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大黄酚对H_(2)O_(2)诱导EA.hy926细胞凋亡的改善作用及其机制 被引量：1
1
作者 李思琪 陈广道 曾其毅 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期1512-1518,共7页
目的:探讨大黄酚对过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导EA.hy926细胞氧化损伤的作用,并阐明其对支气管肺发育不良(BPD)的治疗作用及其相关机制。方法:分别采用25、50、100、200、400、800和1600μmol·L^(-1)H_(2)O_(2)及0、8、16、32、64、12... 目的:探讨大黄酚对过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导EA.hy926细胞氧化损伤的作用,并阐明其对支气管肺发育不良(BPD)的治疗作用及其相关机制。方法:分别采用25、50、100、200、400、800和1600μmol·L^(-1)H_(2)O_(2)及0、8、16、32、64、128和256μmol·L^(-1)大黄酚诱导EA.hy926细胞,CCK-8法检测不同浓度H_(2)O_(2)和大黄酚处理后EA.hy926细胞活性。将细胞分为对照组、模型组(200μmol·L^(-1)H_(2)O_(2))、低剂量大黄酚组(8μmol·L^(-1)大黄酚和200μmol·L^(-1)H_(2)O_(2))和高剂量大黄酚组(256μmol·L^(-1)大黄酚和200μmol·L^(-1)H_(2)O_(2))。Western blotting法检测各组细胞质和细胞核中凋亡诱导因子(AIF)蛋白表达水平,免疫荧光法检测各组细胞AIF核转位情况,试剂盒检测各组细胞中超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白酶(Caspase)-8及Caspase-9水平。结果:不同浓度H_(2)O_(2)作用下,EA.hy926细胞呈倒置S形细胞活性曲线,细胞活性良好,半数抑制浓度(IC50)为261.52μmol·L^(-1),采用200μmol·L^(-1)H_(2)O_(2)干预24 h诱导建立细胞模型。随着大黄酚药物浓度升高,EA.hy926细胞活性无明显变化(P>0.05),采用8和256μmol·L^(-1)大黄酚进行细胞干预。Western blotting法检测,与对照组比较,模型组细胞核中AIF蛋白表达水平明显升高(P<0.05),细胞质中AIF蛋白表达水平明显降低(P<0.05);与模型组比较,低和高剂量大黄酚组细胞核中AIF蛋白表达水平均明显降低(P<0.05),细胞质中AIF蛋白表达水平均明显升高(P<0.05)。免疫荧光法检测,对照组细胞AIF定位于细胞核内较少;与对照组比较,模型组细胞AIF核转位阳性值明显升高(P<0.05);与模型组比较,低和高剂量大黄酚组细胞AIF核转位阳性值均明显降低(P<0.05)。与对照组比较,模型组细胞中SOD活性明显降低(P<0.05),MDA水平明显升高(P<0.01);与模型组比较,低和高剂量大黄酚组细胞中SOD活性均明显升高(P<0.05),MDA水平均明显降低(P<0.05或P<0.01);各组细胞中Caspase-8和Caspase-9水平比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:大黄酚通过抑制氧化应激和AIF核转位改善H_(2)O_(2)诱导的EA.hy926细胞凋亡,有助于治疗BPD。 展开更多
关键词 大黄酚 支气管肺发育不良 凋亡诱导因子 核转位 细胞凋亡 氧化应激
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