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1-磷酸神经酰胺转运蛋白对人口腔鳞状细胞癌HSC-3细胞生物学行为的影响
被引量:
2
1
作者
张湘豫
胡溢洪
+1 位作者
韩语诚
邹先琼
《吉林大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第4期875-883,共9页
目的:探讨1-磷酸神经酰胺转运蛋白(CPTP)对人口腔鳞状细胞癌HSC-3细胞生物学行为的影响,阐明其相关作用机制。方法:体外培养HSC-3细胞,分为对照组和实验组,分别采用pFlag-CMV4和pFlag-CPTP质粒进行转染,采用抗性筛选法构建稳定转染(稳转...
目的:探讨1-磷酸神经酰胺转运蛋白(CPTP)对人口腔鳞状细胞癌HSC-3细胞生物学行为的影响,阐明其相关作用机制。方法:体外培养HSC-3细胞,分为对照组和实验组,分别采用pFlag-CMV4和pFlag-CPTP质粒进行转染,采用抗性筛选法构建稳定转染(稳转) CPTP的细胞。采用Western blotting法和免疫荧光法检测2组细胞中CPTP蛋白表达水平,采用克隆形成实验和CCK-8法检测各组细胞中克隆形成数和细胞增殖活性,细胞划痕实验检测2组细胞划痕愈合率,Transwell小室实验检测2组细胞中侵袭细胞数。小鼠随机分为对照组和实验组,分别注射pFlag-CMV4稳转HSC-3细胞和pFlag-CPTP稳转HSC-3细胞,制备小鼠皮下移植瘤模型,检测2组小鼠移植瘤体积和质量。采用生物信息学方法对头颈部鳞状细胞癌(HNSCC)组织中CPTP差异表达基因进行富集分析。采用实时荧光定量PCR (RT-qPCR)法检测2组细胞中p53、血小板反应蛋白1 (THBS1)和细胞周期蛋白G2 (CCNG2) mRNA表达水平。结果:与对照组比较,实验组细胞中CPTP蛋白表达量明显增加。与对照组比较,实验组细胞中克隆形成数明显增加(P<0.01),细胞增殖活性和划痕愈合率明显升高(P<0.05或P<0.01),侵袭细胞数明显增加(P<0.01)。注射肿瘤细胞2、3和4周,与对照组比较,实验组小鼠移植瘤体积明显增加(P<0.05或P<0.01);注射肿瘤细胞4周,与对照组比较,实验组小鼠移植瘤质量明显增加(P<0.05)。生物信息学分析,在HNSCC组织中CPTP的作用可能是通过p53等信号通路介导。与对照组比较,实验组细胞中p53、THBS1和CCNG2 mRNA表达水平明显降低(P<0.01)。结论:过表达CPTP能促进HSC-3细胞增殖、迁移、侵袭和成瘤能力,CPTP通过抑制p53信号通路促进口腔鳞状细胞癌HSC-3细胞生长。
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关键词
口腔鳞状细胞癌
1-磷酸神经酰胺转运蛋白
细胞侵袭
信号通路
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职称材料
题名
1-磷酸神经酰胺转运蛋白对人口腔鳞状细胞癌HSC-3细胞生物学行为的影响
被引量:
2
1
作者
张湘豫
胡溢洪
韩语诚
邹先琼
机构
桂林医学院附属口腔医院口腔颌面外科
桂林
医学院
基础
医学院
免疫学教研室
出处
《吉林大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第4期875-883,共9页
基金
国家自然科学基金项目(81760490)
广西壮族自治区科技厅自然科学基金项目(2020GXNSFDA238026)。
文摘
目的:探讨1-磷酸神经酰胺转运蛋白(CPTP)对人口腔鳞状细胞癌HSC-3细胞生物学行为的影响,阐明其相关作用机制。方法:体外培养HSC-3细胞,分为对照组和实验组,分别采用pFlag-CMV4和pFlag-CPTP质粒进行转染,采用抗性筛选法构建稳定转染(稳转) CPTP的细胞。采用Western blotting法和免疫荧光法检测2组细胞中CPTP蛋白表达水平,采用克隆形成实验和CCK-8法检测各组细胞中克隆形成数和细胞增殖活性,细胞划痕实验检测2组细胞划痕愈合率,Transwell小室实验检测2组细胞中侵袭细胞数。小鼠随机分为对照组和实验组,分别注射pFlag-CMV4稳转HSC-3细胞和pFlag-CPTP稳转HSC-3细胞,制备小鼠皮下移植瘤模型,检测2组小鼠移植瘤体积和质量。采用生物信息学方法对头颈部鳞状细胞癌(HNSCC)组织中CPTP差异表达基因进行富集分析。采用实时荧光定量PCR (RT-qPCR)法检测2组细胞中p53、血小板反应蛋白1 (THBS1)和细胞周期蛋白G2 (CCNG2) mRNA表达水平。结果:与对照组比较,实验组细胞中CPTP蛋白表达量明显增加。与对照组比较,实验组细胞中克隆形成数明显增加(P<0.01),细胞增殖活性和划痕愈合率明显升高(P<0.05或P<0.01),侵袭细胞数明显增加(P<0.01)。注射肿瘤细胞2、3和4周,与对照组比较,实验组小鼠移植瘤体积明显增加(P<0.05或P<0.01);注射肿瘤细胞4周,与对照组比较,实验组小鼠移植瘤质量明显增加(P<0.05)。生物信息学分析,在HNSCC组织中CPTP的作用可能是通过p53等信号通路介导。与对照组比较,实验组细胞中p53、THBS1和CCNG2 mRNA表达水平明显降低(P<0.01)。结论:过表达CPTP能促进HSC-3细胞增殖、迁移、侵袭和成瘤能力,CPTP通过抑制p53信号通路促进口腔鳞状细胞癌HSC-3细胞生长。
关键词
口腔鳞状细胞癌
1-磷酸神经酰胺转运蛋白
细胞侵袭
信号通路
Keywords
Oral squamous cell carcinoma
Ceramide-1-phosphate transfer protein
Cell invasion
Signaling pathway
分类号
R734.2 [医药卫生—肿瘤]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
1-磷酸神经酰胺转运蛋白对人口腔鳞状细胞癌HSC-3细胞生物学行为的影响
张湘豫
胡溢洪
韩语诚
邹先琼
《吉林大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2023
2
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