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Ad-hBMP-2/GFP转染兔骨髓间充质干细胞体外骨生成的实验研究被引量：6: 1; 作者宁寅宽李强 +3 位作者蔡伟良武成聪陈佳滨石正松《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期264-268,共5页; 目的观察Ad-h BMP-2/GFP转染兔骨髓间充质干细胞(BMSCs)体外骨生成中钙化斑形成,并对钙化斑元素构成进行研究。方法用携带h BMP2和GFP基因的腺病毒转染细胞,通过RT-PCR检测转染后BMSCs h BMP-2基因的表达,通过倒置荧光显微镜、钙结节茜... 展开更多; 关键词重组腺病毒骨形态生发蛋白骨髓间充质干细胞扫描电镜能谱分析; 在线阅读下载PDF 职称材料

胶质细胞源性神经营养因子基因修饰的施万细胞复合胶原-壳聚糖神经支架对大鼠坐骨神经缺损的修复作用被引量：5: 2; 作者辛林伟王梨明 +2 位作者唐际存李朝旭李强《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期655-661,共7页; 目的探讨胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)基因修饰的施万细胞复合胶原-壳聚糖神经支架移植对大鼠坐骨神经长距离缺损的修复作用。方法建立大鼠左侧坐骨神经8 mm缺损模型,并随机分为3组,分别给予GDNF基因修饰的施万细胞复合胶原-壳聚糖... 展开更多; 关键词坐骨神经修复胶质细胞源性神经营养因子神经支架; 在线阅读下载PDF 职称材料

Ad-BMP-2/GFP转染兔骨髓间充质干细胞前后生物学特性的研究被引量：3: 3; 作者宁寅宽李强 +3 位作者蔡伟良武成聪陈佳滨石正松《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期1387-1392,共6页; 目的对Ad-BMP-2/GFP转染兔骨髓间充质干细胞(BMSCs)前后的生物学特性进行观察。方法采用密度梯度离心结合贴壁培养法分离获取第10代兔BMSCs,应用流式细胞仪检测细胞表面抗原CD44、CD45、CD29的表达,用携带BMP2和GFP基因的腺病毒转染细... 展开更多; 关键词骨髓间充质干细胞骨形态发生蛋白2 腺病毒载体生物学特性基因治疗 BONE morphogenetic PROTEIN 2; 在线阅读下载PDF 职称材料

绿色荧光蛋白标记兔BMSCs体外成骨的定量能谱分析被引量：3: 4; 作者宁寅宽李强 +3 位作者蔡伟良武成聪陈佳滨石正松《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2015年第4期415-418,共4页; 目的观察绿色荧光蛋白(GFP)标记的兔骨髓间充质干细胞(BMSCs)成骨诱导后形态学改变和体外骨生成中矿化钙结节的形成,并结合扫描电镜和X射线能谱分析技术(SEM/EDS)对矿化钙结节元素进行定量能谱分析。方法用携带GFP基因的腺病毒转染兔BM... 展开更多; 关键词重组腺病毒绿色荧光蛋白骨髓间充质干细胞扫描电镜能谱分析; 在线阅读下载PDF 职称材料

组织工程骨表面微观形貌和生物矿化的实验研究被引量：2: 5; 作者宁寅宽李强 +3 位作者蔡伟良武成聪陈佳滨石正松《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2015年第2期168-172,共5页; 目的：用绿色荧光蛋白（ GFP）标记结合扫描电镜和X射线能谱分析（ SEM/EDS）技术对组织工程骨的表面微观形貌和生物矿化进行观测,以评价脱钙骨（ DBM ）支架体外构建组织工程骨的生物性能。方法用重组腺病毒介导GFP基因转染兔骨髓间充... 展开更多; 关键词重组腺病毒绿色荧光蛋白骨髓间充质干细胞脱钙骨基质能谱分析; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名Ad-hBMP-2/GFP转染兔骨髓间充质干细胞体外骨生成的实验研究被引量：6: 1; 作者宁寅宽李强蔡伟良武成聪陈佳滨石正松; 机构桂林医学院附属医院四肢创伤手外科; 出处《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期264-268,共5页; 基金国家自然科学基金资助项目(31160199); 文摘目的观察Ad-h BMP-2/GFP转染兔骨髓间充质干细胞(BMSCs)体外骨生成中钙化斑形成,并对钙化斑元素构成进行研究。方法用携带h BMP2和GFP基因的腺病毒转染细胞,通过RT-PCR检测转染后BMSCs h BMP-2基因的表达,通过倒置荧光显微镜、钙结节茜素红染色观察转染后细胞形态改变和钙化斑的形成,结合扫描电镜和X线能谱分析(SEM/EDS)技术观测钙化斑表面微观形貌及其元素构成。结果 RT-PCR检测转染后BMSCs表达h BMP-2目的基因,细胞形态向成骨方向分化,钙结节茜素红染色见红色矿化结节,电镜下见钙化灶点状散布于细胞中,细胞重叠生长,分泌基质旺盛。X射线能谱分析显示其表面为钙、磷沉积物,其钙磷比(Ca/P)为1.53。结论 Ad-h BMP-2/GFP能成功转染兔BMSCs,体外诱导BMSCs向成骨方向分化,并具备较好的骨生成能力。; 关键词重组腺病毒骨形态生发蛋白骨髓间充质干细胞扫描电镜能谱分析; Keywords Adenovirus Bone morphogenetic protein Bone marrow mesenchymal stem cells Scanning electron microscopy Spectrum analysis; 分类号 Q7 [生物学—分子生物学] R68 [医药卫生—骨科学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名胶质细胞源性神经营养因子基因修饰的施万细胞复合胶原-壳聚糖神经支架对大鼠坐骨神经缺损的修复作用被引量：5: 2; 作者辛林伟王梨明唐际存李朝旭李强; 机构桂林医学院附属医院四肢创伤、手外科; 出处《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期655-661,共7页; 文摘目的探讨胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)基因修饰的施万细胞复合胶原-壳聚糖神经支架移植对大鼠坐骨神经长距离缺损的修复作用。方法建立大鼠左侧坐骨神经8 mm缺损模型,并随机分为3组,分别给予GDNF基因修饰的施万细胞复合胶原-壳聚糖多孔支架移植(GDNF-Sch组)、施万细胞复合胶原-壳聚糖多孔支架移植(Sch组)和自体神经移植(对照组),每组6只。分别于术后第3、6、12周行坐骨神经功能指数(SFI)检测,并在术后第12周解剖暴露桥接段坐骨神经行再生神经形态学和电生理检测,并测量胫前肌湿重。结果术后6和12周,3组大鼠术侧SFI间差异有统计学意义(P均<0.05),随着治疗时间延长,GDNF-Sch组SFI恢复情况更接近于对照组,明显优于Sch组。术后12周,GDNF-Sch组和Sch组的感觉神经传导速度明显低于对照组(P<0.05),两组间差异无统计学意义(P>0.05);GDNF-Sch组和Sch组的感觉神经波幅也明显低于对照组(P<0.05),GDNF-Sch组则明显高于Sch组(P<0.05);GDNFSch组和对照组的运动神经传导速度和波幅均明显高于Sch组(P均<0.05),但两组间差异均无统计学意义(P均>0.05)。术后12周,对照组、Sch组和GDNF-Sch组大鼠桥接侧胫前肌湿重分别为(0.360±0.020)、(0.250±0.018)和(0.310±0.025)g,均明显低于对照侧(0.440±0.031)、(0.420±0.024)和(0.430±0.027)g(P均<0.05);GDNFSch组和对照组桥接侧胫前肌湿重均明显高于Sch组(P均<0.05),但两组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论 GDNF基因修饰的施万细胞复合胶原-壳聚糖神经支架能够显著增强大鼠坐骨神经长距离缺损的修复作用,这种修复效果与自体神经移植术相似。; 关键词坐骨神经修复胶质细胞源性神经营养因子神经支架; Keywords sciatic nerve repair glial cell line-derived neurotrophic factor gene nerve scaffold; 分类号 R745.7 [医药卫生—神经病学与精神病学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名Ad-BMP-2/GFP转染兔骨髓间充质干细胞前后生物学特性的研究被引量：3: 3; 作者宁寅宽李强蔡伟良武成聪陈佳滨石正松; 机构桂林医学院附属医院四肢创伤手外科; 出处《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期1387-1392,共6页; 基金国家自然科学基金资助项目(31160199); 文摘目的对Ad-BMP-2/GFP转染兔骨髓间充质干细胞(BMSCs)前后的生物学特性进行观察。方法采用密度梯度离心结合贴壁培养法分离获取第10代兔BMSCs,应用流式细胞仪检测细胞表面抗原CD44、CD45、CD29的表达,用携带BMP2和GFP基因的腺病毒转染细胞。分别通过倒置荧光显微镜下观察转染前后细胞形态改变,MTT法分析转染前后细胞增殖的情况,体外Ⅰ型胶原免疫组化染色和钙结节茜素红染色以观察转染前后细胞的成骨分化情况,Western Blot检测转染前后细胞内目的蛋白表达。结果密度梯度离心结合贴壁培养法能获取高纯度第10代兔BMSCs,流式细胞仪检测显示CD44、CD29阳性,CD45阴性。Ad-BMP-2/GFP转染兔BMSCs后在荧光显微镜下观察到绿色荧光,细胞形态向成骨方向分化,在短时间内能促进兔BMSCs的增殖(P<0.05),Ⅰ型胶原免疫组化染色、茜素红染色均呈阳性,Western Blot显示细胞内稳定表达BMP-2目的蛋白。结论 Ad-BMP-2/GFP能成功转染兔骨髓间充质干细胞并能改变其生物学特性。; 关键词骨髓间充质干细胞骨形态发生蛋白2 腺病毒载体生物学特性基因治疗 BONE morphogenetic PROTEIN 2; Keywords Bone marrow mesenchymal stem cells Adenoviral vectors Biological characteristics Gene therapy; 分类号 Q7 [生物学—分子生物学] R68 [医药卫生—骨科学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名绿色荧光蛋白标记兔BMSCs体外成骨的定量能谱分析被引量：3: 4; 作者宁寅宽李强蔡伟良武成聪陈佳滨石正松; 机构桂林医学院附属医院四肢创伤手外科; 出处《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2015年第4期415-418,共4页; 基金国家自然科学基金资助项目(编号:31160199); 文摘目的观察绿色荧光蛋白(GFP)标记的兔骨髓间充质干细胞(BMSCs)成骨诱导后形态学改变和体外骨生成中矿化钙结节的形成,并结合扫描电镜和X射线能谱分析技术(SEM/EDS)对矿化钙结节元素进行定量能谱分析。方法用携带GFP基因的腺病毒转染兔BMSCs进行示踪标记,并诱导细胞向成骨方向分化,通过倒置荧光显微镜、钙结节茜素红染色观察成骨诱导后细胞形态改变和矿化钙结节的形成,结合SEM/EDS技术观测矿化钙结节的表面微观结构及其元素构成。结果腺病毒介导GFP基因(Ad-GFP)转染兔BMSCs后在荧光显微镜下观察到绿色荧光,经成骨诱导后细胞形态向成骨方向分化,并形成不透光的矿化钙结节,钙结节茜素红染色见红色矿化结节,SEM下见矿化钙结节散布于细胞中,细胞重叠生长,分泌基质旺盛。EDS分析显示矿化钙结节主要组成元素与正常骨组织相同,其钙磷比(Ca/P)为1.55,接近正常骨组织钙磷比1.49。结论 AdGFP能成功转染并标记兔BMSCs,成骨诱导后BMSCs向成骨方向分化,具备较好的骨生成能力,BMSCs体外矿质化成骨过程与体内基本相同。; 关键词重组腺病毒绿色荧光蛋白骨髓间充质干细胞扫描电镜能谱分析; Keywords adenovirus green fluorescent protein bone-marrow mesenchymal stem cells scanning electron microscopy spectrum analysis; 分类号 R687.34 [医药卫生—骨科学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名组织工程骨表面微观形貌和生物矿化的实验研究被引量：2: 5; 作者宁寅宽李强蔡伟良武成聪陈佳滨石正松; 机构桂林医学院附属医院四肢创伤手外科; 出处《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2015年第2期168-172,共5页; 基金国家自然科学基金资助项目(编号:31160199); 文摘目的：用绿色荧光蛋白（ GFP）标记结合扫描电镜和X射线能谱分析（ SEM/EDS）技术对组织工程骨的表面微观形貌和生物矿化进行观测,以评价脱钙骨（ DBM ）支架体外构建组织工程骨的生物性能。方法用重组腺病毒介导GFP基因转染兔骨髓间充质干细胞（ BMSCs）进行示踪标记,细胞与DBM复合经成骨诱导后,通过倒置荧光显微镜对细胞生长情况进行即时观察,结合SEM/EDS技术,观测组织工程骨的表面微观形貌和生物矿化。结果在倒置荧光显微镜下见细胞在DBM支架上能较好的黏附、重叠生长和增殖,体外培养至14 d 时,细胞内 GFP 有较高水平瞬时表达。SEM见DBM呈疏松多孔结构,孔隙直径为300~600μm,孔隙率达90%。 SEM下观察组织工程骨,见细胞在DBM网孔内表面贴壁生长,分泌基质旺盛,并可见粗糙的生物矿化物覆盖支架。 EDS显示其表面为钙、磷沉积物,其钙磷比（ Ca/P）为1．46。结论 DBM体外构建组织工程骨有非常好的生物性能,GFP标记结合SEM/EDS技术可以作为DBM体外构建组织工程骨较好的评价手段。; 关键词重组腺病毒绿色荧光蛋白骨髓间充质干细胞脱钙骨基质能谱分析; Keywords adenovirus green fluorescent protein bone-marrow mesenchymal stem cells decalcified bone ma-trix X-ray photoelectron spectroscopy; 分类号 R687.34 [医药卫生—骨科学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	Ad-hBMP-2/GFP转染兔骨髓间充质干细胞体外骨生成的实验研究	宁寅宽李强蔡伟良武成聪陈佳滨石正松	《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心	2015	6	在线阅读下载PDF 职称材料
2	胶质细胞源性神经营养因子基因修饰的施万细胞复合胶原-壳聚糖神经支架对大鼠坐骨神经缺损的修复作用	辛林伟王梨明唐际存李朝旭李强	《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心	2013	5	在线阅读下载PDF 职称材料
3	Ad-BMP-2/GFP转染兔骨髓间充质干细胞前后生物学特性的研究	宁寅宽李强蔡伟良武成聪陈佳滨石正松	《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心	2014	3	在线阅读下载PDF 职称材料
4	绿色荧光蛋白标记兔BMSCs体外成骨的定量能谱分析	宁寅宽李强蔡伟良武成聪陈佳滨石正松	《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心	2015	3	在线阅读下载PDF 职称材料
5	组织工程骨表面微观形貌和生物矿化的实验研究	宁寅宽李强蔡伟良武成聪陈佳滨石正松	《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心	2015	2	在线阅读下载PDF 职称材料