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引火汤调节鞘氨醇-1-磷酸受体5信号通路对肺腺癌细胞增殖的影响
被引量：
1
1
作者
王玥慧
李泉旺
+4 位作者
林事成
梁天宇
庄垚雪
高磊
刘殿娜
《世界中医药》
北大核心
2024年第20期3090-3097,共8页
目的:探讨引火汤含药血清通过调控鞘氨醇-1-磷酸受体5/Kirsten鼠类肉瘤病毒癌基因/纤维肉瘤蛋白(S1PR5/KRAS/RAF)信号通路对肺腺癌细胞增殖的影响。方法:制备引火汤含药血清。应用不同浓度含药血清干预人非小细胞肺癌细胞(A549、H1299、...
目的:探讨引火汤含药血清通过调控鞘氨醇-1-磷酸受体5/Kirsten鼠类肉瘤病毒癌基因/纤维肉瘤蛋白(S1PR5/KRAS/RAF)信号通路对肺腺癌细胞增殖的影响。方法:制备引火汤含药血清。应用不同浓度含药血清干预人非小细胞肺癌细胞(A549、H1299、PC9)24 h,确定最佳抑制浓度。使用最佳抑制浓度干预3种肺腺癌细胞24 h、48 h、72 h,确定最佳抑制时间及最敏感细胞株。采用慢病毒转染技术,构建稳定过表达S1PR5的肺腺癌细胞株,实验分为:OE NC组(空白血清+S1PR5过表达空载组)、OE S1PR5组(空白血清+S1PR5过表达组)、YHT+OE NC组(引火汤含药血清+S1PR5过表达空载组)、YHT+OE S1PR5组(引火汤含药血清+S1PR5过表达组)。采用定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)和蛋白免疫印迹检测S1PR5/KRAS/RAF信号通路信使RNA(mRNA)及蛋白的表达情况。结果:采用细胞计数(CCK-8)结果显示在24 h时10%引火汤含药血清对A549、H1299、PC9细胞的抑制作用最显著(P<0.05,P<0.01),但10%引火汤含药血清干预时无明显的时间依赖性,因此选用10%引火汤含药血清作用24 h作为干预条件。因为引火汤含药血清对PC9细胞抑制率最高,因此选用PC9细胞进行机制验证。qRT-PCR结果表明S1PR5过表达组能够上调S1PR5 mRNA的表达水平(P<0.05);引火汤干预后能够降低S1PR5、KRAS、Ras相关的C3肉毒毒素底物1(RAC1)的表达(P<0.05)。蛋白免疫印迹结果显示S1PR5过表达组S1PR5、KRAS、p-RAF1、丝裂原活化细胞外信号调节蛋白激酶1(p-MEK1)、磷脂酰肌醇3-激酶(p-PI3K)、RAC1蛋白表达显著升高(P<0.05);引火汤干预后,S1PR5、KRAS、p-RAF1、细胞外调节蛋白激酶1/2(p-ERK1/2)、RAC1蛋白表达显著降低(P<0.05)。结论:引火汤含药血清能够通过下调S1PR5/KRAS/RAF信号通路抑制肺腺癌细胞增殖。
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关键词
S1PR5
KRAS
RAF
引火汤
含药血清
慢病毒转染
增殖
肺腺癌
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职称材料
题名
引火汤调节鞘氨醇-1-磷酸受体5信号通路对肺腺癌细胞增殖的影响
被引量：
1
1
作者
王玥慧
李泉旺
林事成
梁天宇
庄垚雪
高磊
刘殿娜
机构
北京
中医
药大学
北京
中医
药大学东方
医院
肿瘤科
桐乡市中医医院重症医学科
北京
中医
药大学东方
医院
科研处
出处
《世界中医药》
北大核心
2024年第20期3090-3097,共8页
基金
国家自然科学基金项目(82174458)
中央高校基本科研业务费专项资金资助北京中医药大学新教师启动基金项目(2023-JYBXJSJJ-046)
中央高校基本科研业务费专项资金资助北京中医药大学重点攻关项目(2020-JYB-ZDGG-127)。
文摘
目的:探讨引火汤含药血清通过调控鞘氨醇-1-磷酸受体5/Kirsten鼠类肉瘤病毒癌基因/纤维肉瘤蛋白(S1PR5/KRAS/RAF)信号通路对肺腺癌细胞增殖的影响。方法:制备引火汤含药血清。应用不同浓度含药血清干预人非小细胞肺癌细胞(A549、H1299、PC9)24 h,确定最佳抑制浓度。使用最佳抑制浓度干预3种肺腺癌细胞24 h、48 h、72 h,确定最佳抑制时间及最敏感细胞株。采用慢病毒转染技术,构建稳定过表达S1PR5的肺腺癌细胞株,实验分为:OE NC组(空白血清+S1PR5过表达空载组)、OE S1PR5组(空白血清+S1PR5过表达组)、YHT+OE NC组(引火汤含药血清+S1PR5过表达空载组)、YHT+OE S1PR5组(引火汤含药血清+S1PR5过表达组)。采用定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)和蛋白免疫印迹检测S1PR5/KRAS/RAF信号通路信使RNA(mRNA)及蛋白的表达情况。结果:采用细胞计数(CCK-8)结果显示在24 h时10%引火汤含药血清对A549、H1299、PC9细胞的抑制作用最显著(P<0.05,P<0.01),但10%引火汤含药血清干预时无明显的时间依赖性,因此选用10%引火汤含药血清作用24 h作为干预条件。因为引火汤含药血清对PC9细胞抑制率最高,因此选用PC9细胞进行机制验证。qRT-PCR结果表明S1PR5过表达组能够上调S1PR5 mRNA的表达水平(P<0.05);引火汤干预后能够降低S1PR5、KRAS、Ras相关的C3肉毒毒素底物1(RAC1)的表达(P<0.05)。蛋白免疫印迹结果显示S1PR5过表达组S1PR5、KRAS、p-RAF1、丝裂原活化细胞外信号调节蛋白激酶1(p-MEK1)、磷脂酰肌醇3-激酶(p-PI3K)、RAC1蛋白表达显著升高(P<0.05);引火汤干预后,S1PR5、KRAS、p-RAF1、细胞外调节蛋白激酶1/2(p-ERK1/2)、RAC1蛋白表达显著降低(P<0.05)。结论:引火汤含药血清能够通过下调S1PR5/KRAS/RAF信号通路抑制肺腺癌细胞增殖。
关键词
S1PR5
KRAS
RAF
引火汤
含药血清
慢病毒转染
增殖
肺腺癌
Keywords
Sphingosine-1-phosphate receptor 5
Kirsten rat sarcoma
Rapid accelerated fibrosarcoma
Yinhuotang
Drug-containing serum
Lentiviral transfection
Proliferation
Lung adenocarcinoma
分类号
R273 [医药卫生—中西医结合]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
引火汤调节鞘氨醇-1-磷酸受体5信号通路对肺腺癌细胞增殖的影响
王玥慧
李泉旺
林事成
梁天宇
庄垚雪
高磊
刘殿娜
《世界中医药》
北大核心
2024
1
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