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人GLP-1R基因转染BHK细胞及重组细胞的应用被引量：2: 1; 作者朱振洪王同映黄岩山《生物技术通报》 CAS CSCD 2007年第3期118-121,共4页; 为了构建表达人胰高血糖素样肽-1受体(GLP-1R)基因的BHK细胞株,并利用该重组细胞对GLP-1等相关肽进行活性测定,首先通过酶切、连接方式将人GLP-1R基因克隆至真核表达载体pCDNA3.(1+)中,然后用脂质体转染法将重组质粒转染至BHK-21细胞,... 展开更多; 关键词 GLP-1受体 BHK-21 CAMP; 在线阅读下载PDF 职称材料

是否存在超微小梁?—骨小梁微破裂及微骨痂的扫描电镜观察被引量：3: 2; 作者戴如春姚学锋 +3 位作者刘沐荣朱逸忻伍贤平廖二元《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 2005年第4期434-436,共3页; 目的应用扫描电镜观察骨小梁微破裂形态及微骨痂的微观结构,探讨微骨痂的超微结构特征。方法取63周龄雌性SD大鼠第6腰椎椎体,沿冠状面切开,蒸馏水冲洗净骨髓腔后乙醇梯度脱水,表面喷金后应用扫描电镜观察,在600倍下观察骨小梁微破裂以... 展开更多; 关键词骨小梁微破裂微骨痂扫描电镜超微小梁超微结构; 在线阅读下载PDF 职称材料

聚乙二醇修饰鼠抗人CD3单克隆抗体被引量：2: 3; 作者马杭圣王鸿 +2 位作者孙汉栋易喻应国清《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第11期1096-1098,1101,共4页; 目的:确定一条聚乙二醇化鼠抗人CD3单克隆抗体(mAb)和抗体片段的制备工艺路线。方法:以胃蛋白酶酶解并通过凝胶柱分离和纯化得到抗体Fab′,利用PEG-SPA修饰抗体和抗体片段Fab′上的氨基,通过体内和体外T细胞增殖实验,考查修饰后的抗体... 展开更多; 关键词单克隆抗体 CD3 聚乙二醇化学修饰免疫活性; 在线阅读下载PDF 职称材料

重组人粒细胞刺激因子化学稳定性的影响因素探讨被引量：1: 4; 作者郭旺明蔡谨 +2 位作者黄磊徐志南岑沛霖《高校化学工程学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2011年第6期997-1002,共6页; 重组人粒细胞刺激因子是一种非常重要的重组蛋白质药物,它容易发生蛋白质氧化。采用反相色谱法测定37℃加速试验和4℃长期稳定性试验中该产品的纯度变化,研究其保藏过程中的化学稳定性。考察了添加氧化剂和还原剂对产品的短期和长期稳... 展开更多; 关键词重组人粒细胞刺激因子化学稳定性蛋白质氧化过渡态金属离子金属螯合剂; 在线阅读下载PDF 职称材料

超氧化物歧化酶吸附分离-化学修饰的耦合过程被引量：1: 5; 作者李东华王鸿 +2 位作者孙汉栋易喻应国清《化工进展》 EI CAS CSCD 北大核心 2009年第1期135-140,共6页; 以超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)为模板蛋白,将其分离纯化过程和修饰过程耦合起来,从而获得比活更高、稳定性更好的修饰SOD。将SOD选择性地吸附在DEAE-52层析柱和铜离子螯合葡聚糖凝胶柱上,先不经洗脱分离,直接用活化的聚... 展开更多; 关键词超氧化物歧化酶化学修饰离子交换层析金属鳌合层析耦合过程; 在线阅读下载PDF 职称材料

聚乙二醇修饰鼠抗人CD3单克隆抗体的研究被引量：1: 6; 作者马杭圣王鸿 +2 位作者孙汉栋易喻应国清《浙江工业大学学报》 CAS 2008年第6期633-637,共5页; 确定一条聚乙二醇化鼠抗人CD3单克隆抗体和抗体片段的制备工艺路线.以胃蛋白酶酶解并通过凝胶柱分离和纯化得到抗体Fab′,利用PEG-SPA修饰抗体和抗体片段Fab′上的氨基,通过体内和体外T细胞增殖实验,考查修饰后的抗体和抗体片段的免疫活... 展开更多; 关键词抗CD3单克隆抗体聚乙二醇化学修饰免疫活性; 在线阅读下载PDF 职称材料

园艺疗法的心理机制及其应用研究被引量：6: 7; 作者李妮陈公义陈涛《现代园艺》 2021年第19期57-58,共2页; 园艺疗法由来已久,我国比美、英等国推迟了20多年规范化研究应用,但近年发展较为迅速。园艺疗法的心理机制主要是改善情感认知、情绪状态,促进身心健康。从中医药药性角度出发,与现代有益菌群与污水处理环保措施结合,利用活体中草药生... 展开更多; 关键词园艺疗法心理机制中医药大健康环境保护; 在线阅读下载PDF 职称材料

测定重组人粒细胞集落刺激因子生物学活性的MTT比色法被引量：7: 8; 作者谢异泓马红《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1997年第4期225-227,共3页; 用粒细胞集落刺激因子（Ｇ－ＣＳＦ）的依赖细胞株（ＮＦＳ－６０细胞株）为靶细胞，以ＭＴＴ比色法测定重组人粒细胞集落刺激因子（ｒｈＧ－ＣＳＦ）的生物学活性，确定了在ＭＴＴ比色法中ＮＦＳ－６０细胞浓度为３×１０４／孔以... 展开更多; 关键词 G-CSF MTT比色法 NFS-60细胞; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名人GLP-1R基因转染BHK细胞及重组细胞的应用被引量：2: 1; 作者朱振洪王同映黄岩山; 机构浙江中医药大学生物工程学院杭州九源基因工程有限公司; 出处《生物技术通报》 CAS CSCD 2007年第3期118-121,共4页; 文摘为了构建表达人胰高血糖素样肽-1受体(GLP-1R)基因的BHK细胞株,并利用该重组细胞对GLP-1等相关肽进行活性测定,首先通过酶切、连接方式将人GLP-1R基因克隆至真核表达载体pCDNA3.(1+)中,然后用脂质体转染法将重组质粒转染至BHK-21细胞,转染后的细胞经G418加压筛选、细胞有限稀释等方法获得克隆细胞株。经过该细胞株RT-PCR验证,结果证实目的基因已整合至BHK-21细胞基因组中,并获得成功转录和表达。活性检测实验表明该重组细胞株经过GLP-1的刺激后,其细胞中的cAMP含量得到明显提升。该细胞株的构建为GLP-1及相关肽的活性测定奠定了基础。; 关键词 GLP-1受体 BHK-21 CAMP; Keywords GLP-1 receptor BHK-21 cAMP; 分类号 Q78 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名是否存在超微小梁?—骨小梁微破裂及微骨痂的扫描电镜观察被引量：3: 2; 作者戴如春姚学锋刘沐荣朱逸忻伍贤平廖二元; 机构清华大学航空航天学院工程力学系杭州九源基因工程有限公司中南大学湘雅二医院代谢内分泌研究所; 出处《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 2005年第4期434-436,共3页; 基金国家自然科学基金项目(30400514) 卫生部临床学科重点建设项目(2004); 文摘目的应用扫描电镜观察骨小梁微破裂形态及微骨痂的微观结构,探讨微骨痂的超微结构特征。方法取63周龄雌性SD大鼠第6腰椎椎体,沿冠状面切开,蒸馏水冲洗净骨髓腔后乙醇梯度脱水,表面喷金后应用扫描电镜观察,在600倍下观察骨小梁微破裂以及微骨痂的形态,在2000倍和10000倍下观察微骨痂的细微及超微结构。结果观察到微破裂长度约80μm,在骨微破裂一端靠近小梁边缘处,可见有微骨痂形成,微骨痂为一种疏松多孔的海绵状结构,其超微结构呈珊瑚礁形貌,由直径约0.2～0.5μm大小网状排列的骨小梁类似结构构成。结论在微骨痂修复微破裂过程中可能存在一种“超微小梁”结构,这种结构对于受损骨小梁承受应力以及修复均有利。; 关键词骨小梁微破裂微骨痂扫描电镜超微小梁超微结构; Keywords Bone trabeculae Microcrack Microcallus Scanning electron microscopy Ultra-trabeculae; 分类号 R68 [医药卫生—骨科学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名聚乙二醇修饰鼠抗人CD3单克隆抗体被引量：2: 3; 作者马杭圣王鸿孙汉栋易喻应国清; 机构浙江工业大学药学院杭州九源基因工程有限公司; 出处《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第11期1096-1098,1101,共4页; 基金浙江省重大科技攻关资助项目(2005C13025); 文摘目的:确定一条聚乙二醇化鼠抗人CD3单克隆抗体(mAb)和抗体片段的制备工艺路线。方法:以胃蛋白酶酶解并通过凝胶柱分离和纯化得到抗体Fab′,利用PEG-SPA修饰抗体和抗体片段Fab′上的氨基,通过体内和体外T细胞增殖实验,考查修饰后的抗体和抗体片段的免疫活性。结果:较佳的修饰工艺条件为:在pH9.0硼酸缓冲液,反应温度25℃,抗体浓度0.2g/L,抗体和聚乙二醇摩尔比为1∶20,反应3h。修饰后抗CD3mAb全抗,对T淋巴细胞增殖抑制活性下降了32.3%,抗体Fab′下降了8.0%,PEG化Fab′下降了19.9%。利用ELISA检测血液中修饰后的抗体和抗体片段的半衰期。结果显示mPEG修饰后抗体和抗体片段血药浓度降低明显减缓,修饰后抗CD3抗体半衰期从2.66h延长到8.72h,延长了3.28倍。而修饰后抗体Fab′片段半衰期从2.21h延长到4.17h,延长了1.90倍。结论:利用聚乙二醇修饰抗体和抗体片段,提高了抗体半衰期,且无细胞毒性,活性损失较小,该技术具有较高的可行性,可极大地提高mAb尤其是非人源性抗体在临床上的应用。; 关键词单克隆抗体 CD3 聚乙二醇化学修饰免疫活性; 分类号 R392.11 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名重组人粒细胞刺激因子化学稳定性的影响因素探讨被引量：1: 4; 作者郭旺明蔡谨黄磊徐志南岑沛霖; 机构浙江大学化学工程与生物工程学系生物工程研究所杭州九源基因工程有限公司; 出处《高校化学工程学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2011年第6期997-1002,共6页; 基金国家自然科学基金(20736008) 浙江省自然科学基金(R4090041); 文摘重组人粒细胞刺激因子是一种非常重要的重组蛋白质药物,它容易发生蛋白质氧化。采用反相色谱法测定37℃加速试验和4℃长期稳定性试验中该产品的纯度变化,研究其保藏过程中的化学稳定性。考察了添加氧化剂和还原剂对产品的短期和长期稳定性作用,结果表明所有氧化剂包括过氧化氢和亚硝酸盐都具有较强的浓度效应而还原剂具有较强的pH依赖性。当亚硝酸盐浓度大于0.1 ppm时,具有明显的氧化作用。进一步考察了不同包装材料和过渡态金属离子对化学稳定性的作用。安瓿瓶火焰融封时会导致过渡态金属离子的溶出,结果表明亚铁离子催化活性最强,在0.05 ppm浓度下就具有明显的氧化作用。加入抗氧化剂L-Met能在一定程度上降低长期保藏过程中化学不稳定性,而添加金属螯合剂EDTA二钠能够明显提高该重组蛋白药物的化学稳定性。; 关键词重组人粒细胞刺激因子化学稳定性蛋白质氧化过渡态金属离子金属螯合剂; Keywords recombinant human granulocyte colony stimulating factor（rhG-CSF） chemical stability protein oxidation transition metal ions metal chelating agents; 分类号 R917 [医药卫生—药物分析学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名超氧化物歧化酶吸附分离-化学修饰的耦合过程被引量：1: 5; 作者李东华王鸿孙汉栋易喻应国清; 机构浙江工业大学药学院杭州九源基因工程有限公司; 出处《化工进展》 EI CAS CSCD 北大核心 2009年第1期135-140,共6页; 基金浙江省重大科技攻关项目(2005C13025)。; 文摘以超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)为模板蛋白,将其分离纯化过程和修饰过程耦合起来,从而获得比活更高、稳定性更好的修饰SOD。将SOD选择性地吸附在DEAE-52层析柱和铜离子螯合葡聚糖凝胶柱上,先不经洗脱分离,直接用活化的聚乙二醇(PEG)5000对吸附在柱上的SOD进行化学修饰,再通过特异性洗脱分离获得PEG-SOD,使SOD分离纯化和修饰过程同步完成。SOD通过离子交换吸附层析-PEG修饰耦合过程和金属螯合层析-PEG修饰耦合过程,所得的PEG-SOD比活力分别为9638.0U/mg和9067.8U/mg,纯化倍数分别为1.87倍和1.755倍,氨基修饰率分别为35.3%和40.9%。结果表明SOD的分离纯化-化学修饰耦合过程是可行的,且金属螯合层析-修饰耦合过程的效果要优于离子交换吸附层析-修饰耦合过程。; 关键词超氧化物歧化酶化学修饰离子交换层析金属鳌合层析耦合过程; Keywords superoxide dismutase chemical modification iron exchange chromatograph（IEC） metal-chelating affinity chromatograph （MCAC） coupled procedure; 分类号 Q55 [生物学—生物化学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名聚乙二醇修饰鼠抗人CD3单克隆抗体的研究被引量：1: 6; 作者马杭圣王鸿孙汉栋易喻应国清; 机构浙江工业大学药学院杭州九源基因工程有限公司; 出处《浙江工业大学学报》 CAS 2008年第6期633-637,共5页; 基金浙江省重大科技攻关资助项目(2005C13025); 文摘确定一条聚乙二醇化鼠抗人CD3单克隆抗体和抗体片段的制备工艺路线.以胃蛋白酶酶解并通过凝胶柱分离和纯化得到抗体Fab′,利用PEG-SPA修饰抗体和抗体片段Fab′上的氨基,通过体内和体外T细胞增殖实验,考查修饰后的抗体和抗体片段的免疫活性.较佳的修饰工艺条件为:在pH9.0硼酸缓冲液,反应温度25℃,抗体浓度0.2 mg/mL,抗体和聚乙二醇摩尔比为1∶20,反应3 h.修饰后抗CD3单抗全抗,对T淋巴细胞增殖抑制活性下降了32.28%,抗体Fab′下降了7.96%,PEG化Fab′下降了19.92%.利用聚乙二醇修饰抗体和抗体片段,提高了抗体半衰期,且无细胞毒性,活性损失较小,该技术具有较高的可行性,可极大的提高单克隆抗体尤其是非人源性抗体在临床上的应用.; 关键词抗CD3单克隆抗体聚乙二醇化学修饰免疫活性; Keywords anti-CD3 monoclonal antibody polyethylene glycol chemical modification immune activity; 分类号 R392 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名园艺疗法的心理机制及其应用研究被引量：6: 7; 作者李妮陈公义陈涛; 机构湖南信息职业技术学院湖南省第一工程有限公司杭州九源基因工程有限公司湖南办事处; 出处《现代园艺》 2021年第19期57-58,共2页; 基金长沙社科规划一般项目(2021csskkt43)资助。; 文摘园艺疗法由来已久,我国比美、英等国推迟了20多年规范化研究应用,但近年发展较为迅速。园艺疗法的心理机制主要是改善情感认知、情绪状态,促进身心健康。从中医药药性角度出发,与现代有益菌群与污水处理环保措施结合,利用活体中草药生态系统,开展了预防、治疗失眠和抑郁症的研究,取得了良好效果。结合中医药与大健康、环境保护理念,深化园艺疗法机制研究,在园林绿化等建设中广泛融入园艺疗法,构建中国特色园艺疗法体系。园艺疗法广泛应用增加种植面积,能助力实现“碳达峰碳中和”。; 关键词园艺疗法心理机制中医药大健康环境保护; 分类号 R454 [医药卫生—治疗学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名测定重组人粒细胞集落刺激因子生物学活性的MTT比色法被引量：7: 8; 作者谢异泓马红; 机构杭州九源基因工程有限公司; 出处《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1997年第4期225-227,共3页; 文摘用粒细胞集落刺激因子（Ｇ－ＣＳＦ）的依赖细胞株（ＮＦＳ－６０细胞株）为靶细胞，以ＭＴＴ比色法测定重组人粒细胞集落刺激因子（ｒｈＧ－ＣＳＦ）的生物学活性，确定了在ＭＴＴ比色法中ＮＦＳ－６０细胞浓度为３×１０４／孔以及ｒｈＧ－ＣＳＦ浓度与ＮＦＳ－６０细胞有量效关系的范围为２ｎｇ／ｍｌ～７．８ｐｇ／ｍｌ，对几种溶解液进行了比较，选定１０％ＳＤＳ－０．０１ｍｏｌ／ＬＨＣｌ作为ＭＴＴ结晶的溶解液，对ＭＴＴ比色法的特异性、精密度和方法回收率进行了研究。; 关键词 G-CSF MTT比色法 NFS-60细胞; Keywords rhG CSF MTT colorimetric method NFS 60 cells; 分类号 R392－33 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	人GLP-1R基因转染BHK细胞及重组细胞的应用	朱振洪王同映黄岩山	《生物技术通报》 CAS CSCD	2007	2	在线阅读下载PDF 职称材料
2	是否存在超微小梁?—骨小梁微破裂及微骨痂的扫描电镜观察	戴如春姚学锋刘沐荣朱逸忻伍贤平廖二元	《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD	2005	3	在线阅读下载PDF 职称材料
3	聚乙二醇修饰鼠抗人CD3单克隆抗体	马杭圣王鸿孙汉栋易喻应国清	《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2008	2	在线阅读下载PDF 职称材料
4	重组人粒细胞刺激因子化学稳定性的影响因素探讨	郭旺明蔡谨黄磊徐志南岑沛霖	《高校化学工程学报》 EI CAS CSCD 北大核心	2011	1	在线阅读下载PDF 职称材料
5	超氧化物歧化酶吸附分离-化学修饰的耦合过程	李东华王鸿孙汉栋易喻应国清	《化工进展》 EI CAS CSCD 北大核心	2009	1	在线阅读下载PDF 职称材料
6	聚乙二醇修饰鼠抗人CD3单克隆抗体的研究	马杭圣王鸿孙汉栋易喻应国清	《浙江工业大学学报》 CAS	2008	1	在线阅读下载PDF 职称材料
7	园艺疗法的心理机制及其应用研究	李妮陈公义陈涛	《现代园艺》	2021	6	在线阅读下载PDF 职称材料
8	测定重组人粒细胞集落刺激因子生物学活性的MTT比色法	谢异泓马红	《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	1997	7	在线阅读下载PDF 职称材料