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Tmem121肝细胞特异性敲除小鼠模型的建立与鉴定
1
作者
王月
何国良
+2 位作者
李兰玉
吴倩
周军媚
《安徽医科大学学报》
北大核心
2025年第9期1591-1598,共8页
目的建立并鉴定跨膜蛋白121(Tmem121)肝细胞特异性基因敲除小鼠。方法利用CRISPR/Cas9与Cre-loxp系统构建Tmem121^(flox/+)/Cre^(+)与Tmem121^(flox/flox)小鼠,再将两种小鼠进行杂交繁育获得后代小鼠。提取后代小鼠的鼠尾DNA,通过PCR鉴...
目的建立并鉴定跨膜蛋白121(Tmem121)肝细胞特异性基因敲除小鼠。方法利用CRISPR/Cas9与Cre-loxp系统构建Tmem121^(flox/+)/Cre^(+)与Tmem121^(flox/flox)小鼠,再将两种小鼠进行杂交繁育获得后代小鼠。提取后代小鼠的鼠尾DNA,通过PCR鉴定小鼠基因型,获得肝细胞特异性Tmem121基因敲除小鼠(Tmem121^(flox/flox)/Cre^(+),Tmem121^(ΔHep))。观察并分析敲除小鼠与对照小鼠的生长繁殖及器官发育情况。利用PCR及Western blot法验证Tmem121在小鼠原代肝细胞中敲除效率。利用CellMask^(TM)深红质膜染色法比较对照组小鼠与敲除组小鼠原代肝细胞的形态差异并进行统计学分析。结果通过小鼠基因型鉴定,成功获得Tmem121^(flox/flox)/Cre^(+)小鼠。敲除小鼠与对照小鼠在体质量、繁殖能力及肝脏的生长发育方面均无明显差异。肝细胞特异性敲除Tmem121基因对肝组织形态结构及病理特征无明显影响。与对照组相比,敲除组小鼠原代肝细胞Tmem121在mRNA及蛋白水平均明显降低(P<0.01)。CellMask^(TM)深红质膜染色结果显示Tmem121敲除组小鼠的原代肝细胞的双核比例增多(P<0.05),细胞表面积减小(P<0.001)。结论成功建立Tmem121肝细胞特异性基因敲除小鼠模型,为进一步研究Tmem121基因在肝脏疾病中的作用及机制提供了动物模型支持。
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关键词
跨膜蛋白121
特异性敲除
CRE/LOXP系统
肝细胞
基因型鉴定
原代肝细胞分离
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职称材料
血清AFP临界值判断对肝癌诊断的影响
被引量：
7
2
作者
霍群
刘杰
+1 位作者
陈莉
廖维甲
《广西师范大学学报（自然科学版）》
CAS
北大核心
2014年第3期121-124,共4页
为探讨血清AFP诊断肝癌的合理临界值,本研究收集肝癌患者35例、正常对照者35例。血清AFP检测采用电化学发光法和酶联免疫吸附法(ELISA)定量,结果用t检验和χ2检验进行统计学分析。2种方法检测血清AFP水平显著相关,相关系数为0.978,检测...
为探讨血清AFP诊断肝癌的合理临界值,本研究收集肝癌患者35例、正常对照者35例。血清AFP检测采用电化学发光法和酶联免疫吸附法(ELISA)定量,结果用t检验和χ2检验进行统计学分析。2种方法检测血清AFP水平显著相关,相关系数为0.978,检测值无显著性差异,P>0.05。二者ROC曲线下面积分别为0.890、0.880,说明血清AFP水平对肝癌诊断价值较高。按照约登指数最大原则确定血清AFP电化学发光法诊断肝癌的临界值为3.25μg/L,其敏感度为74.3%,特异度为94.3%,准确度为84.3%;ELISA法诊断肝癌的临界值为1.118μg/L,其敏感度为62.9%,特异度为100%,准确度为81.4%。而以目前常规临界值20μg/L来分析,则电化学发光法检测AFP诊断肝癌的敏感度仅为45.7%,特异度100%,准确度72.9%;ELISA法敏感度48.6%,特异度100%,准确度74.3%。因此合理降低临界值可有效提高血清AFP水平对肝癌的诊断价值。
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关键词
肝癌
AFP
临界值
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职称材料
题名
Tmem121肝细胞特异性敲除小鼠模型的建立与鉴定
1
作者
王月
何国良
李兰玉
吴倩
周军媚
机构
桂林
医学院
附属
医院
广西肝脏损伤与修复分子
医学
重点
实验室
桂林
医学院
实验
动物中心
桂林
医学院
临床
医学院
桂林
医学院
中美健康与疾病脂质研究中心
桂林
医学院
附属
医院
广西神经鞘脂代谢相关疾病基础研究重点
实验室
桂林医学院附属医院肝胆胰外科实验室
出处
《安徽医科大学学报》
北大核心
2025年第9期1591-1598,共8页
基金
国家自然科学基金项目(编号:82060124、82260529)
广西科技厅中央引导地方科技发展资金项目(编号:桂科ZY21195024)
大学生创新创业训练计划项目(编号:202210601005)。
文摘
目的建立并鉴定跨膜蛋白121(Tmem121)肝细胞特异性基因敲除小鼠。方法利用CRISPR/Cas9与Cre-loxp系统构建Tmem121^(flox/+)/Cre^(+)与Tmem121^(flox/flox)小鼠,再将两种小鼠进行杂交繁育获得后代小鼠。提取后代小鼠的鼠尾DNA,通过PCR鉴定小鼠基因型,获得肝细胞特异性Tmem121基因敲除小鼠(Tmem121^(flox/flox)/Cre^(+),Tmem121^(ΔHep))。观察并分析敲除小鼠与对照小鼠的生长繁殖及器官发育情况。利用PCR及Western blot法验证Tmem121在小鼠原代肝细胞中敲除效率。利用CellMask^(TM)深红质膜染色法比较对照组小鼠与敲除组小鼠原代肝细胞的形态差异并进行统计学分析。结果通过小鼠基因型鉴定,成功获得Tmem121^(flox/flox)/Cre^(+)小鼠。敲除小鼠与对照小鼠在体质量、繁殖能力及肝脏的生长发育方面均无明显差异。肝细胞特异性敲除Tmem121基因对肝组织形态结构及病理特征无明显影响。与对照组相比,敲除组小鼠原代肝细胞Tmem121在mRNA及蛋白水平均明显降低(P<0.01)。CellMask^(TM)深红质膜染色结果显示Tmem121敲除组小鼠的原代肝细胞的双核比例增多(P<0.05),细胞表面积减小(P<0.001)。结论成功建立Tmem121肝细胞特异性基因敲除小鼠模型,为进一步研究Tmem121基因在肝脏疾病中的作用及机制提供了动物模型支持。
关键词
跨膜蛋白121
特异性敲除
CRE/LOXP系统
肝细胞
基因型鉴定
原代肝细胞分离
Keywords
transmembrane protein121
specific knockout
Cre/LoxP system
hepatocytes
genotype identification
primary hepatocyte isolation
分类号
R332 [医药卫生—人体生理学]
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职称材料
题名
血清AFP临界值判断对肝癌诊断的影响
被引量：
7
2
作者
霍群
刘杰
陈莉
廖维甲
机构
桂林
医学院
生物化学与分子生物学教研室
桂林
医学院
附属
医院
肝胆胰
外科
桂林医学院附属医院肝胆胰外科实验室
出处
《广西师范大学学报（自然科学版）》
CAS
北大核心
2014年第3期121-124,共4页
基金
广西自然科学基金资助项目(2010GXNSFC013023)
国家自然科学基金资助项目(81260328)
文摘
为探讨血清AFP诊断肝癌的合理临界值,本研究收集肝癌患者35例、正常对照者35例。血清AFP检测采用电化学发光法和酶联免疫吸附法(ELISA)定量,结果用t检验和χ2检验进行统计学分析。2种方法检测血清AFP水平显著相关,相关系数为0.978,检测值无显著性差异,P>0.05。二者ROC曲线下面积分别为0.890、0.880,说明血清AFP水平对肝癌诊断价值较高。按照约登指数最大原则确定血清AFP电化学发光法诊断肝癌的临界值为3.25μg/L,其敏感度为74.3%,特异度为94.3%,准确度为84.3%;ELISA法诊断肝癌的临界值为1.118μg/L,其敏感度为62.9%,特异度为100%,准确度为81.4%。而以目前常规临界值20μg/L来分析,则电化学发光法检测AFP诊断肝癌的敏感度仅为45.7%,特异度100%,准确度72.9%;ELISA法敏感度48.6%,特异度100%,准确度74.3%。因此合理降低临界值可有效提高血清AFP水平对肝癌的诊断价值。
关键词
肝癌
AFP
临界值
Keywords
hepatic cancer
AFP
cut-off value
分类号
R446.61 [医药卫生—诊断学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
Tmem121肝细胞特异性敲除小鼠模型的建立与鉴定
王月
何国良
李兰玉
吴倩
周军媚
《安徽医科大学学报》
北大核心
2025
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
血清AFP临界值判断对肝癌诊断的影响
霍群
刘杰
陈莉
廖维甲
《广西师范大学学报（自然科学版）》
CAS
北大核心
2014
7
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职称材料
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