固相转染HPV16-siRNA对荷宫颈癌细胞SiHa小鼠瘤体体积及P53、P16表达的影响 被引量：6

1

作者 廖百花 冯亦军 +1 位作者 曾禄贤 肖小敏 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期509-513,共5页

目的:观察靶向基因治疗后不同时点荷宫颈癌细胞小鼠HPV16-DNA、瘤体体积、P53及P16蛋白的变化,探讨在体固相转染HPV16-siRNA的有效性。方法:采用SiHa细胞皮下注射建立荷宫颈癌细胞SCID小鼠模型。制备HPV16靶向siRNA-Lipo2000-卡波姆凝... 目的:观察靶向基因治疗后不同时点荷宫颈癌细胞小鼠HPV16-DNA、瘤体体积、P53及P16蛋白的变化,探讨在体固相转染HPV16-siRNA的有效性。方法:采用SiHa细胞皮下注射建立荷宫颈癌细胞SCID小鼠模型。制备HPV16靶向siRNA-Lipo2000-卡波姆凝胶。将40只荷宫颈癌细胞SCID小鼠随机分为对照组8只和研究组32只和研究组使用HPV16靶向siRNA-Lipo2000-卡波姆凝胶进行基因治疗,对照组仅使用Lipo2000-卡波姆凝胶处理;分别于治疗后4 d、8 d、12 d、16 d处死小鼠,每个时点研究组处死8只、对照组处死2只。PCR检测两组小鼠瘤体中HPV16-DNA滴度,测各时点的瘤体体积,常规病理切片检测肿瘤细胞形态,免疫组化检测P16及P53的表达。结果:(1)研究组治疗后8 d及12 d时点瘤体内HPV16-DNA明显降低,与对照组之间的差异显著(P<0.05),4 d及16 d 2个时点与对照组之间的差异不显著(P>0.05);(2)治疗后12 d瘤体平均体积明显缩小,与对照组之间的差异显著(P<0.05);(3)转染后12 d肿瘤细胞核异质性较对照组减轻,核浆比例减小;(4)P16的表达强度在各时点研究组与对照组之间的差异不显著(P>0.05);治疗后8 d及12 d研究组P53的表达强度明显降低,与对照组之间的差异显著(P<0.05)。结论:SCID小鼠所荷宫颈癌细胞瘤体经靶向转染HPV16-siRNA后8 d及12 d时点瘤体内HPV16-DNA和P53均较对照组明显下降,12 d瘤体体积较对照组明显下降;在体固相转染siRNA可以在一定时段内有效抑制HPV-DNA的复制及肿瘤的生长速度。 展开更多

关键词 宫颈肿瘤 RNA干扰 人乳头状瘤病毒 P53蛋白 P16蛋白

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低剂量^(125)I内照射A549肺癌的抑瘤效果及对survivin和NF-κB表达影响的研究 被引量：4

2

作者 张金山 罗良平 +4 位作者 李园 安薇 姚红霞 温戈 马文娟 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2013年第21期3492-3494,共3页

目的:观察低剂量125I持续内照射对裸鼠A549细胞肺癌的抑瘤效果和对survivin、NF-κB表达的影响,以期进一步探讨125I的抑瘤机制。方法:将25只裸鼠A549肺癌模型分为实验组(n=13)和对照组(n=12)。实验组用表观活度为5.55~7.03 MBq/粒的125... 目的:观察低剂量125I持续内照射对裸鼠A549细胞肺癌的抑瘤效果和对survivin、NF-κB表达的影响,以期进一步探讨125I的抑瘤机制。方法:将25只裸鼠A549肺癌模型分为实验组(n=13)和对照组(n=12)。实验组用表观活度为5.55~7.03 MBq/粒的125I微粒子植入治疗,对照组用剂量为0的"冷粒子"进行对照实验。观察28 d,记录两组小鼠存活率、测量残存肿瘤的体积、重量并计算肿瘤体积抑制率;HE染色及survivin、NF-κB免疫组化检测,比较125I粒子对肿瘤组织的损伤情况及两组survivin和NF-κB的表达差异。结果:实验组和对照组小鼠存活率分别为84.6%和75.0%(P>0.05),平均肿瘤体积分别为(0.36±0.15)cm3和(0.42±0.12)cm3(P>0.05),肿瘤体积抑制率为14.3%。实验组见紧贴125I粒子周边变性坏死,稍远离部位及血管周围肿瘤细胞存活明显,对照组粒子周围肿瘤细胞生长良好。实验组survivin阳性表达率(76.9%)高于对照组(58.3%,P<0.05),NF-κB在两组皆有高表达(分别为92.3%和83.3%,P>0.05)。结论:低剂量125I持续内照射A549肺癌细胞的抑瘤效果不太明显,低剂量125I辐射可上调NF-κB、survivin等细胞凋亡相关蛋白的表达而可能与低剂量辐射损伤的适应性反应有关。 展开更多

关键词 肺肿瘤 ^125I放射性粒子 低剂量率持续照射 肺癌A549细胞 SURVIVIN NF—κB

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颅脑损伤患者血液及脑脊液中IgG含量的变化与病情的关系 被引量：8

3

作者 李卫 徐如祥 +3 位作者 张建 陈善成 法志强 张梅 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期703-704,共2页

目的了解血液及脑脊液中IgG含量与颅脑损伤患者病情之间的关系。方法143例颅脑损伤患者,根据Glasgow昏迷评分分为:轻型(12～15分)41例;中型(9～11分)71例;重型(3～8分)32例。另选择9例先天性脑积水患者作为对照。分别于第4天、14天、1... 目的了解血液及脑脊液中IgG含量与颅脑损伤患者病情之间的关系。方法143例颅脑损伤患者,根据Glasgow昏迷评分分为:轻型(12～15分)41例;中型(9～11分)71例;重型(3～8分)32例。另选择9例先天性脑积水患者作为对照。分别于第4天、14天、1个月、2个月及半年5个时间点,采集患者脑脊液及血液,检测免疫球蛋白IgG含量,并根据残疾等级评分(DRS)对患者的残疾程度进行评估,分析两者间的相关程度。结果中、重型颅脑损伤患者早期血液中IgG含量下降,而脑脊液中IgG含量上升,与对照组比较有显著差异(P<0.05),其变化幅度与病情的轻重密切相关(r=0.950,P<0.01);在重型颅脑损伤患者的恢复期(14d以后),与血液中IgG含量呈负相关关系,而与脑脊液IgG含量正相关关系。结论颅脑损伤患者早期检测血液中IgG含量可以判断病情的轻重,恢复期动态检测血液及脑脊液中IgG含量可以了解病情的转归,修改治疗方案。 展开更多

关键词 颅脑损伤 IGG 脑脊液

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低强度氦-氖激光对体外培养的兔角膜内皮细胞增殖的影响 被引量：3

4

作者 刘存宁 吴静 +3 位作者 徐锦堂 陈建苏 潘红卫 赵松滨 《眼科新进展》 CAS 2007年第1期6-10,共5页

目的探讨不同条件低强度氦氖激光照射对体外培养的兔角膜内皮细胞增生的影响。方法体外培养的兔角膜内皮细胞经低强度激光照射后,MTT比色法检测其增生活性;通过生物显微镜、组织化学染色观察其照射前后形态学变化;通过流式细胞仪检测其... 目的探讨不同条件低强度氦氖激光照射对体外培养的兔角膜内皮细胞增生的影响。方法体外培养的兔角膜内皮细胞经低强度激光照射后,MTT比色法检测其增生活性;通过生物显微镜、组织化学染色观察其照射前后形态学变化;通过流式细胞仪检测其照射前后细胞周期的变化等。结果MTT检测结果显示,体外培养的兔角膜内皮细胞经低强度激光照射后,其增生活性提高,本实验中最适照射强度和时间分别是5mW·cm-2、600s;流式细胞仪细胞周期检测结果显示:激光照射组的细胞增生指数明显高于对照组,而与碱性成纤维细胞生长因子组比较差别无显著性意义。结论低强度激光在一定程度上可促进角膜内皮细胞的增生。 展开更多

关键词 低强度激光 角膜内皮细胞 细胞增生 细胞培养

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兔宫颈固相转染靶向HPV16 siRNA抑制荷宫颈癌SCID小鼠HPV的复制 被引量：3

5

作者 廖百花 冯亦军 肖小敏 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期695-699,共5页

目的:(1)探讨在体细胞固相转染siRNA的可行性、安全性及有效性。(2)探讨改变宫颈表面黏膜通透性提高转染效果的可能性。方法:(1)设计针对HPV16 siRNA,长度为21nt,采用Cy3荧光标记,制备siRNA-Lipo2000-卡波姆凝胶。(2)选新西兰雌性未孕... 目的:(1)探讨在体细胞固相转染siRNA的可行性、安全性及有效性。(2)探讨改变宫颈表面黏膜通透性提高转染效果的可能性。方法:(1)设计针对HPV16 siRNA,长度为21nt,采用Cy3荧光标记,制备siRNA-Lipo2000-卡波姆凝胶。(2)选新西兰雌性未孕兔12只,随机分为实验组及对照组,实验组在转染前使用200mmol/L高渗盐水处理兔宫颈表面10min,对照组则使用生理盐水处理兔宫颈,将siRNA-Lipo2000-卡波姆凝胶1.5mL涂于兔宫颈表面,进行siRNA转染,持续24h。24h后将兔处死,取其宫颈组织。(3)肉眼观察宫颈局部有无红肿、破溃等改变,取部分作快速冰冻切片,荧光显微镜检测转染siRNA的转染效果;部分组织进行石蜡包埋切片,普通显微镜观察宫颈局部组织细胞形态,评估siRNA-Lipo2000-卡波姆凝胶的副反应。(4)将12只荷HPV宫颈癌SCID小鼠随机分为siRNA转染组及对照组,转染组使用siRNA-Lipo2000-卡波姆凝胶进行基因治疗,对照组仅使用Lipo2000-卡波姆凝胶,转染后取瘤体,采用PCR检测治疗前后瘤体中HPV16-DNA滴度,鉴定siRNA-Lipo2000-卡波姆凝胶疗效。结果:(1)高渗氯化钠预处理组及对照组兔宫颈局部上皮组织内均可见红色的荧光;被转染组织局部无红肿、破溃等不良反应。宫颈局部组织结果正常,细胞形态完整,局部无炎性细胞浸润。(2)使用siRNA-Lipo2000-卡波姆凝胶治疗后小鼠瘤体中HPV-DNA的滴度较前明显下降(P<0.05)。结论:(1)siRNA可通过Lipo2000成功转染入在体宫颈局部组织细胞中,siRNA-Lipo2000-卡波姆凝胶对宫颈局部组织无明显毒、副反应。(2)siRNA-Lipo2000-卡波姆凝胶可有效降低荷SiHa细胞宫颈癌瘤体中HPV16-DNA滴度,具有抑制HPV复制的作用。(3)目前没有足够的证据表明转染前增加宫颈黏膜的通透性可以提高siRNA的转染效果。 展开更多

关键词 宫颈肿瘤 siRNA 固相转染 Cy3荧光标记 乳头状瘤病毒 人

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半边旗提取物5F诱导人翼状胬肉成纤维细胞凋亡的研究 被引量：2

6

作者 陈毓东 王映芬 +2 位作者 陈建苏 李志杰 陈小琳 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期1024-1027,共4页

目的:观察中药半边旗二萜类化合提取物5F对体外培养的人翼状胬肉成纤维细胞(HPFs)周期的影响及5F诱导细胞凋亡过程超微结构的变化,初步探讨5F对HPFs作用的机制。方法:应用细胞培养技术、流式细胞术(FCM)分析5F对HPF作用不同时间其细胞... 目的:观察中药半边旗二萜类化合提取物5F对体外培养的人翼状胬肉成纤维细胞(HPFs)周期的影响及5F诱导细胞凋亡过程超微结构的变化,初步探讨5F对HPFs作用的机制。方法:应用细胞培养技术、流式细胞术(FCM)分析5F对HPF作用不同时间其细胞周期及诱导凋亡的特征,电镜观测HPFs超微结构改变。结果:5F浓度32 mg/L始诱导HPFs凋亡,随5F作用时间延长细胞被抑制并由凋亡发展为坏死的形态结构改变。结论:在一定浓度下5F抑制HPFs增殖,诱导细胞凋亡、坏死,提示5F具潜在临床应用前景。 展开更多

关键词 翼状胬肉 成纤维细胞 细胞凋亡 中草药

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Gefarnate滴眼液对碱烧伤兔结膜杯状细胞密度及粘蛋白分泌功能的影响 被引量：1

7

作者 杨水平 陈剑 陈敏 《眼科研究》 CAS CSCD 北大核心 2008年第8期583-585,共3页

目的探讨gefarnate滴眼液对碱烧伤兔结膜杯状细胞密度及粘蛋白分泌功能的影响。方法新西兰白兔20只(40只眼),制作碱烧伤干眼模型,随机分为对照组和实验组,分别滴生理盐水和gefarnate滴眼液,术后7、14、21、28d分别行结膜印迹细胞学检查... 目的探讨gefarnate滴眼液对碱烧伤兔结膜杯状细胞密度及粘蛋白分泌功能的影响。方法新西兰白兔20只(40只眼),制作碱烧伤干眼模型,随机分为对照组和实验组,分别滴生理盐水和gefarnate滴眼液,术后7、14、21、28d分别行结膜印迹细胞学检查;7d、28d各取结膜进行免疫组织化学检测。结果实验组杯状细胞密度在术后1个月内逐步上调,对照组未见明显的上调作用,两组差异有统计学意义(P<0.05);实验组MUC5AC表达率和积分在术后7d和28d均比对照组明显增高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论Gefarnate滴眼液可明显促进杯状细胞增生和粘蛋白MUC5AC的分泌,暗示其在干眼治疗方面具有一定的应用前景。 展开更多

关键词 GEFARNATE 杯状细胞 粘蛋白 干眼

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头针结合计算机辅助训练对脑卒中后记忆障碍的影响 被引量：8

8

作者 韩冰 冉春风 +1 位作者 张建博 华桦 《中国康复医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期653-655,共3页

目的:探讨头针结合计算机辅助记忆训练对脑卒中后记忆障碍患者的影响。方法:将符合入选标准的157例脑卒中后记忆障碍患者随机分为人工训练组、计算机辅助训练(computer-assisted training,CAT)组和头针结合CAT组,完成本研究的有122例患... 目的:探讨头针结合计算机辅助记忆训练对脑卒中后记忆障碍患者的影响。方法:将符合入选标准的157例脑卒中后记忆障碍患者随机分为人工训练组、计算机辅助训练(computer-assisted training,CAT)组和头针结合CAT组,完成本研究的有122例患者,所有患者均接受传统康复训练(Bobath、Brunnstrom等神经发育促进技术)和药物治疗,人工训练组给予人工记忆康复训练,CAT组给予计算机辅助记忆训练,头针CAT组是在CAT组的基础上,增加头针治疗,每周训练5天,2次/d(头针1次/d),30mi/次,训练时间均为6周,在治疗前和治疗6周后对所有患者进行临床记忆量表评定。结果:治疗6周后三组患者指向记忆、联想学习、图像自由回忆、无意义图形再认等项目评分较训练前均有提高(P<0.05),三组比较,头针CAT组临床记忆量表大部分指标前后差值变化高于其他两组(P<0.05)。结论:头针结合计算机辅助训练能有效提高脑卒中后记忆障碍患者的记忆功能,疗效优于单纯计算机辅助训练或人工训练。 展开更多

关键词 计算机辅助训练 头针 记忆障碍 脑卒中

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重编程诱导多功能干细胞的研究进展 被引量：4

9

作者 郭晓令 刘庆 +3 位作者 王婵 郭永龙 余榕捷 陈建苏 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期1218-1222,1227,共6页

诱导多功能干细胞（ induced pluripotent stem cells，iPSCs），即通过不同的转导方法，将影响重编程的关键转录因子、RNA、蛋白或小分子化合物导入到成体细胞，使其＂返老还童＂回到胚胎干细胞状态，并能够被诱导分化产生不同的细胞... 诱导多功能干细胞（ induced pluripotent stem cells，iPSCs），即通过不同的转导方法，将影响重编程的关键转录因子、RNA、蛋白或小分子化合物导入到成体细胞，使其＂返老还童＂回到胚胎干细胞状态，并能够被诱导分化产生不同的细胞类型。 iPSCs 的问世，对干细胞的发展具有划时代的意义，使得患者来源的体细胞可以被诱导成iPSCs，用于相关疾病的检测分析与干细胞治疗，规避了免疫排斥和道德论理等问题。但是由于iPSCs诱导的低效性和致瘤性，使得这个＂新星＂在临床中的应用被质疑，目前科学家一直围绕这2个核心问题展开研究，通过改进转导途径，改变重编程方法来提高它的安全性和效率，并取得了一系列喜人的结果，从而使iPSCs未来用于临床的前景变得越来越光明。 展开更多

关键词 诱导多能性干细胞 安全性 有效性

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地塞米松诱导晶状体上皮细胞凋亡的实验研究 被引量：1

10

作者 杨水平 祁明信 陈剑 《眼科新进展》 CAS 2008年第6期416-418,共3页

目的探讨地塞米松(dexamethasone,Dex)诱发体外培养的牛晶状体上皮细胞(lens epithelial cells,LEC)凋亡情况。方法取健康1a龄内牛眼,提取LEC,传代培养;分为2组:对照组和Dex组。透射电镜观察Dex诱导LEC凋亡的超微结构改变,流式细胞术探... 目的探讨地塞米松(dexamethasone,Dex)诱发体外培养的牛晶状体上皮细胞(lens epithelial cells,LEC)凋亡情况。方法取健康1a龄内牛眼,提取LEC,传代培养;分为2组:对照组和Dex组。透射电镜观察Dex诱导LEC凋亡的超微结构改变,流式细胞术探讨Dex对LEC核内DNA含量的影响。结果透射电镜下可观察到Dex组LEC细胞核内染色质凝集、固缩、边集、核碎裂等细胞凋亡的形态学改变,核内DNA含量下降,出现典型的细胞凋亡峰,凋亡百分率从第1天的(1.522±0.593)%提高到第7天的(25.318±3.432)%,与对照组相比有统计学意义(P<0.01),并呈时间依赖关系。结论Dex诱导LEC凋亡可能是激素性白内障发生发展的细胞学和分子生物学机制之一。 展开更多

关键词 地塞米松 晶状体上皮细胞 凋亡 白内障

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P-选择素对角膜上皮创伤修复及其中性粒细胞迁移的影响

11

作者 徐志钢 李志杰 C.Wayne Smith 《眼科研究》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期383-385,共3页

目的观察P-选择素对角膜上皮创伤修复及其中性粒细胞迁移的影响。方法选用P-选择素基因敲除小鼠与野生型小鼠进行对比,观察角膜上皮创伤修复过程,同时用免疫组织化学方法观察中性粒细胞在角膜的迁移,并用酶联免疫吸附测定方法检测角膜... 目的观察P-选择素对角膜上皮创伤修复及其中性粒细胞迁移的影响。方法选用P-选择素基因敲除小鼠与野生型小鼠进行对比,观察角膜上皮创伤修复过程,同时用免疫组织化学方法观察中性粒细胞在角膜的迁移,并用酶联免疫吸附测定方法检测角膜中细胞因子和趋化因子的变化。结果与野生型小鼠相比,P-选择素基因敲除小鼠的角膜创伤修复延迟,向角膜迁移的中性粒细胞数量减少;中性粒细胞的迁移与趋化因子和细胞因子有密切的关系。结论P-选择素表达缺陷可导致角膜上皮创伤修复的延迟。这种延迟可能与创伤后中性粒细胞向创伤区迁移数量减少有关。 展开更多

关键词 P-选择素 角膜上皮 创伤修复 趋化因子 细胞因子 中性粒细胞迁移

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5F对人翼状胬肉成纤维细胞增生及Fas表达的调控

12

作者 陈毓东 王映芬 梁俊文 《眼科研究》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期603-606,共4页

目的观察中药半边旗二萜类化合物5F(5F)对体外培养的人翼状胬肉成纤维细胞(HPFs)凋亡的影响以及对Fas基因表达的调控,探讨该药对HPFs作用的机制。方法应用荧光染色观察HPFs的形态改变,免疫细胞化学法(ICC)检测5F对凋亡调控基因Fas表达... 目的观察中药半边旗二萜类化合物5F(5F)对体外培养的人翼状胬肉成纤维细胞(HPFs)凋亡的影响以及对Fas基因表达的调控,探讨该药对HPFs作用的机制。方法应用荧光染色观察HPFs的形态改变,免疫细胞化学法(ICC)检测5F对凋亡调控基因Fas表达的影响。结果5F质量浓度为32μg/ml时诱导HPFs凋亡并使Fas基因表达上调,质量浓度为8μg/ml时Fas阳性表达率与对照组比较无显著统计学差异,32μg/ml时Fas阳性表达率与对照组呈显著统计学差异(P<0·01)。结论5F对HPFs增生的抑制作用与促凋亡基因Fas表达上调密切相关。 展开更多

关键词 翼状胬肉 成纤维细胞 5F 凋亡 FAS

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