目的观察吡非尼酮对大鼠心肌纤维化的作用,并探讨其机制。方法选取8周龄SPF级雄性SD大鼠24只,构建大鼠心房纤维化模型,随机分为假手术组、模型组、吡非尼酮低剂量组和吡非尼酮高剂量组,每组6只。假手术组和模型组分别经尾静脉注射生理...目的观察吡非尼酮对大鼠心肌纤维化的作用,并探讨其机制。方法选取8周龄SPF级雄性SD大鼠24只,构建大鼠心房纤维化模型,随机分为假手术组、模型组、吡非尼酮低剂量组和吡非尼酮高剂量组,每组6只。假手术组和模型组分别经尾静脉注射生理盐水和异丙肾上腺素,吡非尼酮低剂量组和吡非尼酮高剂量组在注射异丙肾上腺素的基础上分别灌胃不同剂量的吡非尼酮。Masson染色检测心肌纤维化程度,免疫组织化学染色检测胶原组织Ⅰ型(Collogen-1)、核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NOD-like receptor thermal protein domain associated protein 3,NLRP3)炎性小体、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1(cysteinyl aspartate-specific proteinase-1,Caspase-1)的表达,Western blot检测Collogen-1和心房消皮素D(gasdermin D,GSDMD)的表达。结果与假手术组比较,模型组心肌纤维化改变显著,Collogen-1、NLRP3、Caspase-1和GSDMD表达显著升高,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,吡非尼酮低剂量组和吡非尼酮高剂量组心肌纤维化程度显著减轻,Collogen-1、NLRP3、Caspase-1和GSDMD表达显著降低,差异有统计学意义[(8.14±1.40)%,(6.56±0.75)%vs(22.15±2.57)%,P<0.05;0.14±0.03 vs 0.33±0.05,0.42±0.13,P<0.05;(10.34±1.40)%,(10.33±3.40)%vs(23.22±1.99)%,P<0.05;(15.67±0.56)%,(17.33±0.78)%vs(22.87±1.92)%,P<0.05;0.43±0.06,0.46±0.11 vs 0.65±0.03,P<0.05]。结论吡非尼酮通过NLRP3/Caspase-1/GSDMD信号轴抑制心肌细胞焦亡,减轻心肌纤维化。展开更多
目的探讨双环醇对心肌纤维化模型大鼠的治疗作用及其可能的作用机制。方法选择无特定病原体级雄性SD大鼠24只,随机分为假手术组、模型组、低剂量组及高剂量组,每组6只。除假手术组外,其他各组尾静脉注射异丙肾上腺素5 mg/(kg·d)建...目的探讨双环醇对心肌纤维化模型大鼠的治疗作用及其可能的作用机制。方法选择无特定病原体级雄性SD大鼠24只,随机分为假手术组、模型组、低剂量组及高剂量组,每组6只。除假手术组外,其他各组尾静脉注射异丙肾上腺素5 mg/(kg·d)建立大鼠心肌纤维化模型,低剂量组、高剂量组分别按照100、200 mg/(kg·d)双环醇进行灌胃治疗,连续给药14 d。采用苏木精-伊红染色分析心肌损伤程度,Masson染色检测心肌纤维化程度,Western blot法检测心肌胶原蛋白Ⅰ、胶原蛋白Ⅲ、α平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、甲基转移酶样蛋白3(methyltransferase-like protein 3(METTL3))、α-酮戊二酸依赖性双加氧酶ALKB同源物5(α-ketoglutarate-dependent dioxygenase alkB homolog5,ALKBH5)及YTH家族蛋白1(YTH domain family protein 1,YTHDF1)表达。结果与假手术组比较,模型组心肌细胞坏死程度明显升高,心肌纤维化程度增高;与模型组比较,低剂量组、高剂量组心肌细胞破裂和坏死程度明显降低,心肌纤维化程度明显改善。与假手术组比较,模型组心肌组织胶原蛋白Ⅰ、胶原蛋白Ⅲ、α-SMA、METTL3及YTHDF1表达明显升高(P<0.05),模型组ALKBH5表达明显降低(0.58±0.02 vs 0.88±0.07,P<0.05)。与模型组比较,低剂量组、高剂量组心肌组织胶原蛋白Ⅰ、胶原蛋白Ⅲ、α-SMA、METTL3及YTHDF1表达明显降低,ALKBH5表达明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论双环醇可有效缓解异丙肾上腺素诱导的心肌纤维化大鼠心肌结构损伤和间质胶原纤维化沉积,其机制可能与m^(6)A甲基化修饰相关。展开更多
文摘目的观察吡非尼酮对大鼠心肌纤维化的作用,并探讨其机制。方法选取8周龄SPF级雄性SD大鼠24只,构建大鼠心房纤维化模型,随机分为假手术组、模型组、吡非尼酮低剂量组和吡非尼酮高剂量组,每组6只。假手术组和模型组分别经尾静脉注射生理盐水和异丙肾上腺素,吡非尼酮低剂量组和吡非尼酮高剂量组在注射异丙肾上腺素的基础上分别灌胃不同剂量的吡非尼酮。Masson染色检测心肌纤维化程度,免疫组织化学染色检测胶原组织Ⅰ型(Collogen-1)、核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NOD-like receptor thermal protein domain associated protein 3,NLRP3)炎性小体、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1(cysteinyl aspartate-specific proteinase-1,Caspase-1)的表达,Western blot检测Collogen-1和心房消皮素D(gasdermin D,GSDMD)的表达。结果与假手术组比较,模型组心肌纤维化改变显著,Collogen-1、NLRP3、Caspase-1和GSDMD表达显著升高,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,吡非尼酮低剂量组和吡非尼酮高剂量组心肌纤维化程度显著减轻,Collogen-1、NLRP3、Caspase-1和GSDMD表达显著降低,差异有统计学意义[(8.14±1.40)%,(6.56±0.75)%vs(22.15±2.57)%,P<0.05;0.14±0.03 vs 0.33±0.05,0.42±0.13,P<0.05;(10.34±1.40)%,(10.33±3.40)%vs(23.22±1.99)%,P<0.05;(15.67±0.56)%,(17.33±0.78)%vs(22.87±1.92)%,P<0.05;0.43±0.06,0.46±0.11 vs 0.65±0.03,P<0.05]。结论吡非尼酮通过NLRP3/Caspase-1/GSDMD信号轴抑制心肌细胞焦亡,减轻心肌纤维化。
文摘目的探讨双环醇对心肌纤维化模型大鼠的治疗作用及其可能的作用机制。方法选择无特定病原体级雄性SD大鼠24只,随机分为假手术组、模型组、低剂量组及高剂量组,每组6只。除假手术组外,其他各组尾静脉注射异丙肾上腺素5 mg/(kg·d)建立大鼠心肌纤维化模型,低剂量组、高剂量组分别按照100、200 mg/(kg·d)双环醇进行灌胃治疗,连续给药14 d。采用苏木精-伊红染色分析心肌损伤程度,Masson染色检测心肌纤维化程度,Western blot法检测心肌胶原蛋白Ⅰ、胶原蛋白Ⅲ、α平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、甲基转移酶样蛋白3(methyltransferase-like protein 3(METTL3))、α-酮戊二酸依赖性双加氧酶ALKB同源物5(α-ketoglutarate-dependent dioxygenase alkB homolog5,ALKBH5)及YTH家族蛋白1(YTH domain family protein 1,YTHDF1)表达。结果与假手术组比较,模型组心肌细胞坏死程度明显升高,心肌纤维化程度增高;与模型组比较,低剂量组、高剂量组心肌细胞破裂和坏死程度明显降低,心肌纤维化程度明显改善。与假手术组比较,模型组心肌组织胶原蛋白Ⅰ、胶原蛋白Ⅲ、α-SMA、METTL3及YTHDF1表达明显升高(P<0.05),模型组ALKBH5表达明显降低(0.58±0.02 vs 0.88±0.07,P<0.05)。与模型组比较,低剂量组、高剂量组心肌组织胶原蛋白Ⅰ、胶原蛋白Ⅲ、α-SMA、METTL3及YTHDF1表达明显降低,ALKBH5表达明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论双环醇可有效缓解异丙肾上腺素诱导的心肌纤维化大鼠心肌结构损伤和间质胶原纤维化沉积,其机制可能与m^(6)A甲基化修饰相关。
文摘目的研究瘦素预处理对心肌缺血再灌注损伤(myocardial ischemia reperfusion injury, MIRI)模型SD大鼠心肌细胞自噬的影响。方法将18只成年雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组和预处理组,每组6只。假手术组仅开胸不结扎血管;模型组和预处理组大鼠用绳栓法建立MIRI模型;预处理组建模前行瘦素预处理;用TTC染色检测心肌梗死面积,苏木精-伊红染色检测心肌损伤程度,采用Western blot法检测大鼠心肌P62和自噬微管相关蛋白轻链3(LC3B)蛋白表达。结果与假手术组比较,模型组和预处理组大鼠心肌梗死面积增大,心肌损伤评分升高(P<0.05),模型组大鼠P62蛋白表达显著升高,LC3B蛋白表达显著降低;预处理组大鼠心肌组织P62蛋白和LC3B蛋白表达均升高。与模型组比较,预处理组大鼠心肌梗死面积缩小[(17.83±1.86)%vs(32.33±2.29)%],心肌损伤评分程度明显减轻[(0.67±0.41)%vs(1.67±0.75)%],P62蛋白表达显著降低(0.21±0.02 vs 0.34±0.04)、LC3B蛋白表达显著升高(0.34±0.04 vs 0.24±0.04,P<0.05)。结论瘦素预处理可促进LC3B蛋白生成,降低P62蛋白表达,通过诱导心肌细胞自噬减轻MIRI。
文摘目的 探讨微小RNA-346(miR-346)通过抑制心肌细胞焦亡减轻大鼠心肌缺血再灌注(IR)损伤的作用机制。方法 选择SPF级雄性SD大鼠24只,随机分为假手术组、IR组、空白转染组和高表达组(n=6),空白转染组及高表达组分别注射空白腺相关病毒、腺相关病毒miR-346预处理。采用免疫组织化学和Western blot法检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1(Caspase-1)、消皮素D(GSDMD)表达。结果 与假手术组比较,IR组miR-346表达明显降低(0.94±0.05 vs 3.00±0.13,P<0.05);与IR组比较,高表达组miR-346表达明显升高(2.21±0.27 vs 0.94±0.05,P<0.05)。与假手术组比较,IR组心肌损伤程度、Caspase-1和GSDMD表达明显升高(P<0.05);与IR组比较,高表达组心肌损伤程度、Caspase-1和GSDMD表达明显降低(P<0.05)。结论 miR-346可减轻大鼠心肌IR损伤程度,其机制可能与抑制心肌细胞焦亡Caspase-1/GSDMD信号途径有关。
