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强阴离子交换色谱结合分子排阻色谱纯化血清中免疫球蛋白和白蛋白
被引量:
7
1
作者
秦宗华
陈婷
李任强
《色谱》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第8期851-855,共5页
动物血清中免疫球蛋白和白蛋白的等电点分别约为7.8和4.8,根据它们等电点的较大差别,利用Q Sepha-roseTM-XL强阴离子交换色谱结合分子排阻色谱同时分离纯化这2种蛋白。以0.02mol/L pH 8.0的Tris-HCl缓冲液平衡离子交换色谱柱并将已稀释1...
动物血清中免疫球蛋白和白蛋白的等电点分别约为7.8和4.8,根据它们等电点的较大差别,利用Q Sepha-roseTM-XL强阴离子交换色谱结合分子排阻色谱同时分离纯化这2种蛋白。以0.02mol/L pH 8.0的Tris-HCl缓冲液平衡离子交换色谱柱并将已稀释10倍的高免疫的兔血清上样,采用pH分段洗脱。在pH 6.0时以0.3mL/min低流速洗脱得到高纯度的免疫球蛋白,继续在pH 4.0时洗脱,再辅以Sephadex G-75分子排阻色谱可获得纯度大于95%的白蛋白。对纯化后的蛋白进行活性检测,证明所纯化的免疫球蛋白和白蛋白都保持正常的生物活性。蛋白质含量测定说明免疫球蛋白的纯化回收率达到95%以上,而白蛋白的纯化回收率大于90%。该法简便快速,可同时从动物血清中纯化出保持生物活性的免疫球蛋白和白蛋白,纯化效率高。
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关键词
阴离子交换色谱
分子排阻色谱
免疫球蛋白
白蛋白
动物血清
纯化
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职称材料
题名
强阴离子交换色谱结合分子排阻色谱纯化血清中免疫球蛋白和白蛋白
被引量:
7
1
作者
秦宗华
陈婷
李任强
机构
暨南大学生物工程学系广东省分子免疫与抗体工程重点实验室
出处
《色谱》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第8期851-855,共5页
基金
暨南大学自然科学基金项目(109057,640073)
文摘
动物血清中免疫球蛋白和白蛋白的等电点分别约为7.8和4.8,根据它们等电点的较大差别,利用Q Sepha-roseTM-XL强阴离子交换色谱结合分子排阻色谱同时分离纯化这2种蛋白。以0.02mol/L pH 8.0的Tris-HCl缓冲液平衡离子交换色谱柱并将已稀释10倍的高免疫的兔血清上样,采用pH分段洗脱。在pH 6.0时以0.3mL/min低流速洗脱得到高纯度的免疫球蛋白,继续在pH 4.0时洗脱,再辅以Sephadex G-75分子排阻色谱可获得纯度大于95%的白蛋白。对纯化后的蛋白进行活性检测,证明所纯化的免疫球蛋白和白蛋白都保持正常的生物活性。蛋白质含量测定说明免疫球蛋白的纯化回收率达到95%以上,而白蛋白的纯化回收率大于90%。该法简便快速,可同时从动物血清中纯化出保持生物活性的免疫球蛋白和白蛋白,纯化效率高。
关键词
阴离子交换色谱
分子排阻色谱
免疫球蛋白
白蛋白
动物血清
纯化
Keywords
anion exchange chromatography
molecular exclusion chromatography
immunoglobulin
albumin
animal serum
purification
分类号
O658 [理学—分析化学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
强阴离子交换色谱结合分子排阻色谱纯化血清中免疫球蛋白和白蛋白
秦宗华
陈婷
李任强
《色谱》
CAS
CSCD
北大核心
2012
7
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