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人HSV-1 UL40基因重组质粒的构建及其在siRNA筛选中的应用
被引量:
2
1
作者
任哲
张美英
+7 位作者
王一飞
朱钦昌
张春龙
陆大祥
胡巢凤
李久香
张佩琢
杨志荣
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第12期2444-2447,共4页
目的:快速筛选出高效沉默人HSV-1 UL40基因的siRNA,为进一步应用RNA干扰的相关研究奠定基础。方法:应用RT-PCR扩增人HSV-1F株UL40基因,将其连接到pEGFP-N1构建pEGFP-N1-UL40融合蛋白表达质粒。将化学合成的针对UL40基因的siRNA与重组质...
目的:快速筛选出高效沉默人HSV-1 UL40基因的siRNA,为进一步应用RNA干扰的相关研究奠定基础。方法:应用RT-PCR扩增人HSV-1F株UL40基因,将其连接到pEGFP-N1构建pEGFP-N1-UL40融合蛋白表达质粒。将化学合成的针对UL40基因的siRNA与重组质粒共转染Vero细胞,通过观察绿色荧光蛋白报告基因的表达筛选高效沉默人HSV-1 UL40基因的siRNA。结果:倒置荧光显微镜观察发现设计的4对siRNA中siRNA3和siRNA4能明显降低绿色荧光蛋白的表达,流式细胞仪检测证明siRNA3和siRNA4对目的基因沉默效率分别达到76.99%和84.00%。结论:成功构建了人HSV-1 UL40基因融合表达载体pEGFP-N1-UL40,并利用该载体筛选出2对高效沉默人HSV-1 UL40基因的siRNA。
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关键词
疱疹病毒Ⅰ型
人
基因
UL40
SIRNA
在线阅读
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职称材料
题名
人HSV-1 UL40基因重组质粒的构建及其在siRNA筛选中的应用
被引量:
2
1
作者
任哲
张美英
王一飞
朱钦昌
张春龙
陆大祥
胡巢凤
李久香
张佩琢
杨志荣
机构
四川
大学
生命科学学院
暨南大学生物医药研究与开发基地
暨南大学
医学院
上海吉玛制药技术有限公司
出处
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第12期2444-2447,共4页
基金
广东省工业攻关计划项目(2005A10904001)
暨南大学重点实验室开放基金资助项目(No2005)
文摘
目的:快速筛选出高效沉默人HSV-1 UL40基因的siRNA,为进一步应用RNA干扰的相关研究奠定基础。方法:应用RT-PCR扩增人HSV-1F株UL40基因,将其连接到pEGFP-N1构建pEGFP-N1-UL40融合蛋白表达质粒。将化学合成的针对UL40基因的siRNA与重组质粒共转染Vero细胞,通过观察绿色荧光蛋白报告基因的表达筛选高效沉默人HSV-1 UL40基因的siRNA。结果:倒置荧光显微镜观察发现设计的4对siRNA中siRNA3和siRNA4能明显降低绿色荧光蛋白的表达,流式细胞仪检测证明siRNA3和siRNA4对目的基因沉默效率分别达到76.99%和84.00%。结论:成功构建了人HSV-1 UL40基因融合表达载体pEGFP-N1-UL40,并利用该载体筛选出2对高效沉默人HSV-1 UL40基因的siRNA。
关键词
疱疹病毒Ⅰ型
人
基因
UL40
SIRNA
Keywords
Herpesvirus 1, human
Gene, UL40
siRNA
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
人HSV-1 UL40基因重组质粒的构建及其在siRNA筛选中的应用
任哲
张美英
王一飞
朱钦昌
张春龙
陆大祥
胡巢凤
李久香
张佩琢
杨志荣
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2007
2
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