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亲磷脂酸磷脂酶A1基因沉默降低MIN6细胞胰岛素分泌水平
被引量：
5
1
作者
莫之婧
苏何玲
+5 位作者
朱华
李红岩
杨易
史云龙
黄海霞
刘永明
《实用医学杂志》
CAS
北大核心
2014年第18期2872-2875,共4页
目的:探讨亲磷脂酸磷脂酶A1(PA-PLA1)基因沉默对小鼠分泌胰岛素细胞MIN6分泌功能的影响。方法:根据GenBank中小鼠PA-PLA1基因mRNA序列构建siRNA表达载体(pGPU6-PA-PLA1)并转染MIN6,实时荧光定量PCR和Western blot筛选有效干扰载体。将...
目的:探讨亲磷脂酸磷脂酶A1(PA-PLA1)基因沉默对小鼠分泌胰岛素细胞MIN6分泌功能的影响。方法:根据GenBank中小鼠PA-PLA1基因mRNA序列构建siRNA表达载体(pGPU6-PA-PLA1)并转染MIN6,实时荧光定量PCR和Western blot筛选有效干扰载体。将获得的有效干扰载体转染MIN6细胞48 h后进行葡萄糖刺激实验,检测其胰岛素分泌的变化。结果:酶切及测序证实成功构建了4个靶向PA-PLA1的siRNA表达载体。实时荧光定量PCR和Western blot分析显示siRNA表达载体pGPU6-PA-PLA1-1885具有较高的干扰效率,其转染的MIN6细胞PA-PLA1 mRNA水平降至对照组的46.3%,PA-PLA1蛋白水平降至对照组的33.9%,同时胰岛素分泌水平降至对照组的65.0%(P<0.05)。结论:PA-PLA1基因沉默可降低MIN6的胰岛素分泌水平。
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关键词
亲磷脂酸磷脂酶A1
SIRNA
基因沉默
胰岛素分泌
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职称材料
佛手瓜鲨烯合酶基因克隆及酶分子结构分析
被引量：
4
2
作者
苏何玲
肖雅伦
+4 位作者
谭燕莲
梁斌
谷云艳
刘永明
吴耀生
《安徽农业科学》
CAS
2016年第32期142-146,共5页
[目的]克隆佛手瓜鲨烯合酶(SQS)基因,并基于克隆的SQS序列分析该酶的分子结构,为佛手瓜生物活性成分的利用提供理论依据。[方法]根据SQS基因5'末端保守序列和3'race方法扩增的佛手瓜SQS基因3'末端序列设计佛手瓜SQS基因克...
[目的]克隆佛手瓜鲨烯合酶(SQS)基因,并基于克隆的SQS序列分析该酶的分子结构,为佛手瓜生物活性成分的利用提供理论依据。[方法]根据SQS基因5'末端保守序列和3'race方法扩增的佛手瓜SQS基因3'末端序列设计佛手瓜SQS基因克隆引物。扩增的佛手瓜SQS基因片段插入p GEM-T Easy Vector后经DNA测序。应用生物信息学方法分析克隆序列的开放阅读框架(ORF)、酶蛋白的疏水性/亲水性和蛋白质磷酸化位点,预测酶蛋白的二级结构、结构域、三级结构和跨膜区。以布朗葡萄藻为outgroup,应用MEGA 5.0进行UPGMA算法构建系统树,并进行1 000次的Bootstrap测试。[结果]佛手瓜SQS由417氨基酸残基构成,等电点为6.983。构象预测提示该酶二级结构以α螺旋为主,是一种只有三级结构的单体酶,其活性中心是主要由几个α螺旋围绕形成的穴状结构,酶蛋白肽链中具有1个跨膜区。结构域分析表明SQS属于异戊二烯合酶家族。磷酸化位点分析显示该酶共有17个磷酸化位点,其中,S48位于与酶活性中心相关模体中,而S196为陆生植物SQS基因的正选择位点。以佛手瓜SQS基因ORF序列构建系统发生树得到的系统发生分类结果与形态学分类结果一致。[结论]佛手瓜SQS是由417氨基酸残基构成的单体酶,具有1个跨膜区和17个磷酸化位点,其中,S48和S196可能是佛手瓜SQS酶活性调节的关键性磷酸化位点。
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关键词
佛手瓜
鲨烯合酶
基因克隆
结构分析
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职称材料
乙型肝炎病毒X蛋白对autotaxin表达的影响及其意义
被引量：
3
3
作者
肖雅伦
苏何玲
+5 位作者
谭燕莲
梁斌
谷云艳
莫之婧
黄红丽
刘永明
《实用医学杂志》
CAS
北大核心
2017年第13期2088-2092,共5页
目的探讨乙型肝炎病毒(HBV)X蛋白(HBx)对autotaxin(ATX)表达的影响及其意义。方法构建重组HBx真核表达载体pcDNA3.1(+)-HBx和重组ATX启动子荧光素酶报告基因载体pGL3-ATX,共转染HepG2细胞检测HBx对ATX基因启动子的作用。构建稳定表达HBx...
目的探讨乙型肝炎病毒(HBV)X蛋白(HBx)对autotaxin(ATX)表达的影响及其意义。方法构建重组HBx真核表达载体pcDNA3.1(+)-HBx和重组ATX启动子荧光素酶报告基因载体pGL3-ATX,共转染HepG2细胞检测HBx对ATX基因启动子的作用。构建稳定表达HBx的HepG2.HBx细胞,Western blot检测HBx对ATX蛋白表达的影响。结果共转染检测显示,pcDNA3.1(+)-HBx和pGL3-ATX共转染组的荧光素酶活性是空载体pcDNA3.1(+)和pGL3-ATX共转染组的1.47倍(P<0.000)。Westernblot检测显示,HepG2.HBx细胞ATX蛋白表达显著升高,为HepG2细胞的1.75倍(P<0.05)。结论 HBx可激活ATX基因启动子,上调ATX的表达,提示HBV感染可增强ATX/溶血磷脂酸的信号转导。
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关键词
乙型肝炎病毒
X蛋白
AUTOTAXIN
基因表达
Autotaxin/溶血磷脂酸信号转导
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职称材料
题名
亲磷脂酸磷脂酶A1基因沉默降低MIN6细胞胰岛素分泌水平
被引量：
5
1
作者
莫之婧
苏何玲
朱华
李红岩
杨易
史云龙
黄海霞
刘永明
机构
桂林医学院医药生物技术重点实验室
及
生物
化学与分子
生物
学教研室
出处
《实用医学杂志》
CAS
北大核心
2014年第18期2872-2875,共4页
基金
国家自然科学基金(编号:30860094)
广西自然科学基金(编号:2013GXNSFAA019233)
文摘
目的:探讨亲磷脂酸磷脂酶A1(PA-PLA1)基因沉默对小鼠分泌胰岛素细胞MIN6分泌功能的影响。方法:根据GenBank中小鼠PA-PLA1基因mRNA序列构建siRNA表达载体(pGPU6-PA-PLA1)并转染MIN6,实时荧光定量PCR和Western blot筛选有效干扰载体。将获得的有效干扰载体转染MIN6细胞48 h后进行葡萄糖刺激实验,检测其胰岛素分泌的变化。结果:酶切及测序证实成功构建了4个靶向PA-PLA1的siRNA表达载体。实时荧光定量PCR和Western blot分析显示siRNA表达载体pGPU6-PA-PLA1-1885具有较高的干扰效率,其转染的MIN6细胞PA-PLA1 mRNA水平降至对照组的46.3%,PA-PLA1蛋白水平降至对照组的33.9%,同时胰岛素分泌水平降至对照组的65.0%(P<0.05)。结论:PA-PLA1基因沉默可降低MIN6的胰岛素分泌水平。
关键词
亲磷脂酸磷脂酶A1
SIRNA
基因沉默
胰岛素分泌
Keywords
PA-PLA1
Small interference RNA
Gene silence
Insulin secretion
分类号
R346 [医药卫生—基础医学]
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职称材料
题名
佛手瓜鲨烯合酶基因克隆及酶分子结构分析
被引量：
4
2
作者
苏何玲
肖雅伦
谭燕莲
梁斌
谷云艳
刘永明
吴耀生
机构
广西医科大学
生物
化学与分子
生物
学教研室
桂林医学院医药生物技术重点实验室
出处
《安徽农业科学》
CAS
2016年第32期142-146,共5页
基金
国家自然科学基金项目(31260069)
广西高等学校优秀中青年骨干教师培养工程资助项目
文摘
[目的]克隆佛手瓜鲨烯合酶(SQS)基因,并基于克隆的SQS序列分析该酶的分子结构,为佛手瓜生物活性成分的利用提供理论依据。[方法]根据SQS基因5'末端保守序列和3'race方法扩增的佛手瓜SQS基因3'末端序列设计佛手瓜SQS基因克隆引物。扩增的佛手瓜SQS基因片段插入p GEM-T Easy Vector后经DNA测序。应用生物信息学方法分析克隆序列的开放阅读框架(ORF)、酶蛋白的疏水性/亲水性和蛋白质磷酸化位点,预测酶蛋白的二级结构、结构域、三级结构和跨膜区。以布朗葡萄藻为outgroup,应用MEGA 5.0进行UPGMA算法构建系统树,并进行1 000次的Bootstrap测试。[结果]佛手瓜SQS由417氨基酸残基构成,等电点为6.983。构象预测提示该酶二级结构以α螺旋为主,是一种只有三级结构的单体酶,其活性中心是主要由几个α螺旋围绕形成的穴状结构,酶蛋白肽链中具有1个跨膜区。结构域分析表明SQS属于异戊二烯合酶家族。磷酸化位点分析显示该酶共有17个磷酸化位点,其中,S48位于与酶活性中心相关模体中,而S196为陆生植物SQS基因的正选择位点。以佛手瓜SQS基因ORF序列构建系统发生树得到的系统发生分类结果与形态学分类结果一致。[结论]佛手瓜SQS是由417氨基酸残基构成的单体酶,具有1个跨膜区和17个磷酸化位点,其中,S48和S196可能是佛手瓜SQS酶活性调节的关键性磷酸化位点。
关键词
佛手瓜
鲨烯合酶
基因克隆
结构分析
Keywords
Sechium edule Swartz
Squalene synthase
Gene cloning
Molecular structure analysis
分类号
S188 [农业科学—农业基础科学]
Q946.83 [生物学—植物学]
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职称材料
题名
乙型肝炎病毒X蛋白对autotaxin表达的影响及其意义
被引量：
3
3
作者
肖雅伦
苏何玲
谭燕莲
梁斌
谷云艳
莫之婧
黄红丽
刘永明
机构
桂林医学院医药生物技术重点实验室
及
生物
化学与分子
生物
学教研室
出处
《实用医学杂志》
CAS
北大核心
2017年第13期2088-2092,共5页
基金
国家自然科学基金项目(编号:81560341
81460320)
广西研究生教育创新计划项目(编号:JGY2015129)
文摘
目的探讨乙型肝炎病毒(HBV)X蛋白(HBx)对autotaxin(ATX)表达的影响及其意义。方法构建重组HBx真核表达载体pcDNA3.1(+)-HBx和重组ATX启动子荧光素酶报告基因载体pGL3-ATX,共转染HepG2细胞检测HBx对ATX基因启动子的作用。构建稳定表达HBx的HepG2.HBx细胞,Western blot检测HBx对ATX蛋白表达的影响。结果共转染检测显示,pcDNA3.1(+)-HBx和pGL3-ATX共转染组的荧光素酶活性是空载体pcDNA3.1(+)和pGL3-ATX共转染组的1.47倍(P<0.000)。Westernblot检测显示,HepG2.HBx细胞ATX蛋白表达显著升高,为HepG2细胞的1.75倍(P<0.05)。结论 HBx可激活ATX基因启动子,上调ATX的表达,提示HBV感染可增强ATX/溶血磷脂酸的信号转导。
关键词
乙型肝炎病毒
X蛋白
AUTOTAXIN
基因表达
Autotaxin/溶血磷脂酸信号转导
Keywords
Hepatitis B virus
X protein
autotaxin
gene expression
autotaxin/lysophosphatidic acid （ LPA ） signaling
分类号
R373 [医药卫生—病原生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
亲磷脂酸磷脂酶A1基因沉默降低MIN6细胞胰岛素分泌水平
莫之婧
苏何玲
朱华
李红岩
杨易
史云龙
黄海霞
刘永明
《实用医学杂志》
CAS
北大核心
2014
5
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
佛手瓜鲨烯合酶基因克隆及酶分子结构分析
苏何玲
肖雅伦
谭燕莲
梁斌
谷云艳
刘永明
吴耀生
《安徽农业科学》
CAS
2016
4
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
乙型肝炎病毒X蛋白对autotaxin表达的影响及其意义
肖雅伦
苏何玲
谭燕莲
梁斌
谷云艳
莫之婧
黄红丽
刘永明
《实用医学杂志》
CAS
北大核心
2017
3
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职称材料
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