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基于裸鼠模型研究EGFL9对肝癌细胞增殖、转移能力的调控作用 被引量:2
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作者 李伟锋 谭国钳 +1 位作者 吴帆 王百林 《暨南大学学报(自然科学与医学版)》 CAS 北大核心 2023年第4期339-346,共8页
目的:旨在通过裸鼠模型分析EGFL9对肝癌细胞增殖、转移能力的影响。方法:通过慢病毒介导的小干扰RNA技术构建EGFL9沉默的JHH-7肝癌细胞系。采用MTT生长曲线分析EGFL9对JHH-7肝癌细胞增殖能力的影响。采用裸鼠皮下成瘤实验和尾静脉注射... 目的:旨在通过裸鼠模型分析EGFL9对肝癌细胞增殖、转移能力的影响。方法:通过慢病毒介导的小干扰RNA技术构建EGFL9沉默的JHH-7肝癌细胞系。采用MTT生长曲线分析EGFL9对JHH-7肝癌细胞增殖能力的影响。采用裸鼠皮下成瘤实验和尾静脉注射转移实验观察EGFL9基因在动物活体内对JHH-7肝癌细胞增殖、转移能力的影响。结果:荧光显微镜观察结果显示JHH-7shEGFL9组和JHH-7shCtrl组肝癌细胞慢病毒感染效率高于80%,qRT-PCR检测结果显示JHH-7shEGFL9组EGFL9干扰效率达98.3%,提示EGFL9沉默的JHH-7人肝癌细胞系构建成功。MTT生长曲线结果提示,JHH-7shEGFL9组肝癌细胞的增殖能力明显低于JHH-7shCtrl组(P<0.05)。裸鼠皮下成瘤实验显示,JHH-7shEGFL9组裸鼠皮下肿瘤的质量[(0.246±0.104)g vs(0.710±0.221)g]和瘤体体积均显著小于JHH-7shCtrl组(P均<0.05)。尾静脉注射转移实验显示,JHH-7shEGFL9组裸鼠体内总荧光表达量明显少于JHH-7shCtrl组裸鼠[(2.75×108±4.18×108)vs(1.46×109±1.30×109),P<0.05],JHH-7shEGFL9组裸鼠的肺转移发生率(37.5%vs 62.5%)及肺、肾转移灶数量均少于JHH-7shCtrl组(3 vs 6,14 vs 16),但差异无统计学意义(P>0.05)。结论:沉默EGFL9基因可明显抑制裸鼠体内肝癌细胞的增殖和远处转移,提示其可能是一个潜在的肝癌治疗靶点。 展开更多
关键词 肝细胞癌 EGFL9 增殖 转移 裸鼠
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原发性肝淋巴瘤伴贫血和低蛋白血症1例报告 被引量:2
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作者 李伟锋 吴帆 《临床肝胆病杂志》 CAS 北大核心 2021年第8期1911-1913,共3页
原发性肝淋巴瘤(primary hepatic lymphoma,PHL)发病率低,约占肝脏恶性肿瘤的0.1%,占非霍奇金淋巴瘤的0.016%,占结外淋巴瘤的0.4%[1]。因此临床上对该病的认识不足,常常导致诊断困难甚至误诊。现对1例PHL患者进行报道,以提高对该病的认识。
关键词 淋巴瘤 非霍奇金 贫血 低蛋白血症
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NCEH1基因在肝癌组织与细胞系中的表达及生物学作用 被引量:1
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作者 曾裕文 张芳雍 +1 位作者 谭国钳 吴帆 《临床肝胆病杂志》 CAS 北大核心 2021年第8期1867-1872,共6页
目的了解中性胆固醇酯水解酶1(neutral cholesterol ester hydrolase 1,NCEH1)基因在肝癌组织及人肝癌细胞系中表达水平,观察NCEH1基因敲减对SMMC-7721人肝癌细胞系增殖、凋亡、侵袭及转移能力的影响。方法选取2013年1月-2019年6月在暨... 目的了解中性胆固醇酯水解酶1(neutral cholesterol ester hydrolase 1,NCEH1)基因在肝癌组织及人肝癌细胞系中表达水平,观察NCEH1基因敲减对SMMC-7721人肝癌细胞系增殖、凋亡、侵袭及转移能力的影响。方法选取2013年1月-2019年6月在暨南大学附属广州红十字会医院手术治疗的32例肝癌患者标本及对应的癌旁组织,采用实时荧光定量PCR方法检测NCEH1基因的相对表达量。从ICGC数据库下载截至2020年9月份的肝癌样本基因表达数据,应用R软件整理数据,筛选出每个样本中NCEH1基因表达量,分别采用配对Wilcoxon符号秩检验和Wilcoxon秩和检验分析肝癌与癌旁组织间的差异。采用实时荧光定量PCR方法检测NCEH1基因在SMMC-7721、Bel-7402、HepG2、Hep3B人肝癌细胞系和HL7702正常人肝细胞系中的表达水平。通过慢病毒介导的小干扰RNA(siRNA)技术构建NCEH1基因敲减的SMMC-7721人肝癌细胞系,分为NCEH1敲减组(KD组)和阴性对照组(NC组),以实时荧光定量PCR法检测NCEH1基因的敲减效率,再以MTT检测实验、Annexin V-APC单染法流式细胞仪检测、划痕愈合实验、Transwell实验和Transwell侵袭小室实验检测2组SMMC-7721肝癌细胞的增殖、凋亡、转移和侵袭能力,采用t检验对两组间数据进行统计学分析。结果NCEH1基因在肝癌组织中的平均表达量高于癌旁组织(本院标本Z=2.263,P=0.024,ICGC数据库U=18768,P<0.001)。NCEH1基因在中等侵袭转移潜能的SMMC-7721细胞系中的表达量最高;在低侵袭转移潜能的Bel-7402和HepG2细胞系中的表达水平次之,在无侵袭转移潜能的Hep3B细胞系中的表达水平最低。KD组SMMC-7721细胞中NCEH1基因的表达水平明显低于NC组(t=11.578,P=0.0003),NCEH1基因的敲减效率高达74.0%。较之NC组,KD组细胞生长速度明显减缓(t=32.10,P<0.001);细胞凋亡率明显升高(t=27.303,P<0.001);迁移率、转移和侵袭细胞数均明显降低(t值分别为9.51、38.123、22.331,P值均<0.001)。结论NCEH1基因在肝癌组织及细胞系中的表达明显升高,且可促进肝癌细胞的生长增殖及侵袭转移并抑制凋亡,提示其可能是一个潜在的肝癌治疗靶点。 展开更多
关键词 肝细胞 中性胆固醇酯水解酶1 RNA 小分子干扰
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