内皮细胞增殖的影响 被引量：1

10

作者 智强 任斌 +2 位作者 朱年春 张礼秀 刘建辉 《安徽医科大学学报》 CAS 2001年第3期188-191,共4页

目的　探讨观察重组人内抑素对人血管内皮细胞增殖影响的方法。方法　采用MTT法观察不同浓度重组人胎儿内抑素是否对碱性成纤维细胞生长因子刺激的人血管内皮细胞系ECV增殖产生抑制作用。结果　MTT法分析显示细胞活力与光密度改变之间... 目的　探讨观察重组人内抑素对人血管内皮细胞增殖影响的方法。方法　采用MTT法观察不同浓度重组人胎儿内抑素是否对碱性成纤维细胞生长因子刺激的人血管内皮细胞系ECV增殖产生抑制作用。结果　MTT法分析显示细胞活力与光密度改变之间存在线性关系 ,重组人内抑素可抑制胎儿血管内皮细胞ECV的增殖 ,半数抑制浓度约为 3 5 0mg·L-1。结论　MTT法检测重组人内抑素对人血管内皮细胞增殖的抑制作用准确可靠、操作简便。 展开更多

关键词 比色法 内皮血管 MTT法 细胞增殖 重组人内抑素 血管生成抑制剂 抗癌药

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重组人白细胞介素10单克隆抗体的制备 被引量：2

11

作者 陈飞虎 盛晓蓉 +2 位作者 吴亦伦 陈敏珠 智强 《安徽医科大学学报》 CAS 2000年第2期104-106,共3页

目的　制备重组人白细胞介素 10 (rhIL 10 )单克隆抗体。方法　应用鼠 鼠杂交瘤技术建立分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞系 ,ELISA检测杂交瘤细胞培养上清、腹水效价 ,双向免疫扩散试验进行亚类鉴定 ,Giemsa染色镜下计数杂交瘤染色体数目... 目的　制备重组人白细胞介素 10 (rhIL 10 )单克隆抗体。方法　应用鼠 鼠杂交瘤技术建立分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞系 ,ELISA检测杂交瘤细胞培养上清、腹水效价 ,双向免疫扩散试验进行亚类鉴定 ,Giemsa染色镜下计数杂交瘤染色体数目。结果　获得了 2株能分泌抗rhIL 10单克隆抗体的杂交瘤细胞系 (1D3、2A3) ,无血清培养液效价为 1∶5 12、1∶2 5 6 ,腹水效价 1∶10 5、1∶10 4 。单克隆抗体为IgG2 亚类 ,染色体数目 98～ 10 3条。 2株杂交瘤细胞体外传代培养6个月以上 ,ELISA检测抗体滴度无明显降低。结论　制备的 2株单克隆抗体效价高 。 展开更多

关键词 重组人白细胞介素10 单克隆抗体 杂交瘤

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肿瘤治疗新思路——抗血管生成来治疗实体瘤 被引量：1

12

作者 陈飞虎 智强 杨军 《医学与哲学》 1999年第9期40-41,共2页

关键词 肿瘤 治疗 抗血管生成

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二连体人干细胞因子基因的构建及其在昆虫细胞中的表达 被引量：1

13

作者 唐晶 朱洁 +3 位作者 智强 焦瑞清 韩俊海 秦浚川 《南京大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期166-172,共7页

应用DNA重组技术构建两端为人干细胞因子 (hSCF) 1～ 16 5肽编码区 ,中间为柔性连接肽 (GGGGSGGGGSGG)编码区的头尾相连的二连体基因 (dSCF) ,并将其插入杆状病毒转移载体 pVL1392中 .重组转移载体 pVL1392 dSCF与野生型苜蓿夜蛾核型... 应用DNA重组技术构建两端为人干细胞因子 (hSCF) 1～ 16 5肽编码区 ,中间为柔性连接肽 (GGGGSGGGGSGG)编码区的头尾相连的二连体基因 (dSCF) ,并将其插入杆状病毒转移载体 pVL1392中 .重组转移载体 pVL1392 dSCF与野生型苜蓿夜蛾核型多角体病毒AcNPVDNA共转染草地贪夜蛾细胞Sf9,经胞内同源重组和 4轮筛选获得纯净的重组病毒AcNPV dSCF .重组病毒感染Sf9单层培养细胞时 ,主要以分泌形式表达二连体蛋白 ,经MTT比色法测得dSCF的表达量约为 1180units/3× 10 6cells .WesternBlotting鉴定了昆虫细胞表达的重组人二连体干细胞因子 (rhdSCF) ,两种主要产物的分子量分别为 4 0kDa、4 9kDa . 展开更多

关键词 二连体人干细胞因子 昆虫细胞 共价二聚体 昆虫表达体系 DAN重组技术 基因表达 基因重组

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盐诱导法高效表达重组人内抑素 被引量：1

14

作者 朱年春 智强 +2 位作者 张礼秀 陈晓明 刘建辉 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期359-360,共2页

关键词 BL-21(DE3)宿主菌 T7RNA启动子 重组人内抑素

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重组葡激酶对实验性猫冠状动脉血栓的影响 被引量：2

15

作者 韩卫星 陈飞虎 智强 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第3期316-318,共3页

目的　研究重组葡激酶对实验性冠状动脉血栓的溶栓作用。方法　采用实验性猫冠状动脉血栓形成模型。结果　重组葡激酶显著降低猫冠脉血栓切面与冠脉管腔比值 ,减少心肌缺血范围 ,给药后对心电图也有一定程度的改善。

关键词 重组葡激酶 血栓模型 冠状动脉 心电图

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重组人内抑素对内皮细胞增殖的影响

16

作者 任斌 朱年春 +2 位作者 智强 罗昭锋 王玉珍 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期195-201,共7页

目的　探讨原核表达的可溶性重组人内抑素(rhEndo)对ECV 30 4内皮细胞和原代培养兔主动脉内皮细胞增殖的影响。方法　利用酶标仪进行噻唑蓝 (MTT)法检测 ,同时采用倒置相差显微镜、电子显微镜、流式细胞仪、半胱天冬酶 3活性分析观察该... 目的　探讨原核表达的可溶性重组人内抑素(rhEndo)对ECV 30 4内皮细胞和原代培养兔主动脉内皮细胞增殖的影响。方法　利用酶标仪进行噻唑蓝 (MTT)法检测 ,同时采用倒置相差显微镜、电子显微镜、流式细胞仪、半胱天冬酶 3活性分析观察该内抑素对碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)刺激的血管内皮细胞增殖的影响。结果　该rhEndo明显抑制ECV 30 4细胞的增殖 ,MultiCycleDNACycle软件分析表明细胞增殖阻滞在G1期 ,流式细胞仪检测发现该内抑素可诱导ECV 30 4细胞凋亡 ,且与半胱天冬酶 3活性增强有关 ,但对原代培养的兔主动脉内皮细胞增殖并未产生明显的作用。结论　内抑素可明显抑制ECV 30 4细胞增殖并诱导其发生凋亡 ,但对原代培养的兔主动脉内皮细胞增殖没有明显的影响 ,这将有利于与血管新生有关的疾病如癌症等的治疗。 展开更多

关键词 重组人内抑素 内皮细胞增殖 细胞增殖 细胞凋亡

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重组人白细胞介素-10对银屑病患者外周血单个核细胞的作用

17

作者 陈英 智强 朱年春 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2000年第4期353-355,共3页

关键词 重组人白细胞介素-10 银屑病 外周血单个核细胞

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