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大黄素甲醚对新生大鼠皮质神经元营养作用的靶点研究 被引量:1
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作者 吕若华 苏钜年 +2 位作者 周晓雯 周星 罗焕敏 《中国全科医学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第15期1730-1734,共5页
目的探讨大黄素甲醚(physcion,Phy)对新生大鼠皮质神经元营养作用的靶点。方法选用与神经营养作用相关的工具药酪氨酸激酶Trk受体抑制剂K252a、腺苷A2a受体抑制剂ZM241385及蛋白激酶C抑制剂G6976,实验设溶媒对照组、抑制剂组、Phy组... 目的探讨大黄素甲醚(physcion,Phy)对新生大鼠皮质神经元营养作用的靶点。方法选用与神经营养作用相关的工具药酪氨酸激酶Trk受体抑制剂K252a、腺苷A2a受体抑制剂ZM241385及蛋白激酶C抑制剂G6976,实验设溶媒对照组、抑制剂组、Phy组、抑制剂+Phy组,四甲基偶氮唑蓝法分析各抑制剂对神经元存活的影响,倒置显微镜下观察神经元突起生长情况,Image-pro plus 6.0软件测量突起长度,分析各抑制剂能否拮抗Phy促进突起生长的作用,初步推断Phy对皮质神经元神经营养作用的靶点。结果溶媒(0.1%DMSO)对照组、K252a(100μmol/L)组、ZM241385(20 nmol/L)组和G6976(100μmol/L)组的神经元活性分别与空白对照组比较,差异均无统计学意义(P>0.01)。K252a(100μmol/L)+Phy组神经元平均突起长度与Phy组比较,差异有统计学意义(P<0.01);而ZM241385(20 nmol/L)+Phy组、G6976(100μmol/L)+Phy组与Phy组比较,神经元平均突起长度差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 Phy对新生大鼠神经元的神经营养作用可被酪氨酸激酶Trk受体抑制剂K252a阻断,而腺苷A2a受体抑制剂ZM241385和蛋白激酶C抑制剂G6976的阻断作用则不明显,提示Phy神经营养作用的靶点可能是Trk受体,即Phy通过激动Trk受体而发挥神经营养作用的。 展开更多
关键词 大黄素甲醚 神经元 神经营养 靶点 受体 trk
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远志皂苷元对新生大鼠皮质神经元的营养作用 被引量:13
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作者 皮婷 薛小燕 +3 位作者 林炼峰 苏钜年 程欣 罗焕敏 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期40-44,共5页
目的研究远志皂苷元(senegenin)对新生大鼠皮质神经元的神经营养作用。方法原代培养新生24 h内SD大鼠皮质神经元,采用0.4%B27+DMEM/F12培养基制备营养缺乏模型。远志皂苷元0.5,1和2μmol.L-1及阳性对照组碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)10... 目的研究远志皂苷元(senegenin)对新生大鼠皮质神经元的神经营养作用。方法原代培养新生24 h内SD大鼠皮质神经元,采用0.4%B27+DMEM/F12培养基制备营养缺乏模型。远志皂苷元0.5,1和2μmol.L-1及阳性对照组碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)10μg.L-1。倒置显微镜下观察各组皮质神经元的形态及平均突起生长情况;免疫荧光染色法观察远志皂苷元的营养作用,检测神经元平均突起长度;另外在营养缺乏培养条件下,通过MTT法检测神经元的存活情况。结果分别加入药物作用3d后,远志皂苷元0.5,1及2μmol.L-1均可以促进神经元突起生长,从溶媒对照组(152±46)μm分别增加至186±51,188±34及(193±43)μm,其中远志皂苷元2μmol.L-1最为显著(P<0.01),稍弱于bFGF组(203±40)μm。营养缺乏培养条件下细胞存活率显著下降,从正常培养条件下(100.0±5.4)%降至(90.8±4.6)%(P<0.01)。远志皂苷元0.5,1及2μmol.L-1可明显改善营养缺乏引起的细胞死亡,细胞存活率分别为(109.7±3.2)%,(111.3±1.6)%及(112.9±4.8)%,且有一定的浓度依赖性(r=0.784,P<0.01)。结论远志皂苷元可以促进神经元的存活,并可促进皮质神经元突起生长,具有神经营养作用。 展开更多
关键词 远志皂苷元 皮质神经元 神经营养因子 突起生长
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大黄素甲醚对体外新生大鼠皮质神经元的营养作用 被引量:8
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作者 苏钜年 赖永长 +3 位作者 皮婷 薛小燕 林炼峰 罗焕敏 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期1790-1793,共4页
目的研究大黄素甲醚对新生大鼠皮质神经元的神经营养作用。方法体外以0.4%B27+DMEM/F12培养出生24h内的大鼠皮层神经元。采用NSE免疫细胞化学染色法进行神经元鉴定。分为溶媒对照组,大黄素甲醚(0.5、1、2、4μmol/L)组和碱性成纤维细胞... 目的研究大黄素甲醚对新生大鼠皮质神经元的神经营养作用。方法体外以0.4%B27+DMEM/F12培养出生24h内的大鼠皮层神经元。采用NSE免疫细胞化学染色法进行神经元鉴定。分为溶媒对照组,大黄素甲醚(0.5、1、2、4μmol/L)组和碱性成纤维细胞生长因子bFGF(10 ng/mL)组。显微镜观察各组皮质神经元的形态,利用软件统计神经元平均突起长度;MTT法检测神经元的存活情况;RT-PCR检测MAP-2表达量。加入Trk受体抑制剂或腺苷受体抑制剂单独作用或与大黄素甲醚相互作用,检测突起长度变化。结果与溶媒对照组相比,培养3d后的大黄素甲醚1、2、4μmol/L剂量组均可延长神经元的存活时间,促进神经元突起生长,增加MAP-2 mRNA的表达量。加入Trk受体抑制剂能抑制大黄素甲醚对神经元的影响,而加入腺苷受体抑制剂则无影响。结论大黄素甲醚对新生大鼠皮层神经元具有神经营养作用。 展开更多
关键词 大黄素甲醚 皮质神经元 神经营养 突起生长
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秋水仙素诱导的神经元突起溃变对Aβ分泌的影响 被引量:3
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作者 陈美婉 罗焕敏 +2 位作者 肖飞 邴云云 何利明 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第12期1586-1591,共6页
目的研究秋水仙素诱导的体外培养新生小鼠大脑皮层神经元突起溃变对β-淀粉样蛋白(amyloid beta-protein,Aβ)分泌的影响,并初步探讨其可能的机制。方法体外无血清培养新生小鼠大脑皮层神经元,采用NSE免疫细胞化学染色法进行神经元鉴定... 目的研究秋水仙素诱导的体外培养新生小鼠大脑皮层神经元突起溃变对β-淀粉样蛋白(amyloid beta-protein,Aβ)分泌的影响,并初步探讨其可能的机制。方法体外无血清培养新生小鼠大脑皮层神经元,采用NSE免疫细胞化学染色法进行神经元鉴定,选择培养4d的神经元进行实验;通过细胞形态学观察和四唑盐(MTT)比色实验,筛选和确定秋水仙素(colchicine)合适的造模浓度;用ELISA法检测秋水仙素组和溶媒对照组Aβ在不同时间点的分泌量;用RT-PCR测定β淀粉样前体蛋白(APP)、早老素1(PS1)和β位点APP内切酶(BACE)基因的表达。结果细胞形态学观察结果表明,终浓度为0.5mg·L-1的秋水仙素作用4h后,神经元突起明显缩短而胞体形态无变化,同时MTT比色实验测得其吸光度与对照组比差异无显著性,胞体活性没有受到明显影响。ELISA法实验结果表明,神经元突起溃变后,Aβ分泌量在4、8h时升高,与溶媒对照组相比差异有显著性。RT-PCR法表明,APP、PS1和BACE mRNA在4、8h时的表达量较溶媒对照组增加,差异有显著性。结论秋水仙素诱导的神经元突起溃变可增加Aβ分泌,其可能与增加APP,PS1和BACE基因表达有关。 展开更多
关键词 神经元突起 Β-淀粉样蛋白 秋水仙素 APP PS1 BACE
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脑组织提取液促进体外培养神经干细胞增殖 被引量:1
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作者 刘薇 肖美玲 +1 位作者 吴家华 罗焕敏 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期524-527,共4页
目的:寻找特异性的具有促神经干细胞分裂增殖作用的物质,为神经系统发育研究和神经系统疾病包括脑退行性疾病的治疗研究提供新资料。方法:制备新生鼠的前脑、中脑、后脑及小脑组织提取液,体外培养新生鼠神经干细胞,观察神经球的生长情况... 目的:寻找特异性的具有促神经干细胞分裂增殖作用的物质,为神经系统发育研究和神经系统疾病包括脑退行性疾病的治疗研究提供新资料。方法:制备新生鼠的前脑、中脑、后脑及小脑组织提取液,体外培养新生鼠神经干细胞,观察神经球的生长情况,采用MTT细胞活性检测法和特异性蛋白质免疫细胞化学染色鉴定神经干细胞的增殖能力。结果:中脑和小脑的提取液加入后有大量神经球生成,神经干细胞的特异性蛋白nestin免疫细胞化学染色呈阳性。结论:中脑和小脑的提取液可促进体外培养的神经干细胞增殖分裂,且呈一定量效关系。 展开更多
关键词 干细胞 脑组织提取液 细胞增殖 神经球 巢蛋白
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新生小鼠神经干细胞的分离、培养和鉴定 被引量:2
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作者 肖美玲 罗焕敏 +1 位作者 王成蹊 肖飞 《暨南大学学报(自然科学与医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期215-220,223,共7页
目的:探讨新生小鼠神经干细胞(NSCs)分离、培养以及鉴定的方法。方法:分离新生昆明种小鼠(出生2 4h内)的大脑组织,经胰酶消化加机械吹打后,利用无血清培养基悬浮培养细胞,获得具有自我增殖能力的细胞克隆,并将细胞克隆贴壁培养测其分化... 目的:探讨新生小鼠神经干细胞(NSCs)分离、培养以及鉴定的方法。方法:分离新生昆明种小鼠(出生2 4h内)的大脑组织,经胰酶消化加机械吹打后,利用无血清培养基悬浮培养细胞,获得具有自我增殖能力的细胞克隆,并将细胞克隆贴壁培养测其分化能力。应用抗Nestin、Musashi、SSEA - 1、NSE免疫细胞化学方法及BrdU标记方法鉴定细胞克隆。结果:从新生昆明种小鼠大脑组织分离的细胞悬液,经悬浮培养,生成大量具有增殖能力的细胞,可形成神经球(neurospheres) ,抗Nestin、Musashi、SSEA - 1阳性,BrdU标记也呈阳性。细胞克隆贴壁培养后神经球分化为神经细胞,抗NSE阳性。结论:上述方法分离的细胞具有自我更新、自我复制及分化为神经细胞的能力,属于中枢神经系统干细胞。 展开更多
关键词 神经干细胞 神经球 细胞培养 碱性成纤维生长因子 内皮生长因子
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人参皂苷Rg1对脂多糖诱导的C6细胞株淀粉样前体蛋白和脑啡肽酶表达的影响 被引量:11
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作者 罗焕敏 邓惠 +3 位作者 黄丰 肖飞 高勤 李晓光 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期1042-1045,共4页
目的 :为寻找治疗阿尔茨海默病的有效药物 ,探讨人参皂苷Rg1对脂多糖 (LPS)诱导的C6细胞株淀粉样前体蛋白 (APP)和脑啡肽酶 (NEP)表达的影响。方法 :应用MTT比色法检测一定剂量LPS(10 0mg·L-1)和不同浓度人参皂苷Rg1(2 5、5、10、... 目的 :为寻找治疗阿尔茨海默病的有效药物 ,探讨人参皂苷Rg1对脂多糖 (LPS)诱导的C6细胞株淀粉样前体蛋白 (APP)和脑啡肽酶 (NEP)表达的影响。方法 :应用MTT比色法检测一定剂量LPS(10 0mg·L-1)和不同浓度人参皂苷Rg1(2 5、5、10、2 0 μmol·L-1)对C6细胞存活率的影响 ,应用RT -PCR观察细胞中APP、NEP表达的变化。结果 :LPS作用于C6细胞株 ,C6细胞存活率下降 ,细胞内APP的表达增加 ,NEP的表达降低。人参皂苷Rg1能提高LPS处理的C6细胞存活率 ,使细胞内APP的表达降低 ,NEP的表达升高。结论 :LPS造成细胞损伤和细胞内APP表达增加、NEP表达降低 ,人参皂苷Rg1对LPS造成的细胞毒性具有拮抗作用 ,可减弱LPS引起的细胞内APP表达增强 ,减轻LPS对细胞内NEP表达的抑制。 展开更多
关键词 人参 脂多糖类 胶质瘤 淀粉样Β蛋白前体 脑啡肽酶
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