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单甲氧基聚乙二醇修饰蚓激酶的制备及性质研究
被引量：
10
1
作者
应国清
易喻
+2 位作者
石陆娥
王普
胡妙申
《高校化学工程学报》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2005年第4期527-531,共5页
采用以三聚氯氰活化的单甲氧基聚乙二醇(mPEG-5000),对从赤子爱胜蚓体内提取的抗血栓酶——蚓激酶进行了化学修饰,以期降低其抗原性及增加它的稳定性。实验表明,在37℃下,15.0mL,pH9.2,0.1mol?L?1的硼酸缓冲液中,按每1.0mg的蚓激酶加入2...
采用以三聚氯氰活化的单甲氧基聚乙二醇(mPEG-5000),对从赤子爱胜蚓体内提取的抗血栓酶——蚓激酶进行了化学修饰,以期降低其抗原性及增加它的稳定性。实验表明,在37℃下,15.0mL,pH9.2,0.1mol?L?1的硼酸缓冲液中,按每1.0mg的蚓激酶加入25.5mg活化的mPEG,水浴保温1h,经透析、超滤浓缩、冻干得mPEG修饰酶,测得蚓激酶的修饰率为63.2%,酶活回收率为56.6%。在此基础上,对修饰蚓激酶的性质进行了研究。结果显示,修饰后的蚓激酶对底物的亲和力有所增加(天然酶表观米氏常数Km值为0.267mg.mL?1,修饰酶Km'值为0.115mg.mL?1);修饰蚓激酶的抗胰蛋白酶水解能力、热稳定性均优于天然酶;同时修饰酶的抗原性有了较大程度的降低,与抗血清的结合能力大约是天然酶的25.0%左右。
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关键词
蚓激酶
化学修饰
单甲氧基聚乙二醇
抗原性
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职称材料
题名
单甲氧基聚乙二醇修饰蚓激酶的制备及性质研究
被引量：
10
1
作者
应国清
易喻
石陆娥
王普
胡妙申
机构
浙江工业大学药学院
杭州杭康生物制药有限公司
出处
《高校化学工程学报》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2005年第4期527-531,共5页
基金
浙江省科技厅重点科研计划项目(001103159)。
文摘
采用以三聚氯氰活化的单甲氧基聚乙二醇(mPEG-5000),对从赤子爱胜蚓体内提取的抗血栓酶——蚓激酶进行了化学修饰,以期降低其抗原性及增加它的稳定性。实验表明,在37℃下,15.0mL,pH9.2,0.1mol?L?1的硼酸缓冲液中,按每1.0mg的蚓激酶加入25.5mg活化的mPEG,水浴保温1h,经透析、超滤浓缩、冻干得mPEG修饰酶,测得蚓激酶的修饰率为63.2%,酶活回收率为56.6%。在此基础上,对修饰蚓激酶的性质进行了研究。结果显示,修饰后的蚓激酶对底物的亲和力有所增加(天然酶表观米氏常数Km值为0.267mg.mL?1,修饰酶Km'值为0.115mg.mL?1);修饰蚓激酶的抗胰蛋白酶水解能力、热稳定性均优于天然酶;同时修饰酶的抗原性有了较大程度的降低,与抗血清的结合能力大约是天然酶的25.0%左右。
关键词
蚓激酶
化学修饰
单甲氧基聚乙二醇
抗原性
Keywords
Filtration
Hydrolysis
Modification
pH
Phosphoric acid
Solutions
Thermodynamic stability
分类号
Q55 [生物学—生物化学]
Q814.1 [生物学—生物工程]
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作者
出处
发文年
被引量
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1
单甲氧基聚乙二醇修饰蚓激酶的制备及性质研究
应国清
易喻
石陆娥
王普
胡妙申
《高校化学工程学报》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2005
10
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