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基于毛细管区带电泳系统的南方水牛奶酪蛋白分析技术研究 被引量:14
1
作者 王丽娜 李子超 +1 位作者 李昀锴 徐明芳 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期264-268,共5页
该文建立了一种毛细管区带电泳(CZE)分离南方水牛奶酪蛋白(CN)的方法,并对其进行定量分析。采用50.2cm×75μmi.d.的未涂层熔融石英毛细管柱,在运行电压为25kV,柱温为25℃,检测波长为214nm的条件下,研究了缓冲液体系、... 该文建立了一种毛细管区带电泳(CZE)分离南方水牛奶酪蛋白(CN)的方法,并对其进行定量分析。采用50.2cm×75μmi.d.的未涂层熔融石英毛细管柱,在运行电压为25kV,柱温为25℃,检测波长为214nm的条件下,研究了缓冲液体系、缓冲液浓度、pH、尿素浓度及进样时间等对水牛奶酪蛋白分离的影响。实验测得α—CN、β-CN、κ-CN在0.5~5.0g/L范围内线性关系良好,相关系数均不低于0.9980,加标回收率为98%~106%,酪蛋白各组分的保留时间、峰面积及峰高的相对标准偏差(RSD)分别不高于0.67%、3.0%及3.2%。该法简便、快速、准确,可用于水牛奶及其乳制品的质量控制和定量检测。 展开更多
关键词 毛细管区带电泳 酪蛋白 水牛奶 定量分析
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基于双向电泳和质谱联用技术的水牛乳源酪蛋白的研究 被引量:6
2
作者 向明霞 王丽娜 +2 位作者 李子超 成希飞 徐明芳 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期188-190,200,共4页
利用双向电泳和基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-MS)联用技术对水牛乳酪蛋白与其他乳源蛋白差异性进行了研究。根据Image Master 2D Platinum图像分析软件对不同乳源酪蛋白的双向电泳(2-DE)图谱进行蛋白斑点的匹配分析,获得21... 利用双向电泳和基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-MS)联用技术对水牛乳酪蛋白与其他乳源蛋白差异性进行了研究。根据Image Master 2D Platinum图像分析软件对不同乳源酪蛋白的双向电泳(2-DE)图谱进行蛋白斑点的匹配分析,获得21个存在于水牛奶中,主要分布在低丰度蛋白区的差异蛋白点,经质谱分析,得到4个属于水牛奶酪蛋白的主要组分,另外发现两个与水牛奶中的蛋白有较高同源性的新组分。 展开更多
关键词 水牛奶 酪蛋白 双向电泳 质谱
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光生物反应器中光衰减特征与螺旋藻生长动力学研究 被引量:11
3
作者 徐明芳 周远志 区德洪 《海洋科学》 CAS CSCD 北大核心 2001年第11期32-37,共6页
分析了光照强度在光生物反应器中的分布特征。结果表明 ,当光波长及光传播的路径确定时 ,光生物反应器中光衰减特征主要受培养物生物量浓度的影响 ,由回归的模型对实验数据的拟合可分析光衰减特征与培养物生物量浓度的相关性 ,为光生物... 分析了光照强度在光生物反应器中的分布特征。结果表明 ,当光波长及光传播的路径确定时 ,光生物反应器中光衰减特征主要受培养物生物量浓度的影响 ,由回归的模型对实验数据的拟合可分析光衰减特征与培养物生物量浓度的相关性 ,为光生物反应器中平均光照强度的确定奠定基础。在光生物反应器中 ,当营养底物和环境温度不是螺旋藻生长限制因子时 ,通过平均光照强度对螺旋藻比生长速率的影响分析 ,结果表明 ,在实验条件下 ,螺旋藻比生长速率与平均光照强度的动力学模型可用Aiba光生长抑制方程描述 ,光亲和系数Ks 为238.29μmol/(m2·s) ,光抑制系数Ki为0.00493s·m2/μmol,光生物反应器中螺旋藻生长的饱和光照强度出现在190~272μmol/(m2·s)的范围内。 展开更多
关键词 螺旋藻 光衰减 光生长动力学 光生物反应器
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ACSL3在前列腺癌细胞系中的表达及其对前列腺癌转移的影响 被引量:3
4
作者 李科 陈怡 +1 位作者 董艳 叶志强 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期250-255,共6页
目的:观察比较长链脂酰辅酶A合成酶3(long-chain acyl-CoA synthetase 3,ACSL3)在前列腺正常上皮细胞和不同类型前列腺癌细胞系中的表达差异,通过构建ACSL3基因稳定表达的前列腺癌细胞株研究ACSL3对前列腺癌细胞侵袭能力的影响。方法:利... 目的:观察比较长链脂酰辅酶A合成酶3(long-chain acyl-CoA synthetase 3,ACSL3)在前列腺正常上皮细胞和不同类型前列腺癌细胞系中的表达差异,通过构建ACSL3基因稳定表达的前列腺癌细胞株研究ACSL3对前列腺癌细胞侵袭能力的影响。方法:利用RT-PCR方法检测ACSL3 mRNA在前列腺正常上皮细胞、局限性及转移性前列腺癌细胞中的表达情况,分析其表达与前列腺癌发生、进展及转移的关系;以前列腺癌细胞基因组cDNA为模板,通过PCR扩增ACSL3基因,重组构建含有Flag标签的pCDNA3.1(+)-Flag-ACSL3质粒,包装慢病毒,转染前列腺癌细胞,通过荧光显微镜、RT-PCR和Western blotting等方法鉴定ACSL3在细胞内的表达情况;利用Transwell侵袭实验研究ACSL3对前列腺癌细胞侵袭能力的改变。结果:较前列腺正常上皮细胞,各种前列腺癌细胞中ACSL3 mRNA表达均明显下降。同时,局限性前列腺癌细胞中ACLS3 mRNA表达较转移性前列腺癌细胞明显升高;此外,雄激素非依赖性前列腺癌细胞比雄激素依赖性前列腺癌细胞中ACLS3 mRNA表达显著降低。进而,我们成功构建和包装了表达ACSL3基因的pCDNA3.1(+)-Flag-ACSL3重组质粒及慢病毒,并转染前列腺癌细胞,筛选出稳定表达株;并且,通过Transwell实验证实ACSL3表达与前列腺癌细胞的侵袭能力呈负相关。结论:前列腺正常上皮细胞及不同前列腺癌细胞系中ACSL3的表达存在明显差异,提示ACSL3可能在前列腺癌的发生发展中起重要作用;成功构建了ACSL3基因稳定表达的前列腺癌细胞株,并初步证实ACSL3过表达可以抑制前列腺癌细胞的侵袭力。 展开更多
关键词 前列腺肿瘤 长链脂酰辅酶A合成酶3 肿瘤侵袭
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蕈菌云芝用于酒精废液生物漂白及收获菌丝体的研究 被引量:4
5
作者 冉艳红 于淑娟 《现代化工》 EI CAS CSCD 北大核心 2004年第4期43-45,47,共4页
利用蕈菌云芝对不同稀释度酒精废液进行生物漂白及收获菌丝体研究。摇瓶培养结果表明,云芝对20%的酒精废液的脱色率为50%,生物量为8.1g/L。培养过程中培养液pH值呈上升趋势。利用5L发酵罐,通过控制发酵过程中pH值和通气量,培养54h,使脱... 利用蕈菌云芝对不同稀释度酒精废液进行生物漂白及收获菌丝体研究。摇瓶培养结果表明,云芝对20%的酒精废液的脱色率为50%,生物量为8.1g/L。培养过程中培养液pH值呈上升趋势。利用5L发酵罐,通过控制发酵过程中pH值和通气量,培养54h,使脱色率上升到65%,生物量增加到10.9g/L,COD去除率为71%;通过检测发酵液中还原糖变化规律表明云芝对废水中的有色物质有分解利用的过程。与其他生物法处理酒精废液相比,云芝表现出较强的有机负荷承受能力、脱色能力及运行周期短的优势。 展开更多
关键词 云芝 酒精废液 生物漂白 菌丝体
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鳜鱼感官发育与摄食行为模式定向调控技术 被引量:2
6
作者 梁旭方 《水利渔业》 北大核心 2005年第3期19-21,共3页
鳜鱼是我国特有的淡水鱼珍品,其人工饲料问题急待研究解决。探讨了鳜鱼摄食行为发育调控机理以及控制其趋光行为与猎物印记形成的内外因子,为定向改造鳜鱼摄食习性提供有效手段,认为这是最终解决鳜鱼人工饲料难题的技术关键。
关键词 鳜鱼 调控技术 行为模式 感官 饲料问题 趋光行为 调控机理 行为发育 摄食习性 定向改造 人工饲料 淡水鱼 最终解
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达沙替尼对人骨髓间充质干细胞生物学特性的影响 被引量:2
7
作者 王茜 周兆 +3 位作者 张雷 吕林林 段锋祺 刘革修 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期993-999,共7页
目的:在体外探索达沙替尼对人骨髓来源间充质干细胞(hBMSCs)的活力、迁移、细胞周期和凋亡的影响以及潜在的信号通路,以评估达沙替尼在临床应用中对骨髓造血微环境的影响。方法:CCK-8法检测细胞活力;划痕实验检测细胞迁移;流式细胞术检... 目的:在体外探索达沙替尼对人骨髓来源间充质干细胞(hBMSCs)的活力、迁移、细胞周期和凋亡的影响以及潜在的信号通路,以评估达沙替尼在临床应用中对骨髓造血微环境的影响。方法:CCK-8法检测细胞活力;划痕实验检测细胞迁移;流式细胞术检测细胞周期和凋亡;同时采用吖啶橙/溴化乙啶法检测细胞凋亡;酶联免疫吸附实验检测细胞转化生长因子β1(TGF-β1)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的分泌情况;Western blot检测蛋白激酶B(Akt)蛋白的表达和磷酸化以及cleaved caspase-3的蛋白水平。结果:与对照组相比,达沙替尼(1~10nmol/L)抑制hBMSCs的活力和迁移;在随后的实验中使用的浓度为7 nmol/L。达沙替尼促进细胞凋亡,并使更多细胞的周期阻滞在G_1期。此外,hBMSCs TGF-β1和TNF-α的分泌量显著增加。7 nmol/L达沙替尼组cleaved caspase-3的蛋白水平增加,胞内Akt的蛋白量下调且其磷酸化受到抑制。结论:达沙替尼以浓度依赖性的方式抑制hBMSCs的活力和迁移,并促进TGF-β1和TNF-α的分泌,诱导细胞G_1期阻滞和凋亡;达沙替尼可能通过影响胞内Akt蛋白的表达和磷酸化调控上述细胞学行为。 展开更多
关键词 人骨髓间充质干细胞 达沙替尼 细胞增殖 细胞迁移 细胞凋亡 细胞周期 蛋白激酶B
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鲤鱼生长激素在毕赤酵母中的表达 被引量:29
8
作者 李英华 白俊杰 +4 位作者 李新辉 叶星 简清 罗建仁 梁旭方 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期488-491,共4页
将编码鲤鱼 (Cyprinuscarpio )生长激素 (GH)成熟肽的cDNA克隆到毕赤酵母 (P .pastoris)胞内表达载体pHIL D2中 ,构建重组表达质粒pHIL D2 GH .转化组氨酸缺陷型酵母GS115,获得表达鲤鱼GH的酵母工程菌 .经甲醇诱导 ,SDS PAGE和Western... 将编码鲤鱼 (Cyprinuscarpio )生长激素 (GH)成熟肽的cDNA克隆到毕赤酵母 (P .pastoris)胞内表达载体pHIL D2中 ,构建重组表达质粒pHIL D2 GH .转化组氨酸缺陷型酵母GS115,获得表达鲤鱼GH的酵母工程菌 .经甲醇诱导 ,SDS PAGE和Western印迹检测表明 ,鲤鱼GH在酵母中得到表达 ,表达产物在胞内以可溶状态存在 ,具有鲤鱼GH的免疫活性 .用诱导后的酵母投喂罗非鱼 。 展开更多
关键词 鲤鱼生长激素 毕赤酵母 胞内表达 促生长作用
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球形棕囊藻溶血毒素对兔红细胞作用的AFM观察 被引量:8
9
作者 刘洁生 彭喜春 杨维东 《热带海洋学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期55-58,共4页
溶血性毒素是有毒藻类分泌较多的一类毒素,具有溶血活性。运用光学显微镜和原子力显微镜(AFM)观察了球形棕囊藻Phaeocystis globosa溶血毒素对兔红细胞的溶血现象。结果显示,经毒素处理后的兔血红细胞边缘凹凸不平,只剩下一小部分残骸... 溶血性毒素是有毒藻类分泌较多的一类毒素,具有溶血活性。运用光学显微镜和原子力显微镜(AFM)观察了球形棕囊藻Phaeocystis globosa溶血毒素对兔红细胞的溶血现象。结果显示,经毒素处理后的兔血红细胞边缘凹凸不平,只剩下一小部分残骸。该毒素可能由于其双亲性质与血红细胞膜表面的膜脂连接,产生脂溶效应,使细胞膜破坏。 展开更多
关键词 球形棕囊藻Phaeocystis GLOBOSA 溶血毒素 原子力显微镜
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利用啤酒废酵母深层发酵培养假蜜环菌的研究 被引量:2
10
作者 冉艳红 邱皓坚 +1 位作者 刘大岭 梁郁强 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期58-60,共3页
明确了假蜜环菌试验菌株摇瓶培养条件为:碳源浓度25g/L,氮源浓度0.336g/L,初始pH4.0,种龄为7d的液体种子接种量为10%(V/V),在27℃,摇床转速140r/min。对照此培养条件,确定假蜜环菌深层发酵培养基的组成为:经过破壁处理啤酒废酵母粉4.8g... 明确了假蜜环菌试验菌株摇瓶培养条件为:碳源浓度25g/L,氮源浓度0.336g/L,初始pH4.0,种龄为7d的液体种子接种量为10%(V/V),在27℃,摇床转速140r/min。对照此培养条件,确定假蜜环菌深层发酵培养基的组成为:经过破壁处理啤酒废酵母粉4.8g/L,葡萄糖24g/L。相同培养条件下,菌丝体收获量为干重13.5g/L,生物量高于利用蛋白胨培养基扩大培养的产量:13.0g/L。 展开更多
关键词 啤酒废酵母 深层发酵 假蜜环菌
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两种快速分离检测南方水牛乳乳清蛋白方法的比较 被引量:1
11
作者 成希飞 李昀锴 +1 位作者 向明霞 徐明芳 《中国乳品工业》 CAS 北大核心 2012年第5期55-57,64,共4页
采用了毛细管电泳法(CE)和反相高效液相色谱法(RP-HPLC)两种方法对乳源乳清蛋白进行分离检测。结果表明:两种方法都能够有效分离乳清蛋白中的BSA,α-La,β-Lg,并能对各种蛋白进行定性定量分析。相比而言,毛细管电泳法分离更加快速,整个... 采用了毛细管电泳法(CE)和反相高效液相色谱法(RP-HPLC)两种方法对乳源乳清蛋白进行分离检测。结果表明:两种方法都能够有效分离乳清蛋白中的BSA,α-La,β-Lg,并能对各种蛋白进行定性定量分析。相比而言,毛细管电泳法分离更加快速,整个分离过程7 min左右即可完成,能分离出IgG组分。而RP-HPLC分离时间更长,需要45 min才能完全分离,并且无法分离出IgG组分。 展开更多
关键词 毛细管电泳法 RP-HPLC 牛奶 乳清蛋白
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鳜鱼脾肾坏死病毒功能基因研究 被引量:1
12
作者 崔郁敏 李贵生 +1 位作者 方玲 梁旭方 《水利渔业》 北大核心 2005年第5期106-109,共4页
鳜鱼脾肾坏死病毒(ISKNV)是引起养殖鳜鱼大量死亡的传染性疾病的病原体,经研究证实其为虹彩病毒科中的一种。概括了近年国内外有关鳜鱼脾肾坏死病毒分子生物学的研究进展,重点论述了病毒功能基因及调控的相关研究,同时介绍了目前采用的... 鳜鱼脾肾坏死病毒(ISKNV)是引起养殖鳜鱼大量死亡的传染性疾病的病原体,经研究证实其为虹彩病毒科中的一种。概括了近年国内外有关鳜鱼脾肾坏死病毒分子生物学的研究进展,重点论述了病毒功能基因及调控的相关研究,同时介绍了目前采用的几种特异的病毒检测方法,并指出其各自的优缺点。 展开更多
关键词 鳜鱼 脾肾坏死病毒 功能基因 病毒检测
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云芝漂白模拟糖厂废水及收获菌丝体工艺条件研究(Ⅰ) 被引量:2
13
作者 冉艳红 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第1期128-130,共3页
以脱色效率和生物量为指标,采用摇瓶培养研究云芝对模拟糖厂废水生物漂白及收获菌丝体的最优培养条件。研究表明:培养温度30℃、pH值为4、180r/min、10%的接种量为收获最大数量菌丝体和达到较高漂白效率的最适培养条件。
关键词 云芝菌 漂白 糖厂废水 菌丝体
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云芝漂白模拟糖厂废水及收获菌体营养条件研究(Ⅱ) 被引量:1
14
作者 冉艳红 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第5期134-138,共5页
本文研究了云芝菌株在模拟废水中生长,获得对废水较高的漂白效果以及最大菌丝体产量的培养基成份为:模拟废水培养基中初始外加碳源-葡萄糖添加量为1%、氮浓度范围是6~12mmol/L、CaCl2浓度为0.05mol/L、RS为消泡剂。利用均匀实验设计结... 本文研究了云芝菌株在模拟废水中生长,获得对废水较高的漂白效果以及最大菌丝体产量的培养基成份为:模拟废水培养基中初始外加碳源-葡萄糖添加量为1%、氮浓度范围是6~12mmol/L、CaCl2浓度为0.05mol/L、RS为消泡剂。利用均匀实验设计结果表明氮浓度是影响云芝对废水脱色率的主要因素,氮源与VB1含量的交互作用项对生物量的影响最为显著。 展开更多
关键词 云芝菌 漂白 模拟糖厂废水 菌丝体 营养条件
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硒-乳蛋白活性肽开发及应用前景 被引量:1
15
作者 徐明芳 李子超 +1 位作者 李昀锴 王丽娜 《中国乳业》 2010年第9期60-62,共3页
1酶解乳蛋白制备生物活性肽的研究现状牛乳含有丰富、优质、全价的营养成分,其蛋白质质量浓度为30~50g/L(80%为酪蛋白,20%为乳清蛋白),
关键词 乳蛋白活性肽 应用 开发 生物活性肽 营养成分 质量浓度 乳清蛋白
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同源异型框基因Pem研究的概况
16
作者 林琳 李月琴 周天鸿 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期334-336,共3页
Pem gene is one of the homeobox gene. Unlike members of Hox gene family, Pem gene is unique located at the proximal end of the X chromosome and its expression has been detected in several immortalized and transformed ... Pem gene is one of the homeobox gene. Unlike members of Hox gene family, Pem gene is unique located at the proximal end of the X chromosome and its expression has been detected in several immortalized and transformed cells, placenta, embryos and reproductive tissues. Numeral studies showed that its expression is controlled by hormone such as androgen. This review discussed the possible role of Pem in regulating genes involved in the differentiation and development of extraembryonic tissue, spermatogenesis and sperm maturation. 展开更多
关键词 Pem基因 发育生物学 研究 同源异型框
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生长抑素受体在人神经内分泌癌组织中的表达及受体激活对细胞生长的抑制 被引量:2
17
作者 陈书凯 钟文萍 +1 位作者 周天鸿 邹奕 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期310-317,共8页
生长抑素(somatostatin,SST)通过与细胞膜上的G蛋白偶联的生长抑素受体(somatostatin receptors,SSTRs)结合而发挥其抑制细胞增殖的作用,因而生长抑素类似物(somatostatin analogue,SSA)常被用于肿瘤辅助治疗。然而,治疗效果存在相当大... 生长抑素(somatostatin,SST)通过与细胞膜上的G蛋白偶联的生长抑素受体(somatostatin receptors,SSTRs)结合而发挥其抑制细胞增殖的作用,因而生长抑素类似物(somatostatin analogue,SSA)常被用于肿瘤辅助治疗。然而,治疗效果存在相当大的个体差异,推测生长抑素类似物治疗效果不佳,与内源性生长抑素受体表达缺失或者表达量和亚型组合有关。为此,检测各亚型SSTR在几例罕见的神经内分泌肿瘤中的表达,并检测过表达SSTR2和SSTR5以及受体激活对细胞增殖的抑制效果,分析受体激活的可能机制,有助于临床筛选适合SSA肿瘤辅助治疗的病例,预估SSA的治疗效果。免疫组化检测肿瘤组织SSTR1-5的表达。在培养的293T细胞中过表达SSTR2和SSTR5,免疫共沉淀检测受体相互作用,免疫荧光和共聚焦显微镜检测受体细胞内定位。用MTT法检测受体过表达及激活对培养的人肺癌细胞NCI-H460细胞增殖的影响,用流式细胞技术检测细胞周期分布。SSTR1-5在10例神经内分泌肿瘤组织中均有不同程度的表达,表达亚型及表达量与肿瘤类型和年龄无关,SSTR5在所有肿瘤组织中均表达。SSTR2与SSTR5可形成受体相互作用。SSTR2与SSTR5活化后相互作用增加并定位于细胞质。共表达SSTR2和SSTR5显著抑制细胞增殖,并与受体激活剂呈现剂量相关性。SSTR2/SSTR5的共表达及激活显著减少S期的细胞而滞留于G1期。 展开更多
关键词 神经内分泌肿瘤 生长抑素 生长抑素受体 细胞增殖
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融合蛋白GSH-bFGF的构建、表达及体外活性检测 被引量:1
18
作者 陈霖 周天鸿 邹奕 《暨南大学学报(自然科学与医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期108-113,共6页
目的:设计构建和表达新型融合蛋白谷胱甘肽-碱性成纤维细胞生长因子(Glutathione-basic fibroblast growth factor,GSH-b FGF),并检测其体外抗氧化、抗衰老能力.方法:采用RT-PCR,酶切,连接,转化等分子克隆技术构建新型融合蛋白GSH-b FGF... 目的:设计构建和表达新型融合蛋白谷胱甘肽-碱性成纤维细胞生长因子(Glutathione-basic fibroblast growth factor,GSH-b FGF),并检测其体外抗氧化、抗衰老能力.方法:采用RT-PCR,酶切,连接,转化等分子克隆技术构建新型融合蛋白GSH-b FGF,并通过镍柱亲和层析、阳离子交换层析纯化该目的蛋白.通过CCK-8试剂盒检测GSH-b FGF对鼠源成纤维细胞NIH-3T3的促增殖活性.同时,经总抗氧化检测试剂盒检测GSH-b FGF的抗氧化能力.结果:克隆表达并纯化获得融合蛋白GSH-b FGF.CCK-8促增殖结果显示质量浓度为20 ng/m L的GSH-b FGF可显著促进鼠源成纤维细胞NIH-3T3增殖.体外抗氧化结果显示GSH-b FGF有显著的抗氧化活性,纯化得到的GSHb FGF蛋白的GSH浓度约为(0.06±0.02)μmol/L,抗氧化能力为(0.56±0.23)mmol/g.结论:新型融合蛋白GSHb FGF有显著的体外促增殖能力及抗氧化活性. 展开更多
关键词 谷胱甘肽-碱性成纤维生长因子 促增殖能力 抗氧化活性
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