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利用CRISPR/Cas9系统敲除斑马鱼bco1基因与bco1l基因
被引量：
1
1
作者
李文龙
冯永永
+1 位作者
李凯彬
聂湘平
《生态毒理学报》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第3期138-145,共8页
β-胡萝卜素-15,15'-加氧酶(β-carotene-15,15'-momoxygenase 1,bco1)是β-胡萝卜素转化成维生素A过程中的关键酶,bco1与bco1l是编码此酶的主要基因。本实验利用CRISPR/Cas9技术敲除斑马鱼的与β-胡萝卜素-15,15'-加氧酶...
β-胡萝卜素-15,15'-加氧酶(β-carotene-15,15'-momoxygenase 1,bco1)是β-胡萝卜素转化成维生素A过程中的关键酶,bco1与bco1l是编码此酶的主要基因。本实验利用CRISPR/Cas9技术敲除斑马鱼的与β-胡萝卜素-15,15'-加氧酶编码相关的基因bco1与bco1l,以便深入开展对斑马鱼bco1的功能研究。分别在斑马鱼bco1与bco1l基因2号外显子选取sg RNA识别位点,体外转录制备sg RNA并与Cas9 m RNA混合对斑马鱼Ⅰ细胞期受精卵进行显微注射,24 h后收集部分胚胎进行PCR检测并将PCR产物进行单克隆测序确定sg RNA的有效性,构建首建鱼,并在此基础上通过PCR检测、凝胶电泳及测序筛选可遗传突变体。本研究分别获得了bco1基因突变与bco1l基因突变,分析表明这些缺失和插入均可导致编码序列的移码,为研究鱼类胡萝卜素代谢及相关发育过程等后续研究提供了材料。
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关键词
β-胡萝卜素-15
15'-加氧酶
斑马鱼
CRISPR/Cas9技术
基因敲除
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职称材料
题名
利用CRISPR/Cas9系统敲除斑马鱼bco1基因与bco1l基因
被引量：
1
1
作者
李文龙
冯永永
李凯彬
聂湘平
机构
暨南大学生命科学技术学院生态系/水生生物研究中心
中国水产
科学
研究
院珠江水产
研究
所
出处
《生态毒理学报》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第3期138-145,共8页
基金
国家科技支撑计划项目:鱼类实验动物新资源的开发与标准化研究(2015BAI09B05)
文摘
β-胡萝卜素-15,15'-加氧酶(β-carotene-15,15'-momoxygenase 1,bco1)是β-胡萝卜素转化成维生素A过程中的关键酶,bco1与bco1l是编码此酶的主要基因。本实验利用CRISPR/Cas9技术敲除斑马鱼的与β-胡萝卜素-15,15'-加氧酶编码相关的基因bco1与bco1l,以便深入开展对斑马鱼bco1的功能研究。分别在斑马鱼bco1与bco1l基因2号外显子选取sg RNA识别位点,体外转录制备sg RNA并与Cas9 m RNA混合对斑马鱼Ⅰ细胞期受精卵进行显微注射,24 h后收集部分胚胎进行PCR检测并将PCR产物进行单克隆测序确定sg RNA的有效性,构建首建鱼,并在此基础上通过PCR检测、凝胶电泳及测序筛选可遗传突变体。本研究分别获得了bco1基因突变与bco1l基因突变,分析表明这些缺失和插入均可导致编码序列的移码,为研究鱼类胡萝卜素代谢及相关发育过程等后续研究提供了材料。
关键词
β-胡萝卜素-15
15'-加氧酶
斑马鱼
CRISPR/Cas9技术
基因敲除
Keywords
β-carotene-15,15＇ -oxygenase
Danio redo
CRISPR/Cas9 system
knockout
分类号
X171.5 [环境科学与工程—环境科学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
利用CRISPR/Cas9系统敲除斑马鱼bco1基因与bco1l基因
李文龙
冯永永
李凯彬
聂湘平
《生态毒理学报》
CAS
CSCD
北大核心
2018
1
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