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单管PCR-Pyrosequencing快速检测华法林代谢酶基因多态性方法的建立 被引量:3
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作者 施宏 虞闰六 +1 位作者 马金飞 任绪义 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期1283-1290,共8页
文章旨在建立一种单管、快速及高通量的华法林药物代谢酶相关基因多态性的检测方法。通过抽取人外周血DNA,应用带有生物素标记的扩增引物,经PCR扩增并制备焦磷酸测序单链模板,于PyroMark ID焦磷酸测序仪上进行焦磷酸测序,以Sanger测序... 文章旨在建立一种单管、快速及高通量的华法林药物代谢酶相关基因多态性的检测方法。通过抽取人外周血DNA,应用带有生物素标记的扩增引物,经PCR扩增并制备焦磷酸测序单链模板,于PyroMark ID焦磷酸测序仪上进行焦磷酸测序,以Sanger测序法测序结果为对照,观察分析的准确性。结果显示,华法林药物代谢酶的3个相关基因多态性(CYP2C9*2、CYP2C9*3、VKORC1(-1693))于单管中可被同时检测,一次可获得96份DNA的华法林药物代谢相关多态性位点检测结果。经与Sanger测序方法比较,符合率为100%。结果表明本方法可准确、高通量、快速检测华法林药物代谢酶相关基因多态性,与单管检测一个位点的焦磷酸测序方法相比,能有效降低检测成本,节省检测时间。该方法在个性化医疗上有较大的推广应用价值,也可以将该平台运用于其他疾病相关基因多态性检测。 展开更多
关键词 CYP2C9 VKORC1 华法林 焦磷酸测序
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核桃乳DNA提取方法优化与DNA条形码鉴定 被引量:2
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作者 黄灵芝 姜广泽 +1 位作者 丁艳菲 朱诚 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2022年第8期1752-1761,共10页
随着乳饮料行业快速发展,掺杂使假现象层出不穷,对核桃乳真实成分的准确鉴定变的尤为重要。核桃乳属深加工食品,DNA破坏严重,DNA提取是开展核桃乳DNA条形码鉴定的首要环节。为优化核桃乳DNA提取方法,并基于psbA-trnH基因DNA条形码建立... 随着乳饮料行业快速发展,掺杂使假现象层出不穷,对核桃乳真实成分的准确鉴定变的尤为重要。核桃乳属深加工食品,DNA破坏严重,DNA提取是开展核桃乳DNA条形码鉴定的首要环节。为优化核桃乳DNA提取方法,并基于psbA-trnH基因DNA条形码建立核桃乳的掺假造假鉴定方法。以10种不同品牌的核桃乳为样品,采用3种方法(静置抽提、异丙醇沉淀、抽真空冻干)进行预处理,再用2种CTAB裂解沉淀方法和3种试剂盒方法(康为新型植物基因组DNA提取试剂盒、爱思进植物基因组DNA提取试剂盒和天根深加工食品DNA提取试剂盒)提取核桃乳DNA,并在此基础上创新尝试了CTAB与爱思进试剂盒结合方法。以提取的市售核桃乳DNA为模板,利用自行设计的特异性基因psbA-trnH-wal鉴定样品中是否含有核桃成分,确定造假情况;选择常见植物候选基因psbA-trnH鉴定样品中是否含有其他成分,确定掺假情况。结果表明,抽真空冻干预处理方法优于其他2种预处理方式。CTAB与爱思进试剂盒结合方法能提取到纯度好、得率高、扩增能力强的核桃乳DNA,是最佳的核桃乳DNA提取方法。扩增及比对结果显示,1款核桃乳样品中含有花生,属于掺假产品。抽真空冻干预处理、CTAB与爱思进试剂盒结合为优化后的核桃乳DNA提取方法,psbA-trnH-wal基因和psbA-trnH基因结合能够对核桃乳及其掺假造假品进行快速准确的鉴定。 展开更多
关键词 核桃乳 DNA提取 DNA条形码 PSBA-TRNH 标签验证
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小汗腺螺旋腺瘤1例
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作者 黄晖 吕源源 易忠良 《临床皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第9期542-542,共1页
患者男,50岁。因背部皮肤球状结节无痛痒3年于2020年9月3日来我院就诊。患者3年前无明显诱因下发现背部出现一丘疹,无痛痒,初始为正常肤色,略突出于皮面,米粒大,未在意,未就诊治疗,渐增大至弹珠大,皮色渐变为暗红色,形似血管瘤,压迫或... 患者男,50岁。因背部皮肤球状结节无痛痒3年于2020年9月3日来我院就诊。患者3年前无明显诱因下发现背部出现一丘疹,无痛痒,初始为正常肤色,略突出于皮面,米粒大,未在意,未就诊治疗,渐增大至弹珠大,皮色渐变为暗红色,形似血管瘤,压迫或衣物摩擦到皮疹后略有疼痛,遂来我院就诊。患者既往体健,家族成员中无类似疾病患者。 展开更多
关键词 小汗腺螺旋腺瘤
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