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杭州桐庐无规定马属动物疫病区虫媒监测与风险分析 被引量:1
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作者 陈云蕾 张泽林 +7 位作者 丁林玲 徐颂明 程国华 刘璐 袁伟琴 甘凌峰 张鲲 姜余捷 《中国兽医杂志》 北大核心 2025年第2期133-140,共8页
为建设杭州桐庐无规定马属动物疫病区,掌握无疫区内虫媒生物的种群构成、分布和特点,全面评估虫媒传播马属动物疫病病原的风险,本调查于2020—2022年通过对相关区域的虫媒分布数量和种类及其分布情况开展调查研究,并对所采集虫媒相关马... 为建设杭州桐庐无规定马属动物疫病区,掌握无疫区内虫媒生物的种群构成、分布和特点,全面评估虫媒传播马属动物疫病病原的风险,本调查于2020—2022年通过对相关区域的虫媒分布数量和种类及其分布情况开展调查研究,并对所采集虫媒相关马属动物疫病病原进行实验室检测。结果显示,无疫区内存在一定数量和种类的蚊、蠓、蝇、虻、蜱和螨,其所涉及的马传染性贫血病毒(EIAV)、水泡性口炎病毒(VSV)、日本脑炎病毒(JEV)、西尼罗热病毒(WNV)、马脑脊髓炎病毒(EEV)(东方型和西方型)、委内瑞拉马脑脊髓炎病毒(VEEV)、非洲马瘟病毒(AHSV)、马梨形虫(EP)(泰勒虫和弩巴贝斯虫)和伊氏锥虫的检测结果均为阴性。依据上述调查和实验室检测结果,对虫媒传播相关马属动物疫病病原开展分析,认为无疫区内虫媒传播相关马属动物疫病病原的风险很低,结合环境消杀等针对性综合防控措施,为杭州第19届亚运会马术项目的开展提供保障。 展开更多
关键词 杭州桐庐无规定马属动物疫病区 虫媒 风险分析 综合防控
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绵羊PLC-γ1基因真核表达载体的构建及鉴定
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作者 袁利明 陈云蕾 +3 位作者 刘素平 丁林玲 吴兰 赛务加甫 《石河子大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2023年第4期441-448,共8页
目的旨在构建携带红色荧光蛋白(RFP)报告基因的绵羊PLC-γ1非融合性真核表达载体。方法在原有PUC57-PLC-γ1克隆载体基础上,对目的片段N端前加入P2A序列和3个连续Flag序列后使用HindⅢ酶和SalⅠ酶双酶切获得P2A-3×Flag-PLC-γ1片段... 目的旨在构建携带红色荧光蛋白(RFP)报告基因的绵羊PLC-γ1非融合性真核表达载体。方法在原有PUC57-PLC-γ1克隆载体基础上,对目的片段N端前加入P2A序列和3个连续Flag序列后使用HindⅢ酶和SalⅠ酶双酶切获得P2A-3×Flag-PLC-γ1片段,将其连接至pDsRed2-C1载体获得重组质粒pDsRed2-C1-P2A-3×Flag-PLC-γ1;然后采用Lip 2000转染试剂将该重组质粒转染至HEK-293T细胞,最后利用荧光显微镜、qRT-PCR、Western blot、免疫共沉淀(IP)和免疫荧光(IF)法鉴定重组质粒pDsRed2-C1-P2A-3×Flag-PLC-γ1的表达及亚细胞定位情况。结果双酶切和测序结果显示质粒pDsRed2-C1-P2A-3×Flag-PLC-γ1构建成功,观察到红色荧光;免疫荧光的亚细胞定位检测出PLC-γ1蛋白在细胞质中表达;qRT-PCR和Western blotting法均能检测出PLC-γ1表达,与对照组有显著性差异(P>0.01);免疫共沉淀也纯化分离出含有Flag标签的PLC-γ1蛋白。结论本研究成功构建绵羊PLC-γ1基因的真核表达载体,在P2A肽作用下实现目的蛋白PLC-γ1与DsRed2的表达,构建的载体可用于研究PLC-γ1在早期胚胎发育中的作用。 展开更多
关键词 P2A肽 PLC-γ1 绵羊 HEK-293T细胞 Flag标签
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