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人脐带间充质干细胞经添加B27的无血清培养基诱导后分化成神经元样细胞 被引量:3
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作者 李云逸 杨锦培 +4 位作者 傅国 周攀 刘阳 李志忠 焦根龙 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第9期1340-1345,共6页
目的评价人脐带间充质干细胞(HUCMSCs)经添加B27的无血清培养基诱导后向神经元样细胞分化的能力和效率。方法将第4代HUCMSCs分为4组:A组:血清培养基(SCM)处理14 d;B组:给予SCM+20 ng/mL神经生长因子(NGF)+10 ng/L碱性成纤维细胞生长因子... 目的评价人脐带间充质干细胞(HUCMSCs)经添加B27的无血清培养基诱导后向神经元样细胞分化的能力和效率。方法将第4代HUCMSCs分为4组:A组:血清培养基(SCM)处理14 d;B组:给予SCM+20 ng/mL神经生长因子(NGF)+10 ng/L碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)治疗14 d;C组:无血清培养基(SFM)处理14 d;D组:SFM+20 ng/mL NGF+10 ng/mL bFGF处理。每3 d更换各组细胞培养液。倒置显微镜观察神经球生长情况,流式细胞术分析细胞标记物。巢蛋白(Nestin)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、人重肽神经丝蛋白(NEFH)、神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)通过qRT-PCR和Western blotting进行定量。结果在诱导前,HUCMSCs表现出丰富的间充质干细胞表面标志物(CD29、CD44和CD105分别为99.5%、49.6%和77.7%)的表达。在第7、10、14天观察神经元样细胞的形成,D组最优,其次是C、B、A组。qRT-PCR和Western blotting结果显示,A、B、C、D组Nestin和GFAP表达逐渐减少,NEFH和NSE表达逐渐增加,A组与其他3组的GFAP、NEFH、Nestin和NSE表达差异有统计学意义(P<0.05)。结论添加B27的SFM可以有效地将HUMSCs分化为神经元样细胞,添加细胞因子(NGF和bFGF)使分化效果更显著。 展开更多
关键词 人脐带间充质干细胞 神经元 分化 无血清培养基
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