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重组人酸性成纤维生长因子对离体小鼠胸主动脉的弱缩血管作用及其机制 被引量:5
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作者 庄岚 李校堃 +4 位作者 许华 黄亚东 沈兵 刘建军 叶春玲 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期127-128,共2页
关键词 重组人酸性成纤维生长因子 胸主动脉 内皮细胞 平滑肌细胞 收缩
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一种新型天蚕素杂合肽AD和aFGF突变体融合蛋白S的构建及表达 被引量:3
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作者 苏志坚 吴晓萍 +4 位作者 郑青 黄亚东 庞实锋 冯雅 李校堃 《暨南大学学报(自然科学与医学版)》 CAS CSCD 2004年第4期420-425,共6页
目的 :构建和表达一种带有凝血酶切割位点的天蚕素杂合肽AD和人酸性成纤维细胞生长因子 (acidicfibroblastgrowthfactor ,aFGF)突变体的融合蛋白S ,在创伤皮肤表面应用时能自动裂解成有抗感染功能的天蚕素杂合肽AD和皮肤修复功能的aFGF... 目的 :构建和表达一种带有凝血酶切割位点的天蚕素杂合肽AD和人酸性成纤维细胞生长因子 (acidicfibroblastgrowthfactor ,aFGF)突变体的融合蛋白S ,在创伤皮肤表面应用时能自动裂解成有抗感染功能的天蚕素杂合肽AD和皮肤修复功能的aFGF突变体。方法 :利用PCR技术分别扩增出带有凝血酶切割位点的天蚕素杂合肽AD基因和aFGF突变体基因。再利用两者作为模板 ,用PCR方法扩增出编码融合蛋白S的DNA。将该DNA片段插入到载体pPICZαA中 ,并利用电转法将质粒转入毕赤酵母smd116 8中 ,Zeocin抗性筛选重组转化子。甲醇诱导 72h ,SDS -PAGE电泳检测融合蛋白S的表达 ,并用Western -blot杂交检测融合蛋白S的免疫原性。结果 :筛选出的重组转化株在甲醇诱导后能表达相对分子质量约为 190 0 0的融合蛋白S ,而该蛋白能与aFGF抗体产生免疫反应。结论 :用PCR方法获得编码含凝血酶切割位点的天蚕素杂合肽AD和aFGF突变体的融合蛋白SDNA 。 展开更多
关键词 天蚕素杂合肽AD aFGF突变体 融合蛋白S
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成纤细胞生长因子应用于冠心病治疗的研究现状 被引量:1
3
作者 林灼锋 李校堃 +1 位作者 郑青 黄亚东 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期283-288,共6页
缺血性心脏病是当代死亡率较高的疾病之一 ,对人类的健康带来严重的威胁。近年来 ,人们发现一些生长因子有促进缺血组织的血管新生和加速侧枝循环建立的作用 ,为改善心肌缺血 ,治疗冠心病提供了新的思路和方法。本文就FGF(FibroblastGro... 缺血性心脏病是当代死亡率较高的疾病之一 ,对人类的健康带来严重的威胁。近年来 ,人们发现一些生长因子有促进缺血组织的血管新生和加速侧枝循环建立的作用 ,为改善心肌缺血 ,治疗冠心病提供了新的思路和方法。本文就FGF(FibroblastGrowthFactor,FGF)的研究现状作相关的综述 ,国内外的实验研究表明 ,良好的冠脉侧枝血管可改善缺血心肌的血供 ,FGF对诱导缺血组织的血管再生改善血液循环具有重要的意义。 展开更多
关键词 成纤细胞生长因子 冠心病 心肌缺血 血管新生
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昆虫核多角体病毒的垂直传播 被引量:1
4
作者 冯成利 苏志坚 +1 位作者 黄亚东 冯娅 《陕西师范大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第S1期38-43,共6页
对昆虫核型多角体病毒在宿主体内的垂直传播方式、诱发因素、生物防治应用以及检测方法等方面进行了综述.
关键词 核型多角体病毒 NPV 杆状病毒 垂直传播 检测
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瘦素与绿色荧光蛋白融合基因的合成及其高效表达
5
作者 庞实锋 吴晓萍 +4 位作者 李校堃 郑青 于平野 曲红艳 王艳萍 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期276-279,共4页
目的 :为了便于追踪瘦素 (Leptin)在体内的去向 ,对其进行体内定位 ,设计合成Leptin荧光分子蛋白探针。方法 :用PCR技术将LeptincDNA与绿色荧光蛋白cDNA构建成融合基因LG ,然后将其克隆进原核表达载体pET3c中 ,构建成原核表达工程菌BL2 ... 目的 :为了便于追踪瘦素 (Leptin)在体内的去向 ,对其进行体内定位 ,设计合成Leptin荧光分子蛋白探针。方法 :用PCR技术将LeptincDNA与绿色荧光蛋白cDNA构建成融合基因LG ,然后将其克隆进原核表达载体pET3c中 ,构建成原核表达工程菌BL2 1(DE3) /pET3c LG。用Western blot杂交检测重组蛋白的免疫原性 ,用荧光显微镜观察融合蛋白及其诱导菌休的发光活性。结果 :DNA测序结果证实设计合成的融合基因与预期一致 ;构建的工程菌BL2 1(DE3) /pET3c LG获得了表达 ,融合蛋白的表达量占菌体总蛋白的 4 0 %以上 ;Western blot杂交检测表明重组蛋白具有Leptin的免疫原性 ;经IPTG诱导后的菌体及蛋白粗提液在荧光显微镜下可观察到其能发射出强烈的绿色荧光。结论 :融合基因在大肠杆菌中实现了高效表达 ,表达的融合蛋白具Leptin的免疫原性和GFP的发光特性。为利用绿色荧光蛋白标记Leptin在动物体内的药物治疗的研究提供了一种新的途径。 展开更多
关键词 瘦素 绿色荧光蛋白(GFP) 融合基因 高效表达
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非促分裂型haFGF对H_2O_2损伤心肌细胞的保护作用研究 被引量:1
6
作者 梁丽敏 林灼峰 +1 位作者 李校坤 孟娟 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期679-684,共6页
目的:了解活性氧自由基对心肌细胞的损伤状况,并在此基础上探讨非促分裂型haFGF(nm -haFGF)对心肌细胞的保护作用。方法:采用胰蛋白酶消化法,体外分离和培养新生SD乳鼠心肌细胞,建立H2 O2 损伤心肌细胞的模型,检测细胞存活率、细胞凋亡... 目的:了解活性氧自由基对心肌细胞的损伤状况,并在此基础上探讨非促分裂型haFGF(nm -haFGF)对心肌细胞的保护作用。方法:采用胰蛋白酶消化法,体外分离和培养新生SD乳鼠心肌细胞,建立H2 O2 损伤心肌细胞的模型,检测细胞存活率、细胞凋亡和观察细胞形态学的变化,以评价H2 O2 对心肌细胞的损伤状况,并加入一定浓度的nm -haFGF ,观察心肌细胞的存活率、SOD活性和MDA含量的改变,以及凋亡的变化。结果:H2 O2对心肌细胞的损伤呈浓度依赖地加剧;在H2 O2 压力作用下,10 - 80 μg/Lnm -haFGF逐步提高H2 O2 损伤心肌细胞的存活率,其中80 μg/L组的细胞存活力明显大于对照组(P <0 . 0 5 ) ,同时逐步提高SOD活性和降低MDA含量,其中4 0和80 μg/L组的SOD活性明显大于阳性对照组(P <0 .0 5 ) ,4 0和80 μg/L组的MDA含量明显小于阳性对照组(P <0. 0 5 ) ;此外,在0. 0 1mmol/LH2 O2 作用2 4h后,10 μg/L和4 0 μg/Lnm -haFGF组的心肌细胞凋亡百分率分别为32 . 4 %和10 . 7%。结论:心肌细胞的损伤与H2 O2 的浓度呈剂量依赖关系;nm -haFGF对由H2 O2 引起的心肌细胞损伤具有拮抗作用。 展开更多
关键词 成纤维细胞生长因子 过氧化氢 心肌
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